научный журнал по биологии Онтогенез ISSN: 0475-1450

ИВАНОВА Л.Б., РЯБЫХ В.П., ШИШИМОРОВА М.С. — 2004 г.

Изучали влияние совместной микроинъекции генно-инженерной конструкции и сайтспецифической эндонуклеазы SalI в пронуклеус на доимплантационное развитие эмбрионов мыши (CBA х х C57BL) F 1 in vitro. Выживаемость эмбрионов оценивали по их способности развиваться до стадии бластоцисты и вылупляться из блестящей оболочки. Полученные результаты показали, что микроинъекция экзогенной ДНК с эндонуклеазой SalI в концентрации от 0.1 до 0.01 ед/мкл достоверно снижала жизнеспособность эмбрионов по сравнению с контролем (р < 0.05; p < 0.01 соответственно). Однако было установлено, что снижение концентрации эндонуклеазы SalI до 0.01 ед/мкл в инъекционном растворе повышала способность эмбрионов мыши развиваться до стадии бластоцисты и выходить из блестящей оболочки по сравнению с эмбрионами, микроинъецированными раствором экзогенной ДНК с эндонуклеазой SalI в более высокой концентрации.

СУББОТКИН М.Ф., СУББОТКИНА Т.А. — 2004 г.

Исследована изменчивость антигенных свойств белков двух видов осетров на различных этапах постэмбрионального развития. Обнаружено, что наиболее глубокие изменения затрагивают отдельные компоненты альбуминов и β-глобулинов (трансферринов) и главным образом связаны с увеличением доли белка, приходящегося на эти антигены. Превращение основного компонента альбуминов А1 в антиген, характерный для взрослых рыб, завершается у пятимесячной молоди. Основной компонент Р-глобулинов βА (компонент трансферринов) появляется в крови значительно позже других белков и может сохранять черты, свойственные молоди, до 3-4 лет. Другие антигены, относящиеся к а 1- и а 2-глобулинам, и второй компонент трансферринов более стабильны и не претерпевают существенных изменений. Направленность онтогенетической изменчивости антигенов сывороточных белков молоди осетров не зависит от места постоянного обитания взрослых рыб в пресной или морской воде.

ВАСИН А.В., ЖИВУЛЬКО Т.В., ЖИГУЛЕВА Э.А., МИЩЕНКО Б.С., ПЛАТОНОВА Н.А., ПУЧКОВА Л.В., ЦЫМБАЛЕНКО Н.В. — 2004 г.

У 7-суточных крыс (эмбриональный тип метаболизма меди) in vivo изучен биосинтез церулоплазмина, медьсодержащего гликопротеина, играющего у позвоночных важную роль в переносе меди между органами и в двунаправленном клеточном транспорте железа. Установлено, что, помимо печени, церулоплазмин синтезируется в легких, мозгу и почках. Показано, что появление меченого церулоплазмина в кровотоке совпадает со временем освобождения новосинтезированного церулоплазмина только из печени. [ 14С]-церулоплазмин из кровотока поглощается клетками сердца, легких, почек и связывается с красными клетками крови. В клетки мозга полипептидная цепь церулоплазмина из кровотока не поступает. В плазматических мембранах сердца, печени, почек и эритроцитов, но не мозга, методом иммуноблоттинга выявлены иммунореактивные полипептиды рецептора церулоплазмина. В клетках мозга обнаружена молекулярная форма церулоплазмина, связанная с плазматической мембраной. Методом обратной транскрипции, сопряженной с полимеразной цепной реакцией, проведенной с помощью селективных праймеров, показано, что в составе этих клеток присутствуют молекулярные формы мРНК церулоплазмина, программирующие синтез как секреторного церулоплазмина, так и церулоплазмина, связанного с плазматической мембраной через гликозилфосфатидилинозитоловый якорь. После перехода на взрослый тип метаболизма меди на фоне резкого повышения содержания меди и церулоплазмина в сыворотке крови в спинномозговой жидкости содержание церулоплазмина, измеренное по оксидазной и антигенной активностям, а также концентрация меди, определенная методом атомно-абсорбционной спектрометрии, остаются низкими. Обсуждаются онтогенетические особенности системы, обеспечивающей гомеостаз меди у млекопитающих.

НЕФЕДОВА З.А., СИДОРОВ В.С., ТОЙВОНЕН Л.В., ЮРОВИЦКИЙ Ю.Г. — 2004 г.

Исследованы биохимические особенности липидного и фосфолипидного состава, а также характер жирнокислотных спектров в хрусталиках однолеток и двухлеток семги, пораженных катарактой. Установлены значительные изменения в липидном комплексе хрусталиков больных рыб. Показано, что катарактогенез сопровождается усилением свободнорадикального окисления и накоплением малонового диальдегида в хрусталиках семги разного возраста. Интенсификация окислительных процессов синхронизирована со снижением уровня антиоксидантной защиты (восстановленный глутатион, витамины A и E). Определена активность Са 2+-зависимых протеолитических ферментов в хрусталиках и показано снижение их активности при катаракте.

НЕФЕДОВА З.А., СИДОРОВ В.С., ТОЙВОНЕН Л.В., ЮРОВИЦКИЙ Ю.Г. — 2004 г.

При изучении патогенеза катаракты у молоди семги обнаружены изменения в содержании отдельных фракций фосфолипидов и в составе жирных кислот печени больных и здоровых рыб. Возрастные изменения у рыбы коррелировали с повышением антиокислительной активности и уменьшением уровня малонового диальдегида в печени.

ДЫБАН А.П., ЗАЦЕПИНА О.В., КОРОБОВА Ф.В., НОНИАШВИЛИ Е.М., РОМАНОВА Л.Г. — 2004 г.

Описали локализацию рибосомной ДНК в одноклеточных зародышах и ооцитах мыши на стадии второго деления созревания с помощью флуоресцентной гибридизации in situ с использованием меченых проб к различным участкам рибосомного повтора мыши. Показали, что в пронуклеусах рибосомные гены образуют компактные кластеры, число которых не превышает числа ядрышкообразующих районов хромосом. В подавляющем большинстве пронуклеусов не все предшественники ядрышка (nucleolar precursor bodies) ассоциированы с рибосомной ДНК, а часть рибосомных повторов располагается в нуклеоплазме вне видимой связи с предшественниками ядрышка. В совокупности эти наблюдения говорят о том, что пространственная ассоциация рибосомных генов с предшественниками ядрышка не является строго обязательной. Высказано предположение о том, что взаимодействие рибосомных генов с предшественниками ядрышка опосредовано центромерным гетерохроматином. В линиях мышей СВА и C57BL число ядрышкообразующих хромосом различается, а рибосомные гены неравномерно распределяются между индивидуальными ядрышкообразующими хромосомами и в некоторых случаях - между ядрышкообразующими районами сестринских хроматид.

СЕРОВ О.Л. — 2004 г.

Последнее десятилетие отмечено исключительным прогрессом в исследованиях молекулярных механизмов генного контроля развития: идентифицированы комплексы генов с иерархическим принципом их функционирования, изучены эволюционно-консервативные системы генов, обеспечивающих передачу трансмембранных регуляторных сигналов между клетками и играющих ключевую роль в морфогенезе, введено понятие о генных сетях, координирующих взаимодействие генов. Важно отметить, что временные и тканеспецифические параметры экспрессии генов реализуются корректно только в хромосомном контексте, во многом определяются местом положения генов на хромосоме и в интерфазном ядре. Эпигенетическое наследование в клеточных поколениях состояния генов осуществляется исключительно на хромосомном уровне благодаря клеточной или хромосомной памяти. Эта онтогенетическая память является имманентным свойством хромосомы, в поддержании которой ключевую роль играет цис-регуляция.

АСПИЗ М.Е. — 2004 г.

ГОРДЕЕВА А.В., НЕКЛЮДОВА И.В. — 2004 г.

Изучали влияние двукратного увеличения массы эксплантируемых фрагментов дорсальной и вентральной областей бластодермы вьюна на стадии ранней гаструлы на их способности к дифференцировке осевых структур. Дорсовентральные различия сводятся к тому, что дифференцировка сомитов, по данным факторного анализа, коррелирует с усложнением формы только в двойных дорсальных эксплантатах, а хорда в имеющих ее вентральных фрагментах более дифференцирована, чем в дорсальных. Двукратное увеличение массы дорсальных фрагментов бластодермы усиливает их формообразовательные способности и вызывает сдвиг дифференцировки в сторону образования туловищных осевых структур. Увеличение массы вентральных фрагментов бластодермы не влияет на их дифференцировку и формообразование, но нарушает корреляцию этих процессов.

ЖУРАВЛЕВ И.В., САЛАМАТИН А.В., ФИСИНИН В.И. — 2004 г.

Наблюдали увеличение массы яйца и достоверное снижение оплодотворяемости яиц при увеличении массы и площади поверхности желтка (яйцеклетки). Полученные результаты позволяют предположить, что помимо числа жизнеспособных спермиев, проникающих через поверхность перивителлиновой мембраны за 15-20 мин после овуляции, вероятность оплодотворения зависит от площади поверхности яйцеклетки (примерно соответствует площади перивителлиновой мембраны). По-видимому, с увеличением размера желтка снижается отношение числа рецепторов и контактирующих с ними спермиев на поверхности зародышевого диска к их числу на всей остальной части перивителлиновой мембраны. Снижение оплодотворяемости яиц при увеличении площади перивителлиновой мембраны свидетельствует о том, что размер яйцеклетки является одним из факторов, определяющих фертильность женских гамет как в плане изменчивости состава яйца, так и в возрастном аспекте.

АРЕФЬЕВА Л.П., ГРИНАШ М.Н., НОВОЖИЛОВА О.А., СЕМИХОВ В.Ф. — 2004 г.

Закономерности биосинтеза белков зародыша и эндосперма в процессе эмбриогенеза у сосны обыкновенной (Pinus sylvestris L.) исследовали посредством электрофореза и иммунохимии. Присутствие белков альбумино-глобулиновой фракции наблюдалось уже на ранних стадиях развития зародыша. Основные полипептидные компоненты (48-60; 37-39; 20-22 кДа) постепенно накапливаются на протяжении созревания. Отмечена высокая степень синхронности между стадиями эмбриогенеза и молекулярными событиями, связанными с биосинтезом и аккумуляцией белков в развивающемся семени.

БЕЛЯЕВА Р.Г., ЕВДОКИМОВА Л.И. — 2004 г.

Изучали содержание флавонолов (кемпферола, кверцетина) в меристеме вегетативного и генеративного апексов главного побега растений в линиях флоральных мутантов мака Papaver somniferum L., а также на последовательных стадиях развития цветка в линии с нормальной структурой. Для изучения выделили пять стадий в развитии цветка. Показано, что флавонолы (кемпферол, кверцетин) присутствуют на всех изученных стадиях флорального морфогенеза во всех органах цветка. Однако содержание и распределение их в отдельных органах и на разных стадиях развития цветка резко различаются. Не выявлено значимых различий по содержанию флавонолов в меристемах вегетативного и генеративного апексов главного побега в линиях флоральных мутантов, а также между линиями, различающимися по количеству формируемых вегетативных фитомеров. Показано, что у растений с нормальной структурой цветка с началом дифференцировки органов цветка, т.е. с третьей стадии развития, содержание флавонолов (кемпферол + кверцетин) резко возрастает, достигая максимальной величины в открытом цветке, когда завершается гаметогенез и происходит оплодотворение. При этом уровень содержания флавонолов в лепестках (верхняя часть) и тычинках на всех стадиях развития максимален, тогда как в гинецее - минимален. Соотношение содержания флавонолов кемпферол : кверцетин на последовательных стадиях развития цветка сдвигается в сторону кверцетина. Очень существенно это соотношение изменяется в тычинках. Полученные данные позволяют обсуждать участие флавонолов в регуляции процессов флорального морфогенеза на стадиях дифференцировки и функционирования органов цветка.

ВАСИЛЬЕВ А.В., КИСЕЛЕВ И.В., РОГОВАЯ О.С., ТЕРСКИХ В.В. — 2004 г.

Для реконструкции дефектов органов и тканей широко используют живые эквиваленты тканей, в частности, созданные на основе фибробластов и коллагенового геля. Для применения в клинике удобнее использовать фибробласты, выращенные на микроносителях, или такой эквивалент соединительной ткани, когда фибробласты на микроносителях заключены в коллагеновый гель. Задача настоящего исследования - изучение свойств эквивалента соединительной ткани, образованного путем заключения в коллагеновый гель фибробластов, выращенных на микроносителях, с тем, чтобы в дальнейшем его можно было использовать в клинике. По результатам наших исследований, оптимальные сроки использования живого эквивалента ткани составляют 3-4 сут после заключения в гель фибробластов на микроносителях. В это время только начинается контракция, что облегчает манипуляции с гелем.

ГОРОДИЛОВ Ю.Н. — 2004 г.

Получены новые данные, подтверждающие тот факт, что сомитогенез является ритмическим процессом, в котором время образования одного сомита является строго постоянной величиной. Эту константу (τ s) можно рассматривать как естественную единицу счета внутризародышевых биологических часов, которые обнаруживают себя в ритмических процессах. Оказалось, что константу τ s можно определить с исключительно высокой точностью, не имеющей аналогов среди известных биологических процессов, что само по себе говорит об уровне точности отсчета времени внутризародышевым механизмом часов. Наряду с этим было выяснено, что линейный размер сомитов вдоль оси прироста в момент их образования тоже является константной величиной. В процессе, в котором временной и пространственный факторы являются строго постоянными величинами, сигнальным для образования новых сомитов оказывается время. Это выяснилось из исследований зародышей-двойников, развивавшихся из одного яйца: число сомитов у обоих “двойников” оказалось таким же, как у нормальных зародышей из той же кладки, в то время как линейный размер сомитов у каждого из “двойников” был меньше нормы. В процессе сомитогенеза также проводили измерения длины головы, сегментированной и несегментированной туловищно-хвостовых частей вдоль главной оси тела. Анализируя данные по сомитогенезу последних лет, автор полагает, что предложенная им схема участия временного фактора в эмбриогенезе предсказывает: 1) что возможно выпадение некоторых стадий без существенных последствий для дальнейшего развития и 2) что все процессы зародышевого развития как на молекулярном, так и на клеточном и на надклеточном уровнях должны иметь периодическое включение/выключение и быть равными или кратными интервалу τ s.

СЕРОВ О.Л. — 2004 г.

ВОРОТЕЛЯК Е.А. — 2004 г.

ОЗЕРНЮК Н.Д. — 2004 г.

ГРОЗНЫЙ А.В., КРЕЩЕНКО Н.Д., СЕДЕЛЬНИКОВ З.В., ШЕЙМАН И.М. — 2004 г.

Проводили компьютерную морфометрию регенерантов планарий Dugesia tigrina. Анализу подвергали рост бластемы у фрагментов планарий после их деления и после поперечной перерезки на разных уровнях тела. Бластема на хвостовых фрагментах росла интенсивнее, чем на головных и тем быстрее, чем ближе к головному концу была сделана перерезка. После деления планарий бластема росла медленнее, чем после перерезки в зоне деления. Рост смежных бластем, образованных по обе стороны после деления или после перерезки, происходил с разной интенсивностью в зависимости от новой полярности тела.

ОТЕЛЛИН В.А., ПЕТРОВА Е.С. — 2004 г.

Метод эктопической трансплантации эмбриональных закладок центральной нервной системы позволяет изучать механизмы адаптации пересаженных эмбриональных закладок. Одним из таких механизмов считается продукция клетками окиси азота. Показателем присутствия в клетках синтазы окиси азота является НАДФ-диафораза. В настоящем исследовании установлено, что нервные клетки трансплантатов эмбрионального спинного мозга крыс сохраняют способность экспрессировать НАДФ-диафоразу после пересадки в седалищный нерв взрослых животных в течение 6 мес. Проведено сравнительное исследование динамики развития НАДФ-диафоразапозитивных нейронов эмбрионального спинного мозга крыс, развивающегося в условиях трансплантации и in situ. В шейном отделе спинного мозга мелкие биполярные НАДФ-диафоразапозитивные нейроны выявляются на 17-е сут пренатального развития. Установлено, что в условиях трансплантации эмбрионального (15-е сут развития) спинного мозга в нерв формирование НАДФ-диафоразапозитивных нейронов начинается позже, чем in situ, через 7 сут после пересадки. Результаты гистохимического исследования через 6 мес после операции демонстрируют протективную роль НАДФ-диафоразы в нейронах аллотрансплантатов, развивающихся в условиях измененного микроокружения и недостаточной иннервации, а также позволяют предположить, что окись азота может вызывать гибель нейронов в длительно живущих трансплантатах.

АБДРАХМАНОВА К.А., ГУЛЬБЕ А.Я., МИХАЛЕВСКАЯ О.Б. — 2004 г.

Исследован первый цикл роста побега проростков Quercus robur L., у которых изменяли донорно-акцепторные отношения путем удаления части семядолей, выращивая в темноте или удаляя растущие листовые пластинки. Во всех случаях наибольшие изменения в росте и ростовых корреляциях наблюдали в верхних метамерах побега, несущих листовые пластинки, а наименьшие - в нижних метамерах, преформированных в зародыше желудя. Удаление растущих листьев меняло ритмичность роста побега.