научная статья по теме ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 1-МЕТИЛ-2-МЕРКАПТОИМИДАЗОЛА В ПРЕПАРАТЕ “МЕРКАЗОЛИЛ” Химия

Текст научной статьи на тему «ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 1-МЕТИЛ-2-МЕРКАПТОИМИДАЗОЛА В ПРЕПАРАТЕ “МЕРКАЗОЛИЛ”»

ЖУРНАЛ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ХИМИИ, 2007, том 62, № 3, с. 295-297

^=ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

УДК 543.545:547.783.9.

ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 1-МЕТИЛ-2-МЕРКАПТОИМИДАЗОЛА В ПРЕПАРАТЕ "МЕРКАЗОЛИЛ"

© 2007 г. М. С. Черновьянц, Е. В. Хохлов, Е. О. Лыкова, А. О. Долинкин

Ростовский государственный университет, химический факультет 344090 Ростов-на-Дону, ул. Зорге, 7 Поступила в редакцию 17.05.2005 г., после доработки 31.01.2006 г.

Разработаны оптимальные условия (ацетатный буфер, рН = 4.50, и = 20 кВ) количественного определения 1-метилимидазолин-2-тиона с использованием системы капиллярного электрофореза "Капель 103-Р". Методика позволяет оценить содержание вещества в диапазоне концентраций 1.5 х 10-41.8 х 10-3 М (ПРО = 4.6 х 10-5 М, sr = 0.025). Проведен анализ таблеток "Мерказолил" фирмы "Акрихин", г. Москва и "Мерказолил" фирмы "Здоровье" г. Харьков.

Гетероциклические тиоамиды, проявляющие антитиреоидную активность и образующие комплексы переноса заряда (КПЗ) с молекулярным иодом, интенсивно исследуются учеными разных стран, причем особое внимание уделяется биохимическим и клиническим аспектам исследования [1-3]. Используемый в лечебной практике при болезни Грейвса 1-метилимидазолин-2-тион (1-ме-тил-2-меркаптоимидазол, метимазол, мерказолил, ММ1) ингибирует образование гормонов щитовидной железы трииодтиронина и тетраиодтиронина, блокируя метаболизм иода [4-6]. Высокая реакционная способность 1-метилимидазолин-2-тиона по отношению к молекулярному иоду приводит в зависимости от условий и соотношения компонентов к формированию соединений различного состава: от молекулярных аддуктов (ММ1 • 1(2)я) до

иодониевых солей [ММ1-1-ММ1]+12п + 1 , а также продукта окисления - бис[1-метилимидазол-2]ди-сульфида [7-9]. Поэтому значительный интерес вызывает координационная химия имидазо-лин(имидазолидин)-2-тионов и их производных [10]. Колебательная спектроскопия, в том числе низкочастотная Рамановская, тиоамидов и их КПЗ с молекулярным иодом описана в работах [11-13].

В зарубежной научной литературе широко представлены хроматографические методы определения 1-метилимидазолин-2-тиона. Анализ ММ1 в щитовидной железе выполнен методом ВЭЖХ с масс-спектроскопическим детектором [14]. Метод ВЭЖХ с УФ-детекторованием описан в работах [15-18]. Предложена [19-21] методика определения метимазола методом газовой хроматографии с термоэлектронным ^Р детектором, в качестве контролирующего метода выбрано сочетание газовой хроматографии с масс-спектро-скопией. Описана методика [22] проточно-инжек-ционного (ПИА) определения метимазола с хемо-

люминесцентным детектором, базирующаяся на ингибирующем действии последнего на катализируемую медью(П) хемолюминесцентную реакцию люминола с H2O2. Описано использование ПИА со спектрофотометрическим детектором для определения метимазола [23]. Предложена [24] методика кинетического определения метимазола и других антитиреоидных препаратов, основанная на ингибировании каталитического действия палладия(П) на реакцию между пиронином G и гипофосфит-ионами. Известны методики определения метимазола с помощью дифференциальной импульсной [25] и переменнотоковой [26] полярографии.

В отечественных журналах опубликованы методики титриметрического [27, 28] и полярографического [29] определения препарата.

Метод капиллярного электрофореза (КЭФ) является одним из доступных современных высокочувствительных, удобных и экспрессных в исполнении и обработке результатов анализа. Поэтому представляется целесообразным разработка методики определения 1-метилимидазолин-2-тиона методом КЭФ и ее апробация в анализе лекарственного препарата антитиреоидного действия "Мерказолил".

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Электрофоретическое определение методом внешнего стандарта проводили, используя систему капиллярного электрофореза "Капель-103Р". Сбор и обработку данных проводили с помощью IBM PC с программным обеспечением "Мультихром". Использовали немодифицированный кварцевый капилляр с внутренним d = 75 мкм, l = 60 см (эффективная длина 50 см). Ведущий электролит - ацетатный буферный раствор (рН - 4.50). Рабочее напряжение (20 кВ) было постоянным во всех

296

ЧЕРНОВЬЯНЦ и др.

Результаты определения метимазола методом капиллярного электрофореза и методом косвенной прото-литометрии (п = 6, Р = 0.95)

ЛФ Содержание ^Ф Титриметри-чески

мг/табл. найдено мг/табл. sr найдено мг/табл. sr

1 5.0 ± 0.5 5.05 0.025 4.97 0.0072

2 5.0 ± 0.5 5.13 0.024 5.04 0.0070

экспериментах. Перед анализом капилляр последовательно промывали по 10 минут 1 М HCl, биди-стиллятом, 0.5 M NaOH, бидистиллятом и ведущим электролитом. Между экспериментами капилляр промывали 3 мин фоновым электролитом. Для регистрации сигналов использовали прямое фотометрическое детектирование при 253.7 нм.

Градуировочный график линеен в интервале 0.15-1.75 мМ. Растворы для построения графика готовили разбавлением исходного 1.75 мМ раствора. Уравнение градуировочного графика имеет вид S = 786.3c + 24.21, где c - концентрация метимазола (мМ); S - площадь хроматографическо-го пика.

ЯМР ХН - спектры регистрировали на спектрометре DPX-250 фирмы "Bruker". ИК-спектры снимали на приборе "Perkin Elmer FT/IR Spectrum 1000", в виде таблеток в KBr.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В растворах гетероароматических тионов возможно тиоамид-тиоиминольное таутомерное равновесие [30]. Индивидуальные особенности ПМР спектра дейтерохлороформного раствора MMI свидетельствуют о присутствии тиоамида исключительно в тионной форме. Спектр ЯМР ХН (CDCl3), 5, м.д.: 3.59 (с., 3Н, СН3), 6.67 (д., 1Н, J4 5 = = 2.35 Гц, 5-Н), 6.71 (д., 1Н, J4, 5 = 2.35 Гц, 4-Н), 11.71 (уш.с., 1Н, N-Н). Данные ИК-спектроскопии (ИК-спектр, см-1, 742, 775, 1093 (C=S), 1246, 1276 (-N(^-C=S), 1465 (-N(СНз)-C=S), 3118 (N-H)).

H /

-N

(H^ VSH

---XT ^"-VT

-N CH3

N CH3

При поиске условий электрофоретического определения 1-метилимидазолин-2-тиона установлены оптические характеристики препарата в УФ области электронного спектра поглощения. Положение полосы поглощения и ее интенсивность (^тах = 253 нм, ^ е253 = 4.16) позволили применить прямое детектирование препарата при разработке

методики. Поскольку 1-метилимидазолин-2-тион представляет собой амфолит, ионизация которого начинается при рН ~ 9 (рКа = 11.3), а протонирова-ние наблюдается при рН < 1, оптимальная кислотность определения ограничена рамками существования молекулярной формы препарата (4 < рН < 9). При рН 4.5 были получены наиболее узкие, хорошо сформированные хроматографические пики. Содержание находили по зависимости площади хроматографического пика от концентрации 1-метилимидазолин-2-тиона. В оптимальных условиях проанализированы таблетки "Мерказолил" фирмы "Акрихин", г. Москва (лекарственная форма 1, ЛФ1), "Мерказолил" фирмы "Здоровье" г. Харьков (лекарственная форма 2, ЛФ2). Для этого 10 таблеток взвешивали и тщательно растирали. Навеску порошка, эквивалентную массе двух таблеток, массой 0.2408 г (ЛФ 1) и 0.2426 г (ЛФ 2), помещали в химический стакан на 50 мл, добавляли 20-30 мл нагретого до 50°C бидистил-лята и отфильтровывали нерастворимый осадок (крахмал картофельный, кальций стеариново-кислый). Осадок промывали бидистиллятом, разбавляли фильтрат до 100.0 мл и проводили определение в условиях построения градуировочного графика. Было выполнено по 6 параллельных измерений для каждой лекарственной формы. Правильность результатов контролировали, титруя мерказолил стандартным раствором NaOH в присутствии избытка AgNO3 [31]. Результаты анализа лекарственных форм представлены в таблице.

Предлагаемая методика отличается хорошей воспроизводимостью и правильностью, проста и экспрессна. Она позволяет оценить содержание вещества в диапазоне концентраций 1.5 х 10-4-1.8 х х 10-3 М (cmin = 4.6 х 10-5 М, sr = 0.025), отвечает требованиям, предъявляемым к методикам анализа лекарственных препаратов и биообъектов.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Mizutani T., Yjshida K, Murakami M., Sadshiro M. // Chem. Res. Toxicol. 2000. 13(3). Р. 170.

2. Naval N, Calvo J, Lampreave M, Pineiro F. // The International J. Biochem. 1986. V. 18. I. 2. Р.115.

3. Buxeraud J. // Traite de Chimie therapeutique. Tec et Doc Lavoisier. Paris. 1995. vol. 4. ch. 18.

4. Leclerc J., Orgiazzi J, Rousser B, Schlienger J.L, We-meau J.L. // La Thyroide, Expansion Scientifique Francaise. Paris. 1992.

5. Машковский М.Д. // Лекарственные средства. М.: Медицина, 1978. Т. 2. С. 552.

6. Кеттайл В.М., Арки Р.А. // Патофизиология эндокринной системы. М.: БИНОМ, 2001. С. 93.

7. Aragoni M.C., Arca M., Demartin F., Devillanova F.A., Garau A., Isaia F., Lippolis V., Verani G. // J. Am. Chem. Soc. 2002. 124(17). Р. 4538.

ЖУPHAЛ AHAЛИTИЧEСKOЙ XИMИИ том 62 < 3 2007

ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 1-МЕТИЛ-2-МЕРКАПТО-ИМИДАЗОЛА

297

8. Corban G.J, Hadjikakou S.K., Hadjiliadis N, Kubic-ki M., Tiekink E.R.T., Lan Butler S., Drougas E., Kosmas AM. // Inorg. Chem. 2005. 44. P. 8617.

9. Bigoli F., Deplano P., IencoA., Mealli C, Mercuri M.L, Pellinghelli M.A., Pintus G, Saba G, Trogu E.F. // Inorg. Chem. 1999. 38. P. 4626.

10. BellN.A., Clegg W, Creighton JR., Raper E.S. // Inorg. Chem. Acta. 2000 303. P.12.

11. Laurence C, El Ghomari M.J., Lucon M. // Perkin Trans. 1998. 2. P. 1159.

12. Flakus H. T, Miros A., Jones P. G. // Spectrochimica Acta Part A. 2002. 58. P. 225.

13. Salman H.M.A., Abu-Krisha M.M., El-Sheshtawy H.S. // J. Anal. Sciences and Spectroskopy. 2004. 49(5). P. 282.

14. De Wasch K, De Brabander H.F., Impens S, Vandew-iele M, Courtheyn D. // J. Chromatogr. A 2001. 912(2). P. 311.

15. Moretti G, Betto R, Cammarata P., Fracassi F., Giam-benedetti M, Borghese A. // J. Chromatogr., Biomedical Applications. 1993. 616(2). P. 291.

16. Centrich E.F, Rubio H.D. // Anales de Bromatologia. 1990. 42(2). P. 337.

17. Akimasa O, Kohichi Y, Fumie I, Suzuki Y, Tetsuo T. // Nippon Naibunpi Gakkai Zasshi. 1984. 60(8). P. 985.

18. Meulemans A., Manuel C, Ferriere C, Vulpillat M. // J. Liquid Chromatogr. 1980. 3(2). P. 287.

19. PensabeneJ.W., Lehotay S.J., Fiddler W. // J. Chromatographic Science. 2001. 39(5). P. 195.

20. Floberg S, Lanbeck K

Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.

Показать целиком