ФИЗИОЛОГИЯ ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕКА
УДК 615.214:577.112.6
ЭФФЕКТЫ НЕОНАТАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ ФЛУВОКСАМИНА БЕЛЫМ КРЫСАМ И ИХ КОРРЕКЦИЯ ПРЕПАРАТОМ СЕМАКС
© 2014 г. М. А. Володина*, С. А. Мерчиева*, Е. А. Себенцова**, Н. Ю. Глазова**, Д. М. Манченко*, Л. А. Андреева**, Н. Г. Левицкая**, А. А. Каменский*, Н.Ф. Мясоедов**
*Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, биологический ф-т, 119991 Москва, Ленинские горы, 1, стр. 12 **Институт молекулярной генетики РАН,123182Москва, пл. Курчатова, 2 E-mail: nglevitskaya@gmail.com Поступила в редакцию 09.08.2013 г.
Исследованы отсроченные эффекты хронического неонатального введения селективного ингибитора обратного захвата серотонина флувоксамина (ФА) детенышам белых крыс и возможность коррекции этих эффектов введением семакса. Показано, что ФА вызывает замедление соматического роста животных. Отмечено, что отставание по массе тела наблюдается как на фоне введения ФА, так и через 4—6 нед после последней инъекции. Установлено, что введение ФА приводит к повышению тревожности и ухудшению способности к обучению животных, а семакс в значительной степени компенсирует негативные последствия такого введения.
DOI: 10.7868/S0002332914030151
Ранний неонатальный период жизни играет важную роль в развитии и становлении нервной системы и физиологических функций организма. Стрессогенные или фармакологические воздействия на данном этапе развития могут привести в дальнейшем к значимым структурным и функциональным изменениям. Показано, что болевые воздействия и стресс, перенесенные новорожденными детьми, приводят впоследствии к нарушениям развития нервной системы и значительным изменениям поведения (Anand, 2000).
Селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (selective serotonin reuptake inhibitors (SSRI)) — группа препаратов (флуоксетин, цита-лопрам, флувоксамин, пароксетин, сертралин и др.), широко используемых для лечения депрессивных и тревожных расстройств. Мишенью действия SSRI является транспортер серотонина (SERT), отвечающий за обратный захват серотонина из синаптической щели. Блокада SERT приводит к возрастанию серотонинергической ней-ротрансмиссии. Все SSRI действуют по аналогичному механизму, несмотря на различия в химической структуре (Diav-Citrin, Ornoy, 2012).
Препараты группы SSRI рекомендуются для лечения депрессивных расстройств у беременных и кормящих женщин. Кроме того, увеличивается применение антидепрессантов в детской психиатрии. Как следствие, возрастает число детей, получавших SSRI либо во время внутриутробного развития, либо с молоком матери, либо непосред-
ственно при лечении детских депрессий (Maciag et al., 2006а, б). Показано, что препараты этой группы хорошо проникают через плацентарный барьер и определяются в амниотической жидкости (Casper et al., 2011). Содержание SSRI в пупо-винной крови составляет от 70 до 86% его содержания в крови матери для различных антидепрессантов этой группы, т.е. плод подвергается воздействию физиологически активных доз препаратов (Rampono et al., 2009).
Несмотря на увеличение числа женщин, применявших SSRI в период беременности, данных о последствиях пренатального воздействия этих препаратов недостаточно. В ряде исследований показано влияние применения SSRI на исход беременности — увеличение числа спонтанных выкидышей и преждевременных родов, снижение веса новорожденных (Oliver et al., 2011). У 30% новорожденных, получавших пренатально SSRI, отмечаются признаки неонатального абстинентного синдрома (Marsella et al., 2010). Кроме того, воздействие SSRI в период беременности (особенно последнего триместра) приводит к снижению у новорожденных балла по шкале АПГАР, задержке психомоторного развития, нарушениям сна, легочной гипертензии, сердечно-сосудистым нарушениям (Casper et al., 2003, 2011; Oliver et al., 2011; Diav-Citrin, Ornoy, 2012). Наблюдения за детьми, получавшими пренатально SSRI, проводились в большинстве случаев в ранний период жизни (до 6 лет). Сведения об отсроченных эф-
фектах пренатального воздействия SSRI ограничены, что связано с долговременностью и сложностью проведения таких исследований в клинике (Oliver et al., 2011; Harris et al., 2012).
Долговременные последствия воздействия препаратов группы SSRI на развивающийся мозг активно исследуются в экспериментах на животных, главным образом на грызунах. Критический период развития центральной нервной системы (ЦНС) человека, когда она наиболее чувствительна к действию SSRI, — третий триместр беременности. Хотя сложно провести корректное сравнение развития мозга человека и грызунов, данные по созреванию ЦНС позволяют сопоставить последний триместр беременности у человека с первыми неделями жизни крыс (Karpova et al., 2009; Thompson et al., 2009). Поэтому неонатальное воздействие SSRI в течение первых недель жизни крыс можно рассматривать как модель для изучения эффектов пренатального воздействия препаратов этой группы в течение III триместра беременности у женщин (Lee, Lee, 2012).
Эксперименты показали, что хроническое введение SSRI крысам и мышам в неонатальный период приводит к долговременным изменениям поведения животных. Раннее хроническое введение SSRI вызывало в дальнейшем увеличение длительности иммобилизации в тесте "принудительное плавание" (Hansen et al., 1997), снижение исследовательского поведения и повышение тревожности мышей во взрослом возрасте (Karpova et al., 2009; Lee, Lee, 2012). Аналогичные изменения поведения характерны для линии мышей с генетически обусловленным дефицитом экспрессии SERT. Кроме того, неонатальное введение SSRI влияло на пищевое поведение животных и поведение в условиях повышенной стрессорной нагрузки (Ansorge et al., 2004), а также вызывало ангедонию (Popa et al., 2008). У взрослых животных, получавших инъекции SSRI в ранний период развития, отмечалось снижение экспрессии триптофангидроксилазы (фермента, отвечающего за синтез серотонина) в дорзальном ядре шва и SERT в медиальной префронтальной коре и в первичной соматосенсорной коре (Maciag et al., 2006б). Следовательно, неонатальное введение SSRI животным приводит в дальнейшем к изменению активности серотонинергической системы мозга, что может быть одним из механизмов развития отсроченных поведенческих эффектов этих препаратов.
Флувоксамин (Fluvoxamine (ФА)) — современный антидепрессант из группы SSRI, который по фармакологическим свойствам близок к флуок-сетину, но отличается высокой эффективностью и селективностью (Hrdina, 1991). ФА способству-
ет усилению серотонинергической передачи и уменьшению кругооборота серотонина. Эффекты неонатального введения ФА ранее не исследовались.
Гептапептид семакс (MEHFPGP) — аналог фрагмента адренокортикотропного гормона АКТГ(4-10), оказывающий пролонгированное нейротропное действие (Ashmarin et al, 1995; Do-lotov et al., 2006). В настоящее время семакс используется в медицине в качестве ноотропного и нейропротекторного препарата (Ашмарин и др., 1997). Эксперименты показали, что хроническое неонатальное введение семакса детенышам крыс приводит в дальнейшем к снижению тревожности и улучшению способности животных к обучению (Себенцова и др., 2005). Семакс вызывает увеличение содержания серотонина и его метаболита в мозге, что свидетельствует об увеличении функциональной активности серотонинергиче-ской системы мозга (Eremin et al., 2005).
Цель работы — исследование отсроченных эффектов хронического неонатального введения ФА детенышам белых крыс и оценка возможности коррекции этих эффектов введением семакса.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Работа проводилась на детенышах нелинейных белых крыс обоего пола. Всего в работе использовалось 10 выводков животных (по 34—38 крыс в каждой группе). Каждый выводок делили на три группы. Животным группы "контроль" с 1-х по 14-е постнатальные сутки (ПНС) внутрибрю-шинно (в/б) вводили воду для инъекций в объеме 2 мл/кг массы тела, с 15-х по 28-е ПНС — интра-назально (и/н) воду для инъекций в объеме 0.1 мл/кг массы тела. Крысам группы "ФА" с 1-х по 14-е ПНС вводили в/б ФА (флувоксамин малеат, Sigma, США) в дозе 10 мг/кг массы тела, с 15-х по 28-е ПНС — и/н воду. Крысам группы "ФА-се-макс" с 1-х по 14-е ПНС вводили в/б ФА в дозе 10 мг/кг, с 15-х по 28-е ПНС — и/н семакс в дозе 0.05 мг/кг массы тела (рис. 1).
Для оценки физического развития крысят регистрировали возраст открытия глаз и массу тела животных в течение первого месяца жизни 1 раз в сутки, в течение второго месяца — 1 раз в неделю. Для оценки уровня тревожности на 31-е сутки жизни крыс тестировали в "приподнятом крестообразном лабиринте", для оценки способности к обучению с 42-х по 46-е сутки жизни проводили выработку условного пищедобывательного рефлекса на место в сложном пищевом лабиринте.
Тест 2 "приподнятый крестообразный лабиринт". Экспериментальная камера лабиринта состояла из четырех расходящихся из центра рука-
16
о
В
15
Рис. 1. Влияние флувоксамина на возраст открытия глаз. 1 — контроль, 2 — группа "ФА", 3 — группа "ФА-семакс"; для рис. 1—4. *— значимые отличия от контроля р < 0.05.
вов (длина рукавов — 50, ширина — 15, высота стенок — 30 см). Два противоположных рукава были затемнены и закрыты стенками с торцов, два других были освещены и открыты. Лабиринт устанавливался на высоте 55 см от пола. Крысу помещали в центр лабиринта, и в течение 3 мин регистрировали время нахождения на открытых рукавах и число выходов из закрытых рукавов лабиринта.
Тест "выработка условного пищедобывательно-го рефлекса на место в сложном лабиринте". Сложный лабиринт представлял собой квадратную камеру, разделенную пятью прозрачными перегородками на шесть коридоров. В каждой пере-
городке имелось прямоугольное отверстие. Перед экспериментом животных подвергали 24-часовой пищевой депривации. В первые сутки крысы находились в лабиринте 30 мин для адаптации. В последующие 4 сут животных помещали в лабиринт по 5 раз подряд ежесуточно, причем длительность каждой посадки не превышала 3 мин. Ежесуточно регистрировали латентный период выхода из стартового отсека, число выполненных реакций (число случаев, когда животные в течение 3 мин находят п
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.