рыбное хозяйство. аквакультура
fisheries. aquaculture
гистофизиологическое исследование половых желез Асцидии пурпурной halocynthia aurantium pallas
Матросова И.В.1, Евдокимов В.В.2
1 Дальневосточный государственный технический рыбохозяйственный университет, Владивосток, Россия 2Тихоокеанский научно-исследовательский рыбохозяйственный центр, Владивосток, Россия
Исследовались половые железы асцидии пурпурной Halocynthia aurantium Pallas, выловленной в мае, июне и октябре 2010-2011 гг. из б. Соколовская и б. Средняя зал. П. Великого (Японское море). В половых железах асцидии несколько раз происходит последовательное созревание либо ооцитов, приводящее к их вымету, либо спермиев. Полученные данные по гистологической организации и клеточному составу половых желез у исследованных гидро-бионтов дополняют сведения об их репродуктивной биологии.
Ключевые слова: асцидия пурпурная; половые железы; компартмент; фолликулярные клетки; ооциты.
GISTOPHYZIOLOGICАL study
of the ascidian purple sexual glands halocynthia aurantium pallas
Matrosova I.V.1,Evdokimov V.V.2
1Far Eastern State technical fisheries University, Vladivostok, Russia 2Pacific Fishery Research Centre, Vladivostok, Russia
Gonads of Halocynthia purple aurantium Pallas, caught in May, June and October 2010-2011 from Sokolovskaya Bay and Average Bay оf P. Grand
(sea of Japan) were investigated. In the ascidian sexual glands several times were going steady maturation of the oocyte, or resulting in their spawning, or sperm. The data obtainedfor histological organization and cell composition of the sexual glands in the investigated hydrobionts supplement their reproductive biology.
Keywords: ascidia purple; sex glands; compartment; the follicular cells; oocytes.
Асцидия пурпурная встречается во всех дальневосточных морях, обитает преимущественно на глубине от 1 до 65 м, и ее запасы позволяют производить промышленный вылов. Химический состав асцидий характеризуется наличием специфических компонентов из разряда пептидов, каротиноидов, алкалоидов, углеводов [1, c. 348; 4, с. 30-31]. Поэтому ас-цидии по праву относятся к числу объектов, пригодных для пищевого использования, а также они могут быть полезны в качестве сырьевой базы при производстве лечебно-профилактических веществ и фармакологических препаратов [2, с. 22-23].
Биология и экология асцидии пурпурной, обитающей у берегов Приморья, изучены недостаточно хорошо. Отсутствуют сведения об особенностях размножения и сезонных изменениях в половых железах асцидий. Знания о процессах гонадо- и гаметогенеза и влиянии на них экологических факторов необходимы как для оценки промысловых запасов и определения квот вылова с целью рационального промысла, так и для разработки биотехнологии культивирования ас-цидии.
Исследовались половые железы асцидии пурпурной Halocynthia aurantium Pallas, выловленной в мае, июне и октябре 2010 и 2011 гг. из б. Соколовская и б. Средняя зал. П. Великого (Японское море). У животных определяли общую массу и высоту тела. Пол животных и состояние гонады определяли на постоянных гистологических препаратах. Гонады фиксировали в 70 % спирте, проводили через Isoprep (производство БиоВитрум) и заливали в Histomix (производство БиоВитрум) соглас-
но протоколу проводки [3, с. 45-56]. Полученные на санном микротоме срезы толщиной 5-6 мкм окрашивали гематоксилином Эрлиха с докра-ской эозином и заключали в синтетическую монтирующую среду Bio Mount (производство БиоВитрум). Готовые препараты исследовались в проходящем свете при различном увеличении (100, 400) на микроскопе Olympus model BHT-2 и фотографировались с помощью цифровой камеры Olympus. Диаметр половых клеток измеряли с помощью винтового окуляр-микрометра МОВ-1-15х.
В Г
Рис. 1. Половые железы асцидии в мае 2011. Бухта Соколовская. Окраска гематоксилин-эозин. Увел. 10х10. А - женский компартмент; Б, В, Г - женский (жк) и мужской (мк) компартменты соседствуют в гонаде. Условные обозначения: зо - зрелый ооцит, ро - растущий ооцит, фк - фолликулярные клетки, сп - спермии.
я
Половая железа асцидии в августе 2012 г.(о. Козлова). Увел. 10х40.
Окраска гематоксилин - эозин.
Условные обозначения: жк - женский компартмент, мк - мужской компартмент.
Асцидии - гермафродиты, у одной и той же особи имеются одновременно и мужские и женские половые железы. Яичники и семенники лежат по одному или по нескольку пар с каждой стороны тела, обычно в петле кишечника. Протоки их открываются в клоаку, так что клоакальное отверстие служит не только для выхода воды и экскрементов, но и для выведения половых продуктов. Самооплодотворения у асцидии не происходит, так как яйца и сперма созревают в разное время. Оплодотворение чаще всего происходит в околожаберной полости, куда с током воды проникают сперматозоиды другой особи. Реже оно бывает снаружи. Оплодотворенные яйца выходят через клоакальный сифон, но иногда
яйца развиваются в околожаберной полости и наружу выходят уже сформированные плавающие личинки.
У асцидий, как показали наши исследования, фолликулярный тип оо-генеза. Фолликулярные клетки образуют один или несколько слоев вокруг ооцита. Формируются они из соматических клеток гонады и принимают активное участие в процессах роста и созревания ооцита благодаря своей способности отвечать на гормональные стимулы со стороны нервной и эндокринной систем определенных белков и гормонов. Сперматогенные клетки асцидий локализованы в строгой последовательности. Сперма-тогонии расположены около стенки семенника. По направлению к центру фолликула находятся сперматоциты, сперматиды и зрелые гаметы, имеющие характерный тип организации. Со стадии сперматогониев до стадии поздних сперматид мужские гаметы соединены межклеточными мостиками.
В мае в половых железах асцидии в мужском компартменте присутствовали сперматоциты и спермии, а в женском компартменте - резор-бирующиеся ооциты диаметром 136-204 мкм и небольшое количество растущих ооцитов малого роста диаметром 85-119 мкм. Префоллику-лярные клетки расположены на поверхности ооцита, образуя пласт и отделяясь от соединительной ткани базальной мембраной. В июне размер зрелых ооцитов увеличился до 274 мкм. В это время начинается стадия уплощенного фолликулярного эпителия, приводящая к первичной его трансформации. Фолликулярные клетки становятся низкопризматическими, кубическими или столбчатыми. В октябре у большинства асцидии яичник был опустошен, а в семеннике находились спермии. Обнаруживались также особи, у которых в женском компартменте находились зрелые ооциты диаметром 383,6 мкм наряду со значительным числом растущих ооцитов с диаметром от 85 до 164,4 мкм. Характерной особенностью женских половых желез в это время было наличие четвертого и пятого периодов развития фолликулярного эпителия, характеризующихся вторичной его трансформацией и совпадающего с завершением большого роста ооцита. В это время фолликулярный эпи-
телий вторично уплощается и через некоторое время разрушается. В некоторых случаях, например у сомовых рыб, фолликулярный эпителий входит в состав дефинитивной оболочки яйца. У асцидии же нами обнаружена миграция фолликулярных клеток в цитоплазму зрелого ооцита и изменение формы с округлой на кубическую.
Нами обнаружено, что в половых железах асцидии несколько раз происходит последовательное созревание либо ооцитов, приводящее к их вымету, либо спермиев. Если присутствуют зрелые ооциты, то в семеннике наблюдается резорбция зрелых спермиев и, наоборот, при наличии спермиев в мужском компартменте женский компартмент, как правило, заполнен единичными зрелыми и большим количеством растущих ооцитов.
Полученные данные по гистологической организации и клеточному составу половых желез у исследованных гидробионтов дополняют сведения об их репродуктивной биологии. Они могут быть использованы не только для познания особенностей биологии размножения данных гид-робионтов, но и для развития прибрежного рыболовства в связи с рациональным ведением промысла этих организмов и их воспроизводством.
Список литературы
1. Белорукова А.А., Задорожный П.А., Пивненко Т.Н., Якуш Е.В. Оценка содержания каротиноидов у асцидий Halocynthia aurantium и Styela clava// Известия ТИНРО. 2006. Т. 147. С. 347-353.
2. Добряков Е.Ю. Фармакологические эффекты экстракта из туники асцидии Halocynthia aurantium: Автореф. дис. канд. мед. наук. - Владивосток, 2004. 23 с.
3. Микодина Е.В. и др. Гистология для ихтиологов: Опыт и советы. М.: Изд-во ВНИРО. 2009. 112 с.
4. Моторя Е.С., Пивненко Т.Н., Гажа А.К., Иванушко Л.А., Воронцов В.Н., Санина Н.М. Исследование иммуномоделирующей и мембранотропной активности каротиноидов из туники асцидии Halocynthia aurantium/ÍIи-хоокеанский медицинский журнал. 2009, №3. С. 28-31.
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.