МИКРОБИОЛОГИЯ, 2004, том 73, № 1, с. 111-117
= ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
УДК 582.28:628.511(470-20)
ГРУППИРОВКИ ДРОЖЖЕЙ В КВАРТИРНОЙ пыли И ИСТОЧНИКИ ИХ ФОРМИРОВАНИЯ
© 2004 г. А. М. Глушакова*, Т. М. Желтикова**, И. Ю. Чернов*1
*Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, факультет почвоведения **НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН, Москва Поступила в редакцию 20.12.02 г.
В домашней пыли, наряду с бактериями, мицелиальными грибами и некоторыми видами микроарт-ропод, постоянно присутствуют дрожжи. В образцах пыли, собранных в 25 квартирах Москвы и Московской области, обнаружено 15 видов дрожжей, принадлежащих к родам Candida, Cryptococ-cus, Debaryomyces, Rhodotorula, Sporobolomyces, Trichosporon. Наиболее часто в пыли обнаруживаются типичные эпифитные виды дрожжей, способные к длительному сохранению в неактивном состоянии. Среди них особенно многочисленны Cryptococcus diffluens и Rhodotorula mucilaginosa. Непосредственным источником эпифитных дрожжей в домашней пыли могут служить комнатные растения, которые также заселены дрожжами, хотя и существенно меньше, чем дикорастущие. Наряду с типичными эпифитными дрожжами в домашней пыли присутствуют виды, относящиеся к группе факультативных патогенов: Candida catenulate, C. guilliermondii, C. haemulonii, C. rugosa, C. tropicalis. Все эти виды неоднократно упоминались как возбудители кандидозов. Не удалось установить достоверной зависимости между обилием различных видов дрожжей в пыли и особенностями квартир, а также присутствием в квартире больных атопическим дерматитом.
Ключевые слова: дрожжи, домашняя пыль, аллергены.
Интенсивный процесс урбанизации приводит к формированию все новых антропогенных местообитаний, в которых формируется специфическая биота. Особый интерес в этом аспекте представляют жилые помещения. Прежде всего, это связано с тем, что многие обитающие в них синан-тропные организмы в процессе своей жизнедеятельности продуцируют аллергены, которые являются одним из важнейших факторов развития таких заболеваний как бронхиальная астма, ато-пический дерматит, аллергический ринит.
Домашняя пыль - своеобразный антропогенный субстрат, а состав которого входят как неорганические, так и органические компоненты: частицы почвы, текстильные волокна и остатки пищи, слущенный эпидермис человека и домашних животных, перья, капок, пыльца, и т.п. С домашней пылью тесно связаны различные микроорганизмы, включая бактерии, споры и мицелий грибов, сине-зеленые водоросли, а также некоторые виды микроартропод, в частности клещи семейств Руго§1урЫёае, Асайёае, 01усурИа§1ёае. Комплекс клещей домашней пыли в настоящее время хорошо изучен [1-3]. Особый интерес к изучению микобиоты жилых помещений связан с возрастающим значением микогенных аллергенов в развитии аллергических заболеваний [4, 5]. В настоящее время в основном проводят изучение
1 Адресат для корреспонденции (е-таП:уе$@$оЦ.т$и.га).
мицеллиальных грибов [6-8], тогда как дрожжи, населяющие городские квартиры, практически не изучены. В микологических исследованиях они обычно рассматриваются лишь на родовом уровне или просто отмечается присутствие одноклеточных форм. В то же время известно, что частота сенсибилизации к аллергенам разных дрожжей среди больных с атопическим дерматитом достаточно высока и достигает 84% к Malassezia furfur и 47% - к Rhodotorula mucilaginosa (= Rh. rubra) [9].
В связи с этим в нашу задачу входило изучение численности и видового состава дрожжевого населения домашней пыли на примере ряда квартир в Москве и Московской обл. В природе дрожжевые грибы особенно многочисленны и разнообразны на живых и отмирающих надземных частях растений. Поэтому одновременно мы исследовали также состав дрожжей на комнатных растениях, как возможного источника дрожжей в домашней пыли.
ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Всего было обследовано 25 квартир. Все квартиры расположены в современных многоэтажных домах с центральным отоплением и типовой мебелью. Образцы пыли с постели, с пола (ковра) около постели и с мягкой мебели в 25 квартирах собирали с помощью пылесоса в тканевые фильтры с поверхности 0.5 х 0.5 м2 в течение 1.5-2 мин.
Расстояние между волокнами фильтра не превышало 0.1 мм. Всего было проанализировано 143 образца пыли.
Образцы листьев и цветков комнатных растений, а также образцы почвогрунта из цветочных горшков отбирали в тех же квартирах в течение года. Всего было проанализировано 30 образцов зеленых листьев, 27 образцов цветков, 41 образец почвогрунта. Для сравнения использовали данные по численности и составу дрожжей на листьях примерно 50 видов травянистых дикорастущих растений в Москве и Московской обл., полученные ранее [10] и представленные приблизительно такой же выборкой образцов.
Дрожжи учитывали стандартным методом посева, используя в качестве питательной среды сусло-агар, подкисленный молочной кислотой (4 мл/л) для подавления роста бактерий. Для посева образцов пыли использовали разведение 1 : 1000, для образцов листьев и цветков 1 : 50 и для почвогрунта 1 : 20. Подсчет выросших колоний проводили после 7-суточной инкубации при комнатной температуре. С помощью бинокулярной лупы выявляли основные морфологические типы колоний, количество колоний каждого типа подсчитывали отдельно, и по несколько представителей каждого типа выделяли в чистую культуру. Чистые культуры идентифицировали до вида по морфологическим и физиологическим признакам, которые определяли стандартными методами [11].
По полученным данным для каждого образца рассчитывали общую численность дрожжей в образующих колоний единицах на грамм (KOE/г) и относительное обилие каждого вида дрожжей. Статистическую обработку данных, включая определение достоверности различий между средними значениями и метод главных компонент, проводили с использованием пакета Statistica 6 (StatSoft, Inc., 2001).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Дрожжи были обнаружены в 60% проанализированных образцов пыли во всех исследованных квартирах. При этом их численность колебалась в пределах 103-106 КОЕ/г, в среднем составляя около 104 КОЕ/г. Примерно в таком же количестве в расчете на грамм субстрата дрожжи обнаруживаются в большинстве природных местообитаний, включая почву, растительные остатки и надземные части растений [10]. Однако, учитывая низкий удельный вес пыли, следует заключить, что концентрация дрожжей в ней ниже, чем в большинстве природных субстратов. Средние значения численности дрожжей в образцах пыли из разных квартир существенно отличались друг от друга, однако при этом не было обнаружено достоверных различий между квартирами, в ко-
торых проживают или не проживают больные аллергией (3.9 ± 0.1 и 4.0 ± 0.1 КОЕ/г соответственно). Всего в домашней пыли было обнаружено 15 видов дрожжевых грибов родов Candida, Cryp-tococcus, Debaryomyces, Rhodotorula, Sporobolomy-ces, Trichosporon (табл. 1). Из них два вида - Cryp-tococcus diffluens и Rhodotorula mucilaginosa -встречались особенно часто и были выделены почти из всех образцов, содержащих дрожжи. Это широко распространенные виды дрожжей, которые в природных местообитаниях обычно обнаруживаются на поверхности растений, в растительных остатках и в почве.
Особо следует отметить высокое относительное обилие в домашней пыли эврибионтного вида Cr. diffluens. Выделяемый нами самостоятельный вид C. diffluens в настоящее время рассматривается в качестве разновидности C. albidus var. diffluens. В то же время, показано, что уровень гомологии ДНК-ДНК между штаммами C. albidus var. albidus и C. albidus var. diffluens достаточно низкий (41%) [1]). Многолетние исследования показали, что встречаемость этого вида закономерно увеличивается от северных широт к южным [10]. Наиболее обычны дрожжи вида Cr. diffluens в субтропических пустынях [12]. В то же время, в почвах средней полосы России его встречаемость не превышает 1% [13]. Такой характер распространения вполне согласуется с адаптивными особенностями вида. Для большинства штаммов Cr. diffluens характерно формирование уже в 3-5-суточ-ных культурах хламидоспороподобных клеток с утолщенными клеточными стенками. Показано, что дрожжи этого вида способны переносить длительное обезвоживание в неактивном состоянии [14]. Низкий уровень влажности - один из главных лимитирующих факторов существования дрожжей в домашней пыли, который приводит к изменению соотношения доминирующих видов дрожжей, выводя на первое место устойчивый к высушиванию Cr. diffluens.
Другой доминирующий в домашней пыли вид дрожжевых грибов - R. mucilaginosa - постоянно обнаруживается в различных природных растительных субстратах, однако в значительно меньшем обилии. Встречаемость R. mucilaginosa на листьях растений и в растительных остатках в лесах средней полосы России составляет около 5%, в дерново-подзолистых почвах - только 2-3% [13]. Интересно, что значительно чаще (встречаемость около 45%) этот вид обнаруживается в глубоких слоях торфяно-болотных почв [15], где дрожжевые клетки, также как и в случае домашней пыли, вероятней всего находятся в малоактивном состоянии. Кроме того, дрожжи, отнесенные к виду Rhodotorula mucilaginosa, были выделены с кожи больных атопическим дерматитом [16].
Таблица 1. Виды дрожжей, обнаруженные в домашней пыли и на комнатных растениях (число образцов, в которых обнаружен вид)
Вид Пыль Растения Почва
Candida catenulata Diddens et Lodder 2 0 0
Candida guilliermondii (Castellani) Berkhout 0 1 0
Candida haemulonii (van Uden et Kolipinski) Meyer et Yarrow 6 0 0
Candida maltosa Komagata et al. 1 5 14
Candida rugosa (Anderson) Diddens et Lodder 2 0 0
Candida tropicalis (Castellani) Berkhout 1 0 0
Candida sp. 1 1 0 0
Candida sp. 2 1 0 0
Cryptococcus albidus (Saito) Skinner 22 12 1
Cryptococcus diffluens (Ruinen) von Arx et Weijman 69 1 0
Cryptococcus terricola Pedersen 0 0 1
Debaryomyces hansenii (Zopf) Lodder et Kreger-van Rij 24 9 2
Hanseniaspora guilliermondii Pijper 0 1 0
Metschnikowia reukaufij Pitt et Miller 0 5 0
Pichia anomala (Hansen) Kurtzman 0 3 0
Pichia onychis Yarrow 4 0 0
Rhodotorula glutinis (Fresenius) Harrison 9 0 0
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.