ЖУРНАЛ ВЫСШЕЙ НЕРВНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ, 2013, том 63, № 5, с. 589-596
= МЕТОДИКА
УДК 612.6.052 +577.1
АКТИВНАЯ СТРАТЕГИЯ ПОВЕДЕНИЯ КАК ФАКТОР РИСКА ДЕПРЕССИВНОПОДОБНЫХ НАРУШЕНИЙ ПОСЛЕ ХРОНИЧЕСКОГО УМЕРЕННОГО СТРЕССА
© 2013 г. Е. П. Виноградова1, В. В. Немец1, Д. А. Жуков2
1Кафедра высшей нервной деятельности и психофизиологии Санкт-Петербургского
государственного университета, 2 Лаборатория сравнительной генетики поведения Института физиологии им. И.П. Павлова РАН, Санкт-Петербург, e-mail: katvinog@yahoo.com Поступила в редакцию 10.06.2012 г. Принята в печать 19.10.2012 г.
Исследован эффект хронического умеренного непредсказуемого стресса на поведение крыс с противоположными стратегиями поведения — активной и пассивной. В популяции аутбредных животных были выделены особи с противоположной стратегией поведения на основании теста условного рефлекса активного избегания (УРАИ). Животные двух групп были подвергнуты хроническому умеренному стрессу в течение 30 дней и протестированы на проявление депрес-сивноподобного поведения (тест вынужденного плавания и тест потребления 32%-ного раствора сахарозы). Также проводилась оценка уровня тревожности (тест приподнятый крестообразный лабиринт) и оценивалась способность к обучению (тест УРАИ). На основании поведенческих тестов было показано, что депрессивноподобное поведение после хронического умеренного стресса в большей степени проявляется у животных с активной стратегией поведения.
Ключевые слова: депрессивноподобное состояние, хронический умеренный стресс, стратегия поведения.
Active Coping Style as a Risk Factor of Depressive-Like Disorders
after Cronic Mild Stress
Е. P. Vinogradova, V. V. Nemets, D. A. Zhukov
Department of Higher Nervous Activity and Psychophysiology, State University, St. Petersburg; Department of Comparative Behavioural Genetics, Pavlov Institute of Physiology, St. Petersburg,
e-mail: katvinog@yahoo.com
Effect of chronic mild uncontrollable stress on behaviour was studied on rats with opposite behavioural coping styles — active and passive. In a population of outbred animals, specimens with opposite coping style of behaviour were selected based on their reactions in the active avoidance (AA) test. Both groups were subjected to chronic mild stress during 30 days and tested for depressive behaviour (forced swim test, 32% glucose solution consumption test), anxiety (elevated plus maze) and learning (AA test). The behavioural test showed that depressive behaviour after chronic mild stress is more common in animals with active behaviour strategy.
Keywords: learned helplessness, chronic mild stress, coping style. DOI: 10.7868/S0044467713050109
Первичная депрессия является самым распространенным психическим заболеванием на планете в XXI веке [28]. Наибольшую опасность представляет не реактивная де-
прессия, развивающаяся в результате однократного эмоционального потрясения, а депрессия [24], формирующаяся в результате хронического умеренного неконтролируемо-
го стресса или стресса повседневности, когда человек ежедневно подвергается неблагоприятным разномодальным воздействиям внешней среды, характер и вероятность возникновения которых он не может предсказать. Известно, что даже после попадания в сходную острую стрессорную ситуацию депрессия развивается не у всех особей. Возникновение сердечно-сосудистых заболеваний зависит от особенностей психотипа человека [10]. Можно предположить, что и вероятность возникновения депрессии может коррелировать с особенностями генетически детерминированного психотипа [24].
Распространенной моделью депрессии человека является состояние выученной беспомощности, которое формируется у животных, подвергнутых хроническому неконтролируемому стрессу [25—27]. Однако работы, в которых неконтролируемому стрессу подвергали животных с генетически детерминированными различными стратегиями поведения, единичны. Известно, что линии крыс, селектированные по противоположным стратегиям поведения, — активной и пассивной — проявляют различную чувствительность к неконтролируемому стрессу. У животных с активной стратегией поведения после неконтролируемого воздействия (электроболевое раздражение) развивается депрессивноподобное состояние. В то же время у крыс с пассивной стратегией поведения неконтролируемый стресс вызывает повышение тревоги и ряд других изменений в поведении и физиологических характеристиках, но не депрессивно-подобное состояние [29].
Данные, полученные на генетически селектированных животных, строго говоря, можно экстраполировать только на использованные в экспериментах линии животных. Поэтому мы поставили задачу проверить ранее полученные закономерности на популяции аутбредных крыс. Внутри этой популяции группы с активной и пассивной стратегией поведения формировали по фенотипу.
Таким образом, задачей настоящей работы было изучение влияния стратегии поведения аутбредных крыс на возникновение депрес-сивноподобного состояния после хронического умеренного неконтролируемого стресса.
МЕТОДИКА
Все опыты проводили в соответствии с международными нормами этического обращения с животными [6].
Опыты проводили на 80 самцах крыс Ви-стар со средней массой 170 ± 20.5 г в возрасте 2 мес. на момент начала эксперимента. Животных содержали в стандартных условиях при свободном доступе к пище (сухой комбикорм для грызунов) и воде по 5 особей в клетке. Перед началом опытов животных подвергали процедуре хэндлинга [1].
Для отбора крыс с активной и пассивной стратегиями поведения использовался тест условного рефлекса активного избегания (УРАИ). Выбор данного теста был обусловлен тем, что генетическая селекция крыс с активной и пассивной стратегией поведения — Римских, Колтушских и Сиракузских линий — проводилась на основании теста УРАИ [3].
Установка для выработки УРАИ представляет собой камеру с токопроводящим полом из медных прутьев. Процесс выработки УРАИ начинается через 5 мин после помещения животного в камеру. Длительность условного сигнала (звук) составляет 4 с, затем к нему присоединяется безусловное подкрепление в виде электрического тока (сила тока 150—200 мкА) на 6 с. Для каждой крысы производится 30 предъявлений за один день, промежутки времени между предъявлениями составляли 20—30 с. Обучение проводилось в течение 2 дней подряд. Регистрировали количество реакций избегания, избавления и неуходов. На основании выработки УРАИ и в первой и во второй сериях экспериментов было отобрано по 20 крыс, которые принимали участие в эксперименте (по 10 крыс с активной стратегией поведения — группа "А", и по 10 крыс — с пассивной стратегией поведения группа "Б"). Животные были отобраны по количеству реакций избегания. Крысы группы "А" имели самое большое количество избеганий, крысы группы "Б" — самое низкое.
Через 10 дней после окончания выработки УРАИ проводили измерение потребления раствора сахарозы. Снижение потребления сладких растворов свидетельствует об агедо-нии [19, 20] В течение 3 дней животных на 30 мин отсаживали в одиночную клетку, где им предоставлялся 32%-ный раствор сахарозы, количество выпитого раствора оценивалось в граммах с помощью взвешивания бутылки с раствором до и после теста. За уро-
УРАИ 10 дней Потребление 1 день ПКЛ 3 дня Тест Порсолта 1 день
2 дня сахарозы 3 дня 1 день
II
III
Тест Порсолта 1 день 2 дня ПКЛ 2 дня Потребление 3 дня УРАИ
1 день сахарозы 1 день 1 день
Схема проведения эксперимента. I — порядок и длительность поведенческих тестов до стресса; II — длительность стрессорной процедуры; III — порядок и длительность поведенческих тестов после стресса; УРАИ — выработка условного рефлекса активного избегания, ПКЛ — тест "приподнятый крестообразный лабиринт".
Experiment procedure. I — behaviors test before stress; II — stress; III — behaviors test after stress; УРАИ — shuttle box, ПКЛ — plus-maze.
вень потребления сахарозы принимали уровень потребления сахарозы на 3-й день тестирования. В исследованиях по изучению развития агедонии как следствия действия самых разнообразных неблагоприятных факторов используют концентрации сахарозы в пределах от 1.8 до 32% [2, 8, 15, 16, 18]. Поскольку при исследовании влияния острого стресса на развитие агедонии на животных линий КНА и KLA мы ранее использовали раствор сахарозы в концентрации 32%, то для возможности сравнения влияния острого и хронического стресса в настоящей работе была использована та же концентрация.
Через сутки животных тестировали в приподнятом крестообразном лабиринте (ПКЛ). В настоящее время этот тест считается наиболее адекватным для оценки тревожности. Тревожность, определяемая по данной методике, отражает естественный страх высоты и открытых пространств у грызунов. Процент времени пребывания в открытых рукавах лабиринта отражает уровень тревожности животного: увеличение времени пребывания в открытых рукавах свидетельствует об уменьшении тревожности. Животное помещали в центр ПКЛ носом к открытому рукаву. Всех животных сажали носом в одну и ту же сторону. Время тестирования 5 мин. Регистрировали время пребывания в открытых и закрытых рукавах и в центре ПКЛ и время, в течение которого животное находится в движении; количество вертикальных стоек, заходов в ру-
кава лабиринта и пересеченных квадратов, а также число и длительность реакций грумин-га, свешивания с открытых рукавов ПКЛ, число болюсов. Время тестирования составляло 5 мин. После тестирования каждого животного лабиринт протирали раствором перекиси водорода для уничтожения запаха. Тестирование проводили с 13:00 до 17:00 часов.
Для выявления уровня депрессивности животных использовали тест Порсолта, который проводили через 3 дня после теста ПКЛ. Установка представляла собой стеклянный цилиндр диаметром 20 см при высоте 45 см. Цилиндр заполняли водой на 2/3 так, чтобы крыса плавала в "стакане" и при этом не имела возможности ни выбраться, ни дотянуться лапами до дна. Время тестирования составляло 6 мин. Регистрировалось время неподвижности крысы (когда крыса замирает и не делает никаких движений, кроме легких движений хвоста для поддержания равновесия тела).
Каждый п
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.