уровней ^-17 и ^-10 в цервикальном секрете респондентов из группы с ПН и ГИ (2,42 ± 0,17 и 2,7 ± 0,12) по сравнению с женщинами из группы с ПН без ГИ (4,23 ± 0,4 и 3,93 ± 0,33) и группы контроля (4,46 ± 0,07 и 4,4 ± 0,14).
Заключение. У беременных с ПН и ГИ (основная группа) достоверно более высокими, чем в группах женщин без ГИ были такие показатели местного иммунитета в цервикальной слизи, как общее количество лейкоцитов, лизосомаль-ная и фагоцитарная активность нейтрофилов. Но при этом в основной группе отмечалось достоверное снижение живых нейтрофилов и минимальное количество НВЛ по сравнению с группами без ГИ. В группе женщин с ПН и ГИ достоверно более высокой была концентрация
IL-4, имелась четкая тенденция к повышению IL-8 при достоверно более низких уровнях IL-17, IL-10 и IFN-y по сравнению с другими группами. Между группами женщин с ПН в зависимости от наличия или отсутствия у них ГИ были выявлены отличия по уровню IL-17, IL-4, IFN-y, IL-1ß, IL-10 в цервикальной слизи.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Долгушин И. И., Шишкова Ю. С., Савочкина А. Ю. LAP LAMBERT Academic Publishing, 2011, 240 с.
2. Можейко Л. Ф., Тихоненко И. В. Медицинская панорама 2007, 5, 11-16.
3. Сидорова И. С., Макарова И. О. Москва: МИА, 2005, 295 с.
4. Baptiste-Roberts K, Salafia C. M., Nicholson W. K. BMC Pregnancy Childbirth. 2008, 23, 8, 44.
CHANGE INDICATORS OF INNATE IMMUNITY IN PREGNANT WOMEN WITH PLACENTAL INSUFFICIENCY AND GENITAL INFECTION
Kurnosenko I. V., Dolgushina V. F., Sipok A. P.
South Ural State Medical University, Chelyabinsk, Russia
The content of local immunity has been identified in the cervical mucus of pregnant women with placental insufficiency and genital infection. It has been found that the content of neutrophil extracellular traps in cervical secretions is significantly smaller in women with genital infection. The number of leukocytes, lysosomal activity level, apoptosis in these women proves to be considerably higher. There have been found significant changes in oxygen reducing capacity of neutrophils.
Key words: local immunity, placental insufficiency, genital tract, female, cytokines
ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ СИНТЕЗ-МОДИФИЦИРОВАННОГО ФЛАВОНОИДА В РЕАКЦИИ КОНТАКТНОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ
Лаптев О. С.1, Воробьёва Ю.С.1, Цицуашвили М. Д.1, Негребецкий В. В.1, Козлов И. Г.1,2
'ГБОУ ВПО Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н. И. Пирогова; 2ФГБУ ФНКЦ Детской гематологии, онкологии и иммунологии
им. Д. Рогачева, Москва, Россия
В эксперименте были изучены иммуносупрессивные свойства синтез-модифицирован-ного флавоноида (СМФ) в сравнении с флавоноидом кверцетина дигидратом (КД) в качестве стандарта на модели контактной чувствительности к 2,4-динитрофторбензолу (модель контактного дерматита). Было показано, что новый синтез-модифицированный флавоноид при двух- и трехкратном внутривенном введении, значительно угнетал процесс наращивания пула ДНФБ-активированных Т-лимфоцитов, при этом иммуносупрессия была значительно выше, чем у кверцетина дигидрата. Однако, при внутрибрюшинном введении процент супрессии был менее выражен, чем при внутривенном способе введения, что может указывать на недостаточную проницаемость СМФ через гистологические барьеры. При этом, процент супрессии КЧ при внутрибрюшинном введении СМФ был значительно выше, чем при использовании КД.
Ключевые слова: флавоноиды, контактная, чувствительность, мыши
В последние десятилетия пристальное внимание исследователей привлекают продукты вторичного метаболизма растений - флаво-ноиды, в связи с широким спектром их биологического действия. Так, экспериментальные и клинические исследования выявили антиок-сидантные, цитопротекторные, гепатозащит-ные, антигипоксические противовирусные, противовоспалительные и многие другие фармакологические эффекты флавоноидов [1,3]. Относительно недавно было установлено, что флавоноиды оказывают влияние и на сигнальные процессы, протекающие в живых системах, за счет специфического взаимодействия с белками, выполняющими регуляторные и сигнальные функции [2,4]. В связи с чем, представляется актуальным исследования иммунотропной эффективности веществ флавоноидной структуры, с дальнейшей перспективой создания на их основе лекарственных препаратов.
Целью исследования являлось изучение на доклиническом уровне иммуносупрессив-ных эффектов синтез-модифицированного флавоноида (СМФ) на модели контактной чувствительности (КЧ).
Материалы и методы. В эксперименты были включены мыши линий СВА (самцы весом 18-20 г, возраст 8-10 недель), полученные из питомника РАМН (Крюково, Московская область). Всего в эксперименте было задействовано 120 мышей. Животные содержались на стандартном пищевом рационе вивария при свободном доступе к воде и пище. Экспериментальные группы животных формировали рандомизированно по 5 мышей в каждой. В контрольные и опытные группы входили мыши одного возраста, полученные из питомника одновременно, у которых разброс по исходной массе составлял не более 10%. Все исследования на животных проводили не менее чем в трех повторных сериях опытов в первой половине дня.
В опытах использован экспериментальный образец СМФ, синтезированный на кафедре химии ГБОУ ВПО РНИМУ им. Пирогова и флавоноид сравнения кверцетина дигидрат (КД) (Alfa aesar, Великобритания). В экспериментах in vivo СМФ и КД вводили внутривенно или внутрибрюшинно в дозе 2,6*10-5 Моль/кг массы тела в изотоническом растворе натрия хлорида с 5% содержанием этанола. Мышам контрольной группы вводили соответствующие объемы растворителя.
Инициацию реакции контактной чувствительности (КЧ) к 2,4-динитрофторбензолу (ДНФБ) у мышей линии CBA проводили согласно общепринятому экспериментальному подходу с незначительными модификациями [6]. Животных сенсибилизировали путем аппликации на выбритую кожу брюшка 50 мкл 0,3% раствора ДНФБ в ацетоне на 0 день. Через 6 суток после сенсибилизации на внутреннюю поверхность правого уха наносили разрешающую дозу ДНФБ (5 мкл 0,2% раствора). На левое ухо наносили аналогичный объем растворителя (ацетона). Отрицательным контролем (К") служила группа интактных (несенсибили-зированных) мышей, получивших только аппликацию разрешающей дозы ДНФБ. Через 24 часа после повторного нанесения ДНФБ оценивали интенсивность реакции КЧ по разнице отека правого и левого ушей (специфическое локальное воспаление). Толщину ушей измеряли в миллиметрах специальным микрометром, снабженным световым индикатором (Россия). Интенсивность супрессии реакции КЧ в процентах рассчитывали по формуле
%супрессии = (1 - (Е - К ) / (K+ - К-)) *100%,
где Е, К+, К- - отек уха у мышей в опытной группе (СМФ), группе положительного и отрицательного контроля, соответственно.
Результаты. Ранее в нашей лаборатории было доказано, что СМФ вызывает эффективное подавление пролиферации активированных мононуклеарных клеток (МНК) в моделях in vitro и ex vivo. Основываясь на полученных результатах, было решено проверить эффективность СМФ в модели Т-клеточного иммунного ответа in vivo. В качестве экспериментальной модели была выбрана мышиная модель КЧ к ДНФБ.
Мыши были разделены на следующие группы (таблица 1):
^ К- (отрицательный контроль) - интактные мыши, которым на ухо наносили только разрешающую концентрацию ДНФБ; ^ К+ (положительный контроль) - группа мышей с индукцией КЧ, которым проводились сенсибилизация и провокация ДНФБ. (Мыши из этой группы разбивались на подгруппы так же, как и опытные и получали в те же сроки соответствующие объемы растворителя); ^ Группы I - V (СМФ). Группы мышей с индукцией, которым вводился СМФ внутривенно в дозировке 2,6* 10-5 Моль/кг массы
тела в различные сроки. Также проводилась сенсибилизация и провокация; ^ Группа VI (СМФ). Группа мышей с индукцией. Мышам вводился СМФ внутрибрюшин-но в дозировке 2,6*10-5 Моль/кг массы тела в различные сроки. Также проводилась сенсибилизация и провокация. ^ Группы I - V (КД). Группы мышей с индукцией, которым вводился КД внутривенно в дозировке 2,6* 10-5 Моль/кг массы тела в различные сроки. Также проводилась сенсибилизация и провокация; ^ Группа VI (КД). Группа мышей с индукцией. Мышам вводился КД внутрибрюшин-но в дозировке 2,6*10-5 Моль/кг массы тела в различные сроки. Также проводилась сенсибилизация и провокация.
При статистической обработке результатов все значения обрабатывались вместе как положительный контроль, в связи с тем, что в группе контроля не наблюдалось статистически значимого расхождения значений отека уха между различными подгруппами, которые в различные сроки получали 5% раствор этанола (используется как растворитель СМФ) в 0,9% растворе натрия хлорида.
Как представлено в таблице, внутривенное введение мышам КД в концентрации 2,6*10-5 Моль/кг массы тела через 24 ч после сенсибилизации при однократном введении практически не подавляло развитие отека уха мыши 2,3±2,1% (р>0,05). При введении КД через 36 и 48 ч процент супрессии составлял
10,0±4,0% и 20,0±4,5% соответственно, при этом результаты не являлись достоверными по отношению к контролю. Введение КД двукратно через 24 и 36 ч показывало достоверное (p<0,05) подавление отека уха - 64±2,7%. Трехкратное введение достоверно (p<0,05) супрессировало КЧ на 72,2±4,5%. При внутрибрюшинном способе введения подавление супрессии КД оказалось значительно ниже, чем при внутривенном: 27,8±4,5% (p<0,05).
Однократное внутривенное введение СМФ в дозе 2,6*10-5 Моль/кг массы тела, в зависимости от сроков после сенсибилизации, вызывало супрессию КЧ на 23-39%. При этом не наблюдалось достоверных (p<0,05) различий между подгруппами. Так, процент супрессии КЧ при введении ФКС через 24 ч после сенсибилизации был равен 23,2±5,4%; при введении через 36 и 48 ч - 25,4±6,1% и 39,2±9,5% соответственно. Однако, по отношению к контролю, различия в величине отека были достоверными (p<0,05). Двух- и трехкратное внутривенное введение СМФ почти полностью подавляли КЧ. Так, при двухкратном введении супрессия составила - 86,7±7,4% (p<0,05), а при трехкратном - 99,0±7,3% (p<0,05). В отличие от внутривенного способа введения, при внутрибрю-шинно
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.