научная статья по теме ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ МОДИФИЦИРОВАННОГО БИОФЛАВОНОИДА И КВЕРЦЕТИНА ДИГИДРАТА В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ РЕАКЦИИ ТРАНСПЛАНТАТ ПРОТИВ ХОЗЯИНА У МЫШЕЙ Биология

Текст научной статьи на тему «ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ МОДИФИЦИРОВАННОГО БИОФЛАВОНОИДА И КВЕРЦЕТИНА ДИГИДРАТА В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ РЕАКЦИИ ТРАНСПЛАНТАТ ПРОТИВ ХОЗЯИНА У МЫШЕЙ»

РОССИЙСКИЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 2015, том 9(18), № 2, с. 228-231

КРАТКОЕ СООБЩЕНИЕ

ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ МОДИФИЦИРОВАННОГО БИОФЛАВОНОИДА И КВЕРЦЕТИНА ДИГИДРАТА В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ РЕАКЦИИ ТРАНСПЛАНТАТ

ПРОТИВ ХОЗЯИНА У МЫШЕЙ

© 2015 г. Д.З. Албегова*, С.И. Павлова **/***, О.С. Лаптев*/**, Ж.К. Албегова****, А.А. Кягова*, Л.А. Козырь*, И.Г. Козлов*/**

*ГБОУВПОРоссийский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова Минздрава России, Москва, Россия;

**ФГУ ФНКЦДетской гематологии, онкологии и иммунологии им. Д. Рогачева, Москва, Россия;

***ФГБОУ ВПО Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова, Чебоксары, Россия;

****ГБОУ ВПО Северо-Осетинская государственная медицинская академия Минздрава России,

Владикавказ, Россия

Поступила: 21.04.2015. Принята: 25.05.2015

В экспериментах in vivo исследовано влияние кверцетина дигидрата и модифицированного биофлавоноида на течение реакции трансплантант против хозяина у мышей. Реакция трансплантат против хозяина представляет собой вариант иммунного ответа, который развивается при трансплантации зрелых иммунокомпетентных клеток в организм толерантного хозяина в условиях, когда между клетками донора и реципиента существуют антигенные различия. В результате проведенного исследования показано, что вновь синтезированный модифицированный биофлавоноид при внутрибрюшинном использовании обладает большей способностью супрессировать развитие реакции трансплантант против хозяина у мышей в сравнении с уже известным кверцетина дигидратом. Выживаемость мышей на фоне применения модифицированного биофлавоноида равна 100%, в свою очередь при использовании кверцетина дигидрата выживаемость снижается.

Ключевые слова: флавоноиды, реакция трансплантант против хозяина, иммуносупрессия

Реакция трансплантат против хозяина (РТПХ) представляет собой вариант иммунного ответа, который развивается при транс-

Адрес: 117997 Москва, ул. Островитянова, д. 1, кафедра фармакологии РНИМУ; Козлов Иван Генрихович. E-mail: bigbeaver-90@mail.ru

Авторы:

Албегова Д.З. — к.м.н., доцент кафедры фармакологии ГБОУ ВПО Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова Минздрава России, Москва;

Павлова С.И. — зав. кафедрой фармакологии Чувашского государственного университета им. И.Н. Ульянова, Чебоксары;

Лаптев О.С. — аспирант лаборатории экспериментальной и клинической фармакологии ФГУ ФНКЦ Детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Рогачева, Москва;

Албегова Ж.К. — д.м.н., и.о. ректора ГБОУ ВПО Севе-ро-Осетинская государственная медицинская академия Минздрава России, Владикавказ;

плантации зрелых иммунокомпетентных клеток (содержащих Т-лимфоциты) в организм толерантного хозяина в условиях, когда между клетками донора и реципиента существуют антигенные различия. В клинических услови-

Кягова А.А. — д.м.н., профессор кафедры физики и математики ГБОУ ВПО Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова Минздрава России, Москва;

Козырь Л.А. — к.б.н., доцент кафедры физики и математики ГБОУ ВПО Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова Минздрава России, Москва;

Козлов И.Г. — д.м.н., профессор, зав. кафедрой фармакологии ГБОУ ВПО Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова Минздрава России; зав. лабораторией экспериментальной и клинической фармакологии ФГУ ФНКЦ Детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Д. Рогачева, Москва

ях эта реакция является наиболее серьезным фактором, ограничивающим аллогенную пересадку костного мозга, которая используется сегодня в терапии многих заболеваний с выраженным цитопеническим синдромом.

С учетом того, что в предыдущих экспериментах было выявлено, что модифицированный биофлавоноид (МБФ) супрессирует СБ8 + -зависимый иммунный ответ в модели контактной чувствительности к 2,4-динит-рофторбензолу [1], было решено также исследовать эффективность данного агента в сравнении с кверцетина дигидратом (КД) в экспериментальной модели острой РТПХ, где главным пусковым механизмом иммунопато-генеза является активация цитотоксических Т-лимфоцитов, направленных против аллоан-тигенов [2, 3].

В опытах использован полученный экспериментальным путем модифицированный биофлавоноид и препарат сравнения кверце-тина дигидрат.

Статистическую обработку результатов проводили путем расчета средней арифметической и средней ошибки средней арифметической. Для оценки достоверности различий использовали ^критерий Стъюдента, разницу считали достоверной при Р < 0,05.

В условиях нашего эксперимента РТПХ индуцировали в полуаллогенной системе. Для этого у мышей-доноров родительской линии С57В1/6 (Н-2Ь) выделяли клетки селезенки и лимфоузлов, готовили суспензию лимфо-идных клеток в соотношении 2: 1, которую внутривенно (108 кл/мышь, 0,5 мл) вводили мышам-реципиентам гибридам первого поколения В6Б2Р1 (С57В1/6хБВЛ/2; Н-2Ь/Й) [4]. Отрицательным контролем (К ) служила группа интактных мышей В6Б2Р1, получивших внутривенно такой же объем среды для культур клеток. Экспериментальные препараты МБФ и КД в дозе 2,6 • 10-5 моль/кг вводили внутри-брюшинно 3 раза в неделю, начиная с 0 дня индукции РТПХ в течение 3 недель. Группа положительного контроля (К + ) получала внутрибрюшинно соответствующие объемы растворителя. В течение 60 дней мониториро-вали выживаемость и массу тела животных во всех группах.

Эффективность исследуемых агентов оценивали, рассчитывая динамику гибели и изменения массы тела животных в группах за период наблюдения. Дополнительно для оценки эффективности МБФ и КД исследовали патоморфологические изменения в

120 -г

100 --

£ 80-

О

1 60-

1 40-

л

РЭ

20-

о --

Рис. 1. Динамика гибели мышей с индуцированной РТПХ; К — отрицательный контроль (интактные мыши), К+ — положительный контроль (индукция РТПХ), МБФ — группа с индуцированной РТПХ, получающая внутрибрюшинно МБФ; КД — группа с индуцированной РТПХ, получающая внутрибрюшинно КД.

органах у выживших животных на 60-й день после индукции РТПХ.

В условиях нашего эксперимента при качественной оценке на ранних сроках развития РТПХ не отмечалось явных различий в поведенческих реакциях животных в контрольных группах и группах, получавших экспериментальную терапию МБФ и КД. На более поздних сроках (с 10—14 дня после индукции РТПХ) в группе К+ и у подопытных мышей на фоне кверцетина дигидрата стали наблюдаться признаки истощения, что объективно проявлялось в снижении массы тела экспериментальных животных. В группе мышей, получавших МБФ, снижение массы тела не было столь выраженным. Кроме того, в группе с индукцией РТПХ без лечения и в группе мышей, получавших кверцетина дигидрат, наблюдалась выраженная диарея, по сравнению с мышами, получавшими МБФ.

На рис. 1 представлена динамика гибели, а на рис. 2 — изменения массы тела мышей в группах отрицательного контроля (К , интактные мыши), положительного контроля (К +, мыши с индуцированной РТПХ) и подопытных группах (МБФ и кверцетина дигидрат), получающих внутрибрюшинные инъекции данных агентов в равной дозе 2,6 • 10-5 моль/кг. За животными наблюдали в течение 60 дней. Как видно из представленных данных (рис. 2), прирост массы тела интактных животных, начиная со второй недели наблюдения, был значимо больше, в то время как этот показатель у подопытных мышей, получавших кверцетина дигидрат, прогрессивно снижался к 20 — 30 дню после ин-

230

Д.З. Албегова и др.

Дни наблюдения

--- К- К+ — — МВФ КД

Рис. 2. Динамика изменения средней массы тела мышей с индуцированной РТПХ; К — отрицательный контроль (интактные мыши), К+ — положительный контроль (индукция РТПХ), МБФ — группа с индуцированной РТПХ, получающая внутрибрюшинно МБФ; КД — группа с индуцированной РТПХ, получающая внутрибрюшинно КД.

дукции РТПХ. В эти сроки на фоне введения кверцетина дигидрата (в сравнении с группой К +) наблюдалась лишь некоторая тенденция к повышению массы мышей, однако статистически значимых различий не было. Достоверные различия (р < 0,05) средней массы животных в этих группах появились к 39 — 40 дню наблюдения. В группе мышей, получавших МБФ, потеря массы тела наблюдалась с 8 по 16 день, масса тела экспериментальных животных была достоверно ниже группы интактных мышей. Однако уже с 20 дня эксперимента масса животных из группы, получавшей МБФ, прогрессивно росла, и к 30 дню не было достоверных отличий от группы отрицательного контроля.

На рис. 1 представлена гистограмма, позволяющая сравнивать динамику гибели животных при введении исследуемых агентов и в группе К+ за весь период наблюдения. На фоне экспериментальной терапии МБФ не наблюдалось ни одного случая летального исхода (100% абсолютная выживаемость) в течение 60 дней. В группе без лечения гибель животных отмечалась на 32 — 40 дни после индукции РТПХ, выживаемость составила 60±10%. В группе животных, получавших кверцетина дигидрат, выживаемость составила 70±10%.

Сравнительное патогистологическое исследование срезов печени, кишечника и почек проводили в группе К+ (животные, выжившие к 60 дню наблюдения), а также у мышей, пролеченных исследуемыми агентами.

В печени даже у выживших мышей, не получавших лечения, а также получавших КД,

наблюдалась выраженная паренхиматозная белковая дистрофия гепатоцитов с рассеянными очагами некроза. В то же время на фоне экспериментальной терапии МБФ в печени просматривались лишь незначительные дистрофические изменения.

В почках мышей группы К+ и мышей, получавших КД, отмечалась выраженная паренхиматозная белковая гидропическая дистрофия эпителия канальцев. Наблюдались отечность и воспалительная инфильтрация эпителия канальцев, просветы которых были заполнены аморфными белковыми массами. Клубочки почек были резко полнокровны и отечны, мочевые пространства расширены. Отмечалась гибель отдельных клубочков. На фоне введения МБФ в канальцах почек — степень гидропической дистрофии слабо выраженная. Не наблюдается отека и полнокровия канальцев. Клубочки умеренно отечны и полнокровны. Патологические изменения канальцев носят

Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.

Показать целиком

Пoхожие научные работыпо теме «Биология»