PRECLINICAL EVALUATION OF IMMUNOTROPIC ACTION DEVELOPED EXPERIMENTAL SAMPLE OF PROBIOTIC DRUG BALLACK AS PART TRANSDERMAL THERAPEUTIC SYSTEMS
Zabokritskiy N. A.12, Larionov L. P.1, Yushkov B. G.2, Kiseleva A. A.1
'Ural State Medical University; 2Institute of Immunology and Physoilogy of the Ural Branch of the Russian Academy of Sciences, Ekaterinburg, Russia
The article is devoted to the study of immunotropic action designed bicomponent probiotic drug bacilact in soft medicinal forms (on the basis of title, epiderm and organosilicontitanium glycerohydrogels) on quantitative changes of parameters of humoral immunity and the level of cytokines in the treatment of purulent localized infection of the skin of animals, caused by Staphylococcus aureus. Thus, in particular, an increase of phagocytic activity of peripheral blood neutrophils and peritoneal macrophages (in average 2 times), increased the quantitative content of T- and B-lymphocytes (in 1,5-2 times), titles of immunoglobulins A and G were increased by 2 times, less significantly increased the number of immunoglobulin E and M, of Special interest is the increase of credits alpha-interferon and receptor antagonist of interleukin-1 in all groups of experimental animals, which were treated with the experimental samples of the drug bacilact (regardless of transcutaneous explorer). Studies on the evaluation of the immune status of animals tested with purulent localized infection of the skin caused by S. aureus, the treatment of which is spent examinees gel preparations, allows to conclude that they have a pronounced immunomodulating properties. More significant effects observed for bacilact, based title and organosilicontitanium glycerohydrogels.
Key words: probiotic, bacilact, tisol, eftiderm, organosilicontitanium glycerohydrogels, construction and preclinical evaluation
АКТИВНОСТЬ КОМБИНАЦИИ ДИПЕПТИДА ГЛУТАМИЛ-ТРИПТОФАНА С ГЛИЦИРРИЗИНОВОЙ КИСЛОТОЙ ПРОТИВ РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСОВ ЧЕЛОВЕКА
Зарубаев В.В.1, Смирнов В.С.2, ГаршининаА.В.1, Штро А.А.1
ФГБУ НИИ гриппа; 2ЗАО Цитомед, Санкт-Петербург, Россия
Грипп представляет собой высоко контагиозное заболевание человека. Недостатком этио-тропных препаратов для его лечения является снижение их эффективности при позднем начале лечения. Кроме того, к этиотропным препаратам вирус способен быстро вырабатывать устойчивость. Поиск и разработка новых средств терапии гриппозной инфекции является важной задачей медицинской науки. В работе изучена противовирусная активность дипеп-тида глутамил-триптофана (Е'Ш) и глицирризиновой кислоты ^А) при экспериментальной летальной гриппозной инфекции белых мышей. Применение обоих препаратов приводило к снижению специфической смертности (до 77%) и повышению продолжительности жизни животных. Показана также способность изученных соединений к нормализации структуры легочной ткани и к цитопротекторному действию в отношении клеток бронхиального эпителия. Эти закономерности были подтверждены при использовании вирусов гриппа А/ АкЫ/2/68 (Н3№), А/СаЦ£огша/07/09 (НШ1) рёш09 и осельтамивир- устойчивого штамма вируса А/Владивосток/2/09 (НШ1). Продемонстрирована способность Е'Ш'^А к стимуляции продукции интерферона в сыворотке крови животных. На модели аденовирусной инфекции показано, что использование Е'Ш'^А снижало титры вируса на 0,6-1,2 порядка, а также к нормализации структуры печени животных как на уровне световой микроскопии, так и на ультраструктурном уровне. Вместе взятые, полученные результаты позволяют рассматривать комбинацию Е'Ш'^А как перспективное средство терапии респираторных вирусных инфекций и говорить о комплексном механизме его противовирусной активности.
Ключевые слова: противовирусная активность, дипептид глутамил-триптофана, глицир-ризиновая кислота, грипп
Тематический выпуск «Российский научный форум на Урале»
685
Грипп представляет собой высоко контагиозное заболевание человека. Ежегодно гриппом на планете переболевает 500 млн. человек, умирает около 2 млн. [1]. Вирус гриппа вызывает ежегодные эпидемии, а при появлении нового антигенного варианта вируса - пандемии, охватывающие все регионы земного шара и характеризующиеся высокой заболеваемостью и смертностью среди всех возрастных групп населения. Пандемия гриппа А (НШ1) рёш09 характеризовалась широким охватом населения многих стран мира, в том числе Российской Федерации, тяжелым клиническим течением и высокой летальностью [2, 3]. В последние годы отмечены также случаи инфицирования человека вирусами гриппа птичьего происхождения подтипов Н5Ш, Н7Ш и Н7Ш.
Международно признанными противогриппозными этиотропными препаратами являются химические соединения двух групп -производные адамантана (амантадин и его аналог в России - ремантадин) [4] и ингибиторы вирусной нейраминидазы - осельтамивир (Тамифлю®) и занамивир (Реленца®). В США и Японии используются также перамивир (Ра-пиакта®) и ланинамивир (Инавир®) [5].
Недостатком этиотропных препаратов является снижение их эффективности при позднем начале лечения. Они эффективны в первые 48 часов после появления клинических симптомов болезни. Кроме того, к этио-тропным препаратам вирус способен быстро вырабатывать устойчивость. С середины 90-х годов, например, отмечен рост доли ремантадин-устойчивых вирусов, и на сегодняшний день практически все изоляты вируса гриппа устойчивы к препаратам адамантанового ряда. То же было отмечено в пределах подтипа сезонного гриппа А (НШ1), когда за полтора года (с ноября 2007 по март 2009 г.) уровень устойчивости к осельтамивиру вырос с 0% до 100% во всех регионах земного шара. Осельтамивир-устойчивые штаммы отмечены также среди изолятов высокопатогенных вирусов гриппа птиц Н5№ и Н7№, а кроме того, описаны случаи формирования лекарственно-устойчивых вариантов вируса непосредственно в процессе терапии пациентов [6, 7].
Когда речь идет о случаях тяжелого гриппа, включающих последствия цитокиново-го шторма, или поздних стадий болезни, для уменьшения тяжести заболевания применяют
препараты, снижающие остроту реактивных процессов, которые индуцируются вирусом, но реализуются механизмами хозяина. К ним следует отнести отек легких, токсический синдром, гиперпродукцию провоспалительных цитокинов, клеточную воспалительную инфильтрацию легких, геморрагический синдром и т.п. Препараты этой группы не влияют на вирусную репродукцию, а представляют собой средства патогенетической терапии.
Мы исследовали исследование противовирусной активности дипептида глутамил-триптофана (EW) и глицирризиновой кислоты ^А) в комбинации и в виде монопрепаратов при инъекционном и пероральном применении на модели экспериментальной летальной гриппозной инфекции белых мышей, вызванной вирусом гриппа А/А1сЫ/2/68 (Н3№). Применение обоих препаратов приводило к снижению специфической смертности (индекс защиты до 77%) и повышению продолжительности жизни животных. В ряде случаев защитный эффект препаратов превосходил таковой для препарата сравнения - ремантадина. Применение GA не влияло на репродукцию вируса в ткани, однако использование EW в дозах 10 и 1000 мкг/кг приводило к достоверному снижению инфекционной активности вируса в легких, причем ингибирующий эффект был более выражен, если EW использовался в виде монопрепарата, а не в комбинации с GA.
При помощи морфологического анализа показана способность изученных соединений к ограничению признаков вирусспецифиче-ского и реактивного поражения ткани легких на острой стадии гриппозной пневмонии, что проявлялось ограничением протяженности очагов пневмонии, снижением степени отека легких и воспалительной клеточной инфильтрации ткани. Кроме того, на стадии хронической постгриппозной пневмонии использование EW-GA приводило к ограничению размеров очагов, нормализации структуры легочной ткани, в том числе повышению степени воздушности респираторных отделов, повышением количества и сохранностью эластического каркаса легочной ткани. При помощи морфометрического анализа показана способность комбинации EW-GA к цитопро-текторному действию в отношении клеток бронхиального эпителия.
Эти же закономерности были подтверждены при использовании осельтамивир-ус-
тойчивого штамма вируса А/Владивосток/ 2/09 (Н1Ы1).
Кроме того, была продемонстрирована способность EW-GA к стимуляции продукции интерферона в сыворотке крови инфицированных животных. Уровни интерферона составили 44, 38 и 66 МЕ/мл у контрольных животных, животных, получавших Тамифлю и EW-GA, соответственно.
На модели диссеминированной аденовирусной инфекции показано, что использование EW-GA снижало репликативную активность вируса на 0,6-1,2 ^ТСГО50/20 мг ткани. Показано, что GA и комбинация GL+EW приводили к нормализации структуры печени инфицированных животных как на уровне световой микроскопии, так и на ультраструктурном уровне.
Вместе взятые, полученные результаты позволяют рассматривать комбинацию EW-GA как перспективное средство терапии респира-
торных вирусных инфекций и говорить о комплексном механизме его противовирусной активности.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. http://www.who.int/mediacentre/factsheets/2003/ fs211/en/
2. Arias C. F., Escalera-Zamudio M., de los Dolores Soto-Del Rio M., Cobian-Gtiemes A.G., Isa P., Lopez S. Archives of Medical Research. 2009, 40, 643-654.
3. Gill J. R., Sheng Z. M., Ely S. F., Guinee D. G. Jr., et al. Arch. Pathol. Lab. Med. 2010, 134, 235-243.
4. Scholtissek C., Quack G., Klenk H. D., Webster R. G. Antiviral Res. 1998, 37, 83-95.
5. Vavricka C. J., Li Q., Wu Y., Qi J., Wang M., Liu Y., et al. PLoS Pathog. 2011, 7, e1002249.
6. Dixit R., Khandaker G., Ilgoutz S., Rashid H., Booy R. Infect. Disord. Drug Targets 2013, 13, 1, 34-45.
7. Hay A. J., Hayden F. G. Lancet 2013, 381, 9885, 2230-2232.
THE ACTIVITY OF COMBINATION OF DIPEPTIDE GLUTAMYL-TRYPTOPHANE WITH GLYCIRRHIZIC ACID AGAINST HUMAN RESPIRATORY VIRUSES
Zarubaev V. V.1, Smirnov V. S.2, Garshinina A. V.1, Shtro A. A.1
'Influenza Research Institute; 2Cytomed Ltd., St. Petersburg, Russia
Influenza is a highly contagious human disease. The disadvantage of etiotropic antivirals is dramat
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.