ционный фактор лимфоцитов ТЬе1 а их культивирование в присутствии ^12 приводило к снижению экспрессии RORYt (транскрипционный фактор ^17) и IL17 и усилению продукции ^N7, что указывает на вероятную функциональную взаимосвязь и общность механизмов дифференцировки и ^17
лимфоцитов [8]. Таким образом, роль Т-Ье1 в обеспечении баланса иммунных и аутоиммунных реакций является довольно сложной и ее необходимо рассматривать в контексте с другими участниками иммунной регуляции при данной патологии.
Выводы. Развитие острого илеита привело к изменению баланса Т-Ье1+ЮАТЛ-3+ лимфоцитов в подвздошной кишке крыс в сторону уменьшения количества Т-Ье1 иммунопозитив-
ных клеток. При этом наблюдалось уменьшение в лимфоцитах концентрации транскрипционных факторов как T-bet, так и GATA-3.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Manichanh C. et al. Gut 2006, 55, 205-211.
2. Fernandez-Becker NQ., Moss AC. In Silico Biol. 2009,9,355-363.
3. Ohtani K. et al. Pediatr. Int. 2010, 52, 584-9.
4. Bamias G. et al. Gastroenterology 2005, 128, 654-666.
5. Neurath, M. F. et al. J. Exp. Med. 2002, 195, 1129-1143.
6. Matsuoka, K. et al. Gut 2004, 53, 1303-1308.
7. Desreumaux P. et al. Gastroenterology 1997, 113, 118-126.
8. Annunziato F. et al. J. Exp. Med. 2007, 204, 1849-1861.
ROLE TRANSCRIPTION FACTORS T-bet AND GATA3 IN DEVELOPMENT OF ACUTE ILEITIS IN RATS
Zherebiatiev A. S., Kamyshnyi A. M.
Department of Microbiology, Virology and Immunology, Zaporozhye State Medical University,
Zaporozhye, Ukraine
The aim of this study was to investigate the expression of transcription factors T-bet and GATA3 with lymphocytes of small intestine in development of acute ileitis in rats. A total number of 20 rats were examined. For induction of an acute ileitis, rats received one subcutaneous dose of indomethacin (Sigma, 15 mg/kg). Structure of population of T-bet+ and GATA-3+ has been studied by the analysis of serial histological sections using the method of indirect immunofluorescence with monoclonal antibodies. It has been established that development of acute ileitis was accompanied with the decrease in quantity of Tbet+-cells and it influenced concentration of the transcription factors in immunopositive cells.
Key words: T-bet, GATA-3, acute ileitis
ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ ФАКТОРОВ АПОПТОЗА, В УСЛОВИЯХ ШУМОВОЙ НАГРУЗКИ
Зайцева Н. В.1,2, Кривцов А. В.1, Лужецкий К. П.1,2, Андреева Е. Е.3
ФБУН «ФНЦмедико-профилактических технологий управления рисками здоровью
населения», Пермь; 2Пермский государственный национальный исследовательский университет, Пермь; 3Управление Роспотребнадзора по Москве, Россия
Проведен анализ особенностей распределения частот генов ТЫБА ^-308А) и р53 у детей в условиях шумовой экспозиции. Выявлены особенности генетического полиморфизма генов ТЫБА ^-308А) и р53, а также их ассоциации с воздействием шумовой техногенной нагрузки на детей, проявления которой способствуют нарушению процессов формирования программы естественной клеточной гибели.
Ключевые слова: ген ТЫРЛ, ген р53, полиморфизм генов, шум
Тематический выпуск «Российский научный форум на Урале»
317
Вследствие генетической гетерогенности популяции человека в ней присутствуют индивиды, генетические особенности которых обуславливают повышенную чувствительность к действию техногенных факторов.
Восприимчивость организма к воздействию техногенных химических факторов в значительной мере зависит от особенностей генетических ассоциаций определяющих состояние белков отвечающих за интенсивность и последовательность процессов апоптоза и активность состояния компонентов иммунного ответа, участвующих в реализации этого процесса [1, 2, 3, 4]. К ключевым полиморфизмам, реализующим взаимодействие факторов окружающей среды и процессов иммунологического гомеостаза относятся полиморфизмы генов транскрипционного фактора р53 и фактора некроза опухоли альфа (ТОТ -альфа).
Целью работы было выявление ассоциированных с генетическим полиморфизмом генов р53 и ТОТ альфа иммунологических нарушений у детей, проживающих в условиях шумовой техногенной нагрузки.
Материал и методы. При углубленном изучении состояния здоровья детского населения выполнено генетическое и иммунологическое диагностическое обследование 97 детей в возрасте от 3 до 10 лет, постоянно проживающих в зоне влияния крупного аэропорта, при этом группу контроля составили 25 детей, проживающих вне зоны влияния крупного аэропорта.
Обследование включило в себя изучение показателей показателей гиперчувствительности (определение содержания ^ Е общего, ^ Е специфического к формальдегиду и марганцу методом ИФА), показателей пролифератив-ных реакций (определение содержания СЕА, AFP, СА 19-9, СА 72-4, CYFRA 21-1 методом ИФА), маркера состояния эндотелия сосудов (VEGF-эндотелиальный фактор роста).
Забор материала для ПЦР проводился методом взятия мазков со слизистой оболочки ротоглотки. Затем проводили выделение ДНК с помощью сорбентного метода: в основе которого лежит разрушение клеток с дальнейшей сорбцией нуклеиновых кислот на сорбент.
Для исследования полиморфных вариантов в изучаемых генах использовали методику ПЦР, в основе которой лежит реакция амплификации и детекция продуктов этой реакции в режиме реального времени с помощью
флюоресцентных меток, которыми предварительно помечают используемые для реакции амплификации праймеры. Для одновременной детекции нескольких продуктов реакции используют разные флюоресцентные метки и зонды (мультиплексная ПЦР). В качестве праймеров использовали участок ДНК генов р53 и ТОТА (0308Л). Для определения генотипа человека использовали метод аллельной дискриминации, когда различия между гете-розиготами, гомозиготами дикого и минорного вариантов устанавливали по различиям в протекании реакций амплификации соответствующих праймеров.
Результаты. Максимальные и среднемно-голетние уровни шума превышают допустимые нормы. Наибольшей зашумленностью (до 90 дБ максимальный шум и 66,6 дБ эквивалентный шум) характеризуются территории на границе санзоны аэропорта и в непосредственной близости к ней. Исследование функционального состояния слухового анализатора методом аудиометрии у детей группы наблюдения позволило установить снижение относительно группы сравнения уровня слухового восприятия от 1,0 до 7,0 дБ, преимущественно на частотах 125-1500 Гц (р<0,05).
В группе обследования установлен повышенный по сравнению с возрастной нормой уровень общей сенсибилизации по критерию ^Е (79,22±25,38 МЕ/мл) (р<0,05).
По результатам изучения специфических и интегральных маркеров эффекта установлены изменения содержания онкопролиферативных
Таблица. Распределение частот генов р53 и ТМБА (0308Л) у детей, проживающих в зоне влияния аэропорта
Ген (ОНП) Генотип/ аллель Зона влияния Контроль
р53 СС 54,5% 52%
ОС 32% 48%
со 13,5% 0%
С 70% 76%
о 30% 24%
ТОТА (0308Л) со 59% 75%
АО 41% 25%
ЛЛ 0% 0%
о 80% 87,5%
Л 20% 12,5%
белков, где сравнительная частотность наблюдаемых превышений нормы и контроля выше в 2,1 раза зоне влияния шумовой нагрузки.
Негативные ассоциации полиморфизма генов иммунного ответа и транскрипции характеризуются измененной распространенностью минорного гомозиготного и гетерозиготного вариантов, что может способствовать хрони-зации инфекционных и неинфекционных заболеваний, озлокачествлению соматической патологии в форме онкологических и аутоиммунных заболеваний (табл.).
Анализ состояния гена р53 выявил наличие патологической гомозиготы у 13,5% детей зоны влияния шума при нулевой распространенности в контроле. Причем распространенность минорного аллеля у детей исследуемых групп превышала не только его частоту в контроле, но и цитируемую.
Состояние гена ТОТ-альфа, отвечающего за продолжительность жизненного цикла клетки и иммунорегуляцию, у детей основной группы характеризовалась измененным полиморфизмом с распространенностью мутант-ного аллеля - 20% против 12,5% в контроле.
Результаты иммуногенетического обследования детского населения, посещающего детские комбинаты, расположенные в зоне расположения аэропорта, выявили следующие нарушения: полиморфизм генов, отвечающих за иммунный ответ и апоптоз (ТОТальфа) характерен для детей, проживающих в наибольшей близости к аэропорту (в пределах санитарно-защитной зоны и на ее границе), причем для их генетики характерен гетерози-
готный вариант, распространенность которого превышает уровень показателя на территории сравнения в 1,5 раза; распространенность минорного гомозиготного и гетерозиготного аллельного вариантов гена р53 у детей, проживающих в зоне наибольшей экспозиции, превышает уровень группы сравнения до 1,5 раз, что указывает на повышенный риск развития пролиферативных процессов, связанных с нарушением генетического контроля ключевых для процесса апоптоза белков.
Показателем факторной нагрузки, формирующим особенности генетической регуляции маркеров иммунитета является шум.
Таким образом, представленные данные свидетельствуют о негативных генетических ассоциациях воздействия шумовой техногенной нагрузки на детей, проявления которой способствуют нарушению процессов формирования программы естественной клеточной гибели.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Долгих О. В., Кривцов А. В., Гугович А. М., Хара-хорина Р. А., Ланин Д. В., и др. Медицина труда и промышленная экология 2012, 12, 30-33.
2. Долгих О. В., Кривцов А. В., Дианова Д. Г., Гугович А. М., Харахорина Р. А. Медицина труда и промышленная экология 2011, 11, 29-32.
3. Долгих О. В., Кривцов А. В., Харахорина Р. А., Ланин Д. В. Вестник Уральской медицинской академической науки 2012, 4, М., 240-241.
4. Dolgikh O., Zaitseva N., Dianova D., Krivtsov A. In vivo: international Journal of Experimental and Clinical Pathophysiology and Drub Research 2011, 25, 3, 523-524.
IMMUNOGENETIC CHARACTERISTICS OF GENES' POLYMORPHISM OF APOPTOSIS-INDUCING FACTORS UNDER THE NOISE LOAD
Zaitseva N. V.12, Krivtsov A. V.1, Luzhetsky K. P.1,2, Andreeva E. E.3
'FBSI "Federal Scientific Center for Medical and Preventive Health Risk Management Technologies", Perm, 2Perm State National Resea
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.