научный журнал по химии Прикладная биохимия и микробиология ISSN: 0555-1099

Архив научных статейиз журнала «Прикладная биохимия и микробиология»

  • ВЛИЯНИЕ PH АДСОРБЦИОННЫХ БУФЕРОВ НА КОЛИЧЕСТВО И АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩУЮ АКТИВНОСТЬ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ, ИММОБИЛИЗОВАННЫХ НА ПОВЕРХНОСТЬ ПОЛИСТИРОЛОВЫХ ПЛАНШЕТОВ

    ДМИТРИЕВ А.Д., ДМИТРИЕВ Д.А., ЛАВРОВ В.Ф., МАССИНО Ю.С., ПЕЧЕЛЮЛЬКО А.А., СЕГАЛ О.Л., СКОБЛОВ Ю.С., ТАРАКАНОВА Ю.Н., УЛАНОВА Т.И. — 2015 г.

    Исследовали изменение концентрации и антигенсвязывающей активности 28 моноклональных антител после их адсорбции на поверхность планшетов из полистирола в буферах с различными значениями рН (1.0, 2.8, 7.5, 9.6 и 11.9). Использовали 16 клонов к белку р24 ВИЧ и 12 клонов к поверхностному антигену вируса гепатита В. Эффективность связывания адсорбированных антител с меченым антигеном оценивали по тангенсу угла наклона линейного участка кривой связывания с антигеном к оси концентраций. Показано, что 6 антител (21.5%) статистически достоверно увеличивали антигенсвязывающую активность после адсорбции при рН 2.8 и 11.9 по сравнению с рН 7.5 и 9.5. Установлено, что максимальное количество антител адсорбировалось на твердую фазу при рН 7.5. Анализ связывания 125I-HBs-антигена с адсорбированными антителами позволил определить концентрацию активных антител на поверхности полистирола. Показано, что увеличение антигенсвязывающей активности обусловлено повышением доли сохранивших активность антител после адсорбции при рН 2.8 и 11.9. В этих условиях антигенсвязывающую активность сохраняли около 20% антител по сравнению с 6% после иммобилизации при рН 7.5.

  • ВЛИЯНИЕ PH, АЭРАЦИИ И ТЕМПЕРАТУРЫ НА СИНТЕЗ АРАХИДОНОВОЙ КИСЛОТЫ MORTIERELLA ALPINA

    ВАЙНШТЕЙН М.Б., ДЕДЮХИНА Э.Г., КАМЗОЛОВА С.В., МИНКЕВИЧ И.Г., МИРОНОВ А.А., ЧИСТЯКОВА Т.И. — 2015 г.

    Изучено влияние рН, аэрации и температуры на рост гриба Mortierella alpna LPM-301, синтез липидов и арахидоновой кислоты на среде с глицерином. Установлено, что синтез арахидоновой кислоты в стационарной фазе роста микроорганизма существенно зависит от значения рН среды, оптимальный рост наблюдался при рН 6.0 и необратимо ингибировался при рН 3.0. Значение рО2 в пределах от 10 до 50% не оказывало существенного влияния на рост, синтез липидов и арахидоновой кислоты. Температурный оптимум для синтеза арахидоновой кислоты соответствовал 20–22°C. При проточном культивировании продуцента содержание арахидоновой кислоты достигало 29.8% от массы липидов и 7.4% от биомассы. Содержание арахидоновой кислоты от потребленного глицерина составляло 4.1% по массе и 8.8% по энергии. Высказано предположение, что синтез арахидоновой кислоты лимитировался при неблагоприятных значениях рН активностью -12-десатуразы, а при повышенных температурах – превращением линолевой кислоты в арахидоновую.

  • ВЛИЯНИЕ АНТИОКСИДАНТА НА РОСТ И ОБРАЗОВАНИЕ ЛИПИДОВ У ГРИБА LENTINUS TIGRINUS, РАСТУЩЕГО НА СРЕДЕ С ЛИГНОСУЛЬФОНАТОМ

    ИВАШЕЧКИН А.А., ЛУНИН В.В., МЫСЯКИНА И.С., СЕРГЕЕВА Я.Э., ФЕОФИЛОВА Е.П. — 2015 г.

    Добавление антиоксиданта (2-этил-6-метил-3-гидроксипиридин гидрохлорид) в культуру гриба Lentinus tigrinus, растущего на среде с лигносульфонатом, ингибировало рост и изменяло состав клеточных фосфолипидов. Изменялось также соотношение липидных мессенджеров, снижался уровень фосфатидной кислоты и резко увеличивалось содержание фосфатидилинозита. Замена в составе среды лигносульфоната на глюкозу и внесение антиоксиданта увеличивало выход биомассы L. tigrinus так же, как и у других грибов (Сunninghamella japonica), неспособных к биодеградации этого биополимера. Полученные данные свидетельствуют о специфичности ростовых процессов на лигносульфонате и подтверждают роль реакций свободнорадикального окисления в биодеградации этого биополимера L. tigrinus.

  • ВЛИЯНИЕ МУТАЦИЙ УСТОЙЧИВОСТИ К РИФАМПИЦИНУ НА БИОСИНТЕЗ ЭКЗОПОЛИСАХАРИДОВ ШТАММОМ ESCHERICHIA COLI K-12 LON

    БАРСЕГЯН А.А., ОГАНЕСЯН Г.Г. — 2015 г.

    Изучено влияние РНК-полимеразных (rif) мутаций на выход капсулярного экзополисахарида – колановой кислоты (КК) у штамма Escherichia coli K-12 lon. Путем трансдукционного переноса rif-аллелей, обладающих плейотропным действием, было получено 5 изогенных штаммов-продуцентов колановой кислоты. Изогенные штаммы различались удельной скоростью роста, размером и ослизнённостью колоний, зависимостью роста от состава питательной среды и температуры культивирования, а также скоростью адсорбции вирулентного бактериофага М59, специфически лизирующего клетки E. coli, продуцирующие КК. Установлена прямая корреляция между выходом экзополисахаридов, скоростью роста и адсорбцией бактериофага М59. Среди rif-рекомбинантов отобран штамм АН203, синтезирующий в два раза больше КК при глубинном культивировании по сравнению с родительским штаммом.

  • ВЛИЯНИЕ ПОЛИКАТИОНОВ НА АНТИБАКТЕРИАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ ЛИЗОСТАФИНА

    ВАРЛАМОВ В.П., КУЛИКОВ С.Н., ХАЙРУЛЛИН Р.З. — 2015 г.

    Показан эффект синергизма лизостафина и поликатионов различной химической структуры при проявлении антибактериальной активности против Staphylococcus aureus. Поликатионы усиливали литическое действие лизостафина на пептидогликан стафилококков. Высказано предположение, что при этом уменьшалось связывание положительно заряженного лизостафина с тейхоевыми кислотами клеточных стенок S. aureus. Полученные данные открывают перспективы для поиска поликатионов, усиливающих эффект синергизма при действии лизостафина и других антибактериальных белков на стафилококки.

  • ВЛИЯНИЕ СТРУКТУРЫ ГИДРОГЕЛЕВЫХ НОСИТЕЛЕЙ НА АКТИВНОСТЬ ИММОБИЛИЗОВАННОГО ТРИПСИНА

    ВАЛУЕВ И.Л., ВАЛУЕВ Л.И., ВАЛУЕВА Т.А., ВАНЧУГОВА Л.В. — 2015 г.

    Исследована зависимость активности трипсина, иммобилизованного в полиакриламидном гидрогеле, от степени набухания гидрогеля, распределения его пор по размерам и способа связывания с ним фермента. Показано, что наиболее благоприятные условия для функционирования иммобилизованного трипсина обеспечивало его связывание с гидрогелем путем сополимеризации макромономера трипсина с акриламидом и сшивающим агентом в присутствии модификатора, ограничивающего рост полимерных цепей.

  • ДЕЙСТВИЕ ГЕМОЛИЗИНА II BACILLUS CEREUS НА КЛЕТКИ ГЕПАТОЦИТОВ

    АНДРЕЕВА-КОВАЛЕВСКАЯ Ж.И., БУДАРИНА Ж.И., СИУНОВ А.В., СОЛОНИН А.С., ХОЛОДКОВ О.А. — 2015 г.

    Исследована эффективность повышения проницаемости (пермеабилизации) мембран первичных клеток печени гемолизином II Bacillus cereus. Оценку степени пермеабилизации проводили по измерению интенсивности флуоресценции различных низкомолекулярных красителей, входящих через поры внутрь обрабатываемых гемолизином клеток. Отмечена высокая эффективность действия гемолизина HlyII на клеточные стенки гепатоцитов, превышающая эффективность действия неионного детергента дигитонина, обычно используемого для образования пор в различных клеточных мембранах. Продемонстрирована обратимость пермеабилизации мембран первичных гепатоцитов. Полученные в работе данные могут быть применены при определении пороформирующей активности, механизмов действия гепатопротекторов, а также и для оценки токсичности действия на печень различных низкомолекулярных лекарственных препаратов.

  • ДЕЙСТВИЕ ОКСИГЕНИРОВАННЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ЛИНОЛЕВОЙ И ЛИНОЛЕНОВОЙ КИСЛОТ НА ОБРАЗОВАНИЕ КОНИДИЙ И ПРОТОПЕРИТЕЦИЕВ У ДИКОГО ТИПА И МУТАНТОВ ПО ФОТОРЕЦЕПТОРНОМУ КОМПЛЕКСУ NEUROSPORA CRASSA

    БАЧУРИНА Г.П., БЕЛОЗЕРСКАЯ Т.А., ГЕССЛЕР Н.Н., ГОЛОВАНОВ А.Б., ГРОЗА Н.В., МАКАРОВА А.М., ФИЛИППОВИЧ С.Ю. — 2015 г.

    Исследовано регуляторное действие двух оксипроизводных ненасыщенных жирных кислот (оксилипинов) – 18-гидрокси-(9Z,12Z)-октадекадиеновой кислоты (18-HODE) и 18-гидрокси-(9Z,12Z,15Z)-октадекатриеновой кислоты (18-HOTrE), на половое и бесполое размножение штаммов Neurospora crassa дикого типа и мутантов wc-1 и wc-2. Показано, что у штамма дикого типа 18-НОDE, в отличие от 18-HOTrE, является стимулятором образования протоперитециев в темноте и на свету. У этого же штамма исследованные оксилипины оказывали влияние на конидиогенез только в условиях освещения: 18-HODE стимулировала, а 18-HOTrE ингибировала образование конидий. Оксилипины не влияли на образование протоперитециев у мутантов по фоторецепторному комплексу, что, по-видимому, свидетельствовало о его участии в передаче сигнала у N. crassa. Стимуляция образования конидий у wc-1 под влиянием исследованных оксилипинов и отсутствие их действия на wc-2 может указывать на наличие альтернативных путей передачи сигнала оксилипинов при конидиогенезе.

  • ИЗУЧЕНИЕ НОВЫХ ВИРУЛЕНТНЫХ БАКТЕРИОФАГОВ, АКТИВНЫХ ПРОТИВ МНОЖЕСТВЕННО-РЕЗИСТЕНТНЫХ ШТАММОВ PSEUDOMONAS AERUGINOSA

    БАЛАРДЖИШВИЛИ Н.Ш., БЕРИШВИЛИ Т.А., КВАЧАДЗЕ Л.И., КУТАТЕЛАДЗЕ М.И., МЕСХИ Т.Ш., ПАТАРИДЗЕ Т.К., ТЕВДОРАДЗЕ Е.Ш. — 2015 г.

    Исследована чувствительность 512 свежевыделенных клинических штаммов Pseudomonas aeruginosa к антимикробным препаратам 6 классов. Отобраны и генотипированы антибиотикорезистентные штаммы, против которых выделены три новых вирулентных бактериофага, относящиеся к таксономическим семействам Myoviridae и Podoviridae. Установлены параметры цикла внутриклеточного развития фагов и изучено влияние на их жизнеспособность инактивирующих факторов (температуры, рН, УФ-излучения). Определена молекулярная масса геномов фагов, проведен рестрикционный анализ их ДНК и ПААГ-элекрофорез в присутствии ДДС-Na белков оболочки. Исследована эффективность посева бактериофагов на 28 генетически отдаленных антибиотикорезистентных штаммах P. aeruginosa. Установлено, что 26 из них с высокой эффективностью лизировалось одним из фагов. Определен диапазон антибактериального действие изученных фагов и их смеси на 427 полирезистентных клинических штаммов. Показано, что объединение этих фагов в одном многокомпонентном препарате усиливало их литическую активность.

  • ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКАЯ ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ ДЕТЕКЦИИ Т-2 ТОКСИНА

    ВОЗНЯК М.В., ДЗАНТИЕВ Б.Б., ЖЕРДЕВ А.В., ПЕТРАКОВА А.В., УРУСОВ А.Е. — 2015 г.

    Разработана иммунохроматографическая тест-система для детекции Т-2 токсина (Т2Т), одного из приоритетных контаминант зерновой продукции. Детекция основана на конкуренции содержащегося в пробе Т2Т и иммобилизованного на тест-полоске конъюгата Т2Т–белок за связывание с комплексами антител против Т2Т и маркера – золотых наночастиц. Результат конкуренции регистрируется по окрашиванию маркером аналитической зоны тест-полоски. Установлено, что для достоверного высокочувствительного анализа оптимально разведение пробы при конечной концентрации метанола 20%. Показано, что замедление движения реагентов вдоль тест-полоски, которое обеспечивалось использованием дополнительных мембран, пропитанных 10%-ным БСА, приводило к снижению предела детекции Т2Т. Тест-система апробирована для выявления Т2Т в водно-метанольных экстрактах зерен кукурузы. Исчезновение окрашивания аналитической зоны, свидетельствующее о присутствии микотоксина, наблюдалось для проб зерна, содержащих от 53 мкг/кг Т2Т (концентрация Т2Т при проведении иммунохроматографии – 3 нг/мл). При видеоцифровой регистрации предел выявления Т2Т составил 16 мкг/кг (0.9 нг/мл). Продолжительность тестирования – 15 мин. Полученные данные свидетельствуют о пригодности разработанной тест-системы для контроля превышения максимальных допустимых уровней содержания Т2Т.

  • ИНГИБИРОВАНИЕ АВТООКИСЛЕНИЯ ЛЬНЯНОГО МАСЛА ЭФИРНЫМИ МАСЛАМИ И ЭКСТРАКТАМИ ПРЯНО-АРОМАТИЧЕСКИХ РАСТЕНИЙ

    АЛИНКИНА Е.С., КИСЕЛЁВА В.И., КРИКУНОВА Н.И., МЕДВЕДЕВА И.Б., МИШАРИНА Т.А., СЕМЕНОВА М.Г., ТЕРЕНИНА М.Б. — 2015 г.

    Исследовано ингибирование автоокисления полиненасыщенных жирных кислот в льняном масле с помощью природных антиоксидантов: эфирного масла гвоздики, экстрактов имбиря, душистого и черного перца и аскорбилпальмитата. Для оценки эффективности антиоксидантов использованы методы, основанные на определении таких показателей, как перекисное число, концентрация пероксидов, содержание продуктов расщепления пероксидов полиненасыщенных жирных кислот, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой, содержание сопряженных диенов, летучих продуктов расщепления пероксидов полиненасыщенных жирных кислот и состав жирных кислот в виде метиловых эфиров в окисленных образцах масла. Показано, что антиоксидантными свойствами в изученной системе обладали только эфирное масло гвоздики и аскорбилпальмитат.

  • ИНГИБИТОРЫ АМИЛАЗ ИЗ STREPTOMYCES LUCENSIS ВКПМ АC-1743 И STREPTOMYCES VIOLACEUS ВКПМ АC-1734

    ШАРОВА Н.Ю. — 2015 г.

    Исследовано действие ингибиторов, синтезируемых штаммами Streptomyces violaceus ВКПМ Аc-1734 и Streptomyces lucensis ВКПМ Аc-1743, на амилазы различного происхождения. Выявлены различия в действии ингибиторов на грибные амилазы, панкреатическую амилазу и амилазу из крови человека. Установлено, что изучаемые ингибиторы – вещества псевдоолигосахаридной природы, проявляли активность и стабильность в широких интервалах рН и температуры. Проведено сравнение физико-химических и биохимических свойств выделенных ингибиторов с известными микробными ингибиторами -глюкозидаз.

  • ИНСТИТУТУ БИОХИМИИ И ФИЗИОЛОГИИ МИКРООРГАНИЗМОВ ИМ. Г.К. СКРЯБИНА РАН – 50 ЛЕТ

    2015

  • ИНТЕНСИФИКАЦИЯ МИКРОБНОГО РАЗЛОЖЕНИЯ ОРГАНИЧЕСКОЙ ФРАКЦИИ БЫТОВЫХ ОТХОДОВ: ЛАБОРАТОРНЫЕ И ПОЛЕВЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТЫ

    КАЛЛИСТОВА А.Ю., КЕВБРИНА М.В., ЛИТТИ Ю.В., НЕКРАСОВА В.К., НИКИТИНА А.А., НОЖЕВНИКОВА А.Н. — 2015 г.

    Исследованы способы интенсификации анаэробного микробного разложения органической фракции твердых бытовых отходов (ТБО) на полигоне ТБО и в анаэробных реакторах. Установлено, что для инициации и стабилизации процесса анаэробной ферментации органических отходов в лабораторных биореакторах при 20 и 50°С в качестве инокулята предпочтительно использовать смесь активированной суспензии грунта анаэробной зоны полигона ТБО и сброженного в метантенке осадка сточных вод.

  • ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЭНДОГЛЮКАНАЗЫ IV TRICHODERMA REESEI ДЛЯ УВЕЛИЧЕНИЯ ГИДРОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЦЕЛЛЮЛАЗНОГО КОМПЛЕКСА ГРИБА PENICILLIUM VERRUCULOSUM

    БУБНОВА Т.В., ЗОРОВ И.Н., КОНДРАТЬЕВА Е.Г., КОРОТКОВА О.Г., КОШЕЛЕВ А.В., МАТЫС В.Ю., НЕМАШКАЛОВ В.А., ОКУНЕВ О.Н., ПРОСКУРИНА О.В., РОЖКОВА А.М., СИНИЦЫН А.П. — 2015 г.

    Изучено влияние полисахаридмонооксигеназы (эндоглюканазы IV) гриба Trichoderma reesei на гидролиз полисахаридных субстратов целлюлазами, секретируемыми грибом Penicillium verruculosum. Показано, что внесение эндоглюканазы IV из T. reesei в комплекс ферментов гриба P. verruculosum позволяет повысить эффективность гидролиза целлюлозы на 45%.

  • ИССЛЕДОВАНИЕ SEC-СИСТЕМЫ ТРАНСЛОКАЦИИ БЕЛКОВ ПРИ ГЕТЕРОЛОГИЧНОЙ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ В КЛЕТКАХ БАКТЕРИИ SHEWANELLA ONEIDENSIS MR-1

    ВЕЙКО В.П., МОРДКОВИЧ Н.Н., ОКОРОКОВА Н.А. — 2015 г.

    Проведено сравнение первичных структур белков Sec-системы транслокации белков у бактерий Shewanella oneidensis MR-1 и Escherichia coli. Изучен процесс транслокации рекомбинантных про-энтероксинов (SEB и SEH) из Staphylococcus aureus и про-стрептавидина (SAV) из Streptomyces avidinii в периплазму клеток S. oneidensis MR-1 и E. coli. Показано, что эти маркерные белки переносятся в периплазматическое пространство клеток штаммов-трансформантов S. oneidensis MR-1. Установлена идентичность N-концевых аминокислотных последовательностей зрелых рекомбинантных белков SEB, SEH и SAV, образующихся при пост-трансляционном протеолизе лидерного пептида Sec-системой как в E. coli, так и в S. oneidensis MR-1.

  • ИССЛЕДОВАНИЕ СТАДИЙ ХИМИЧЕСКОГО ВЫЩЕЛАЧИВАНИЯ И БИООКИСЛЕНИЯ ПРИ ПОЛУЧЕНИИ ЗОЛОТА ИЗ СУЛЬФИДНОГО КОНЦЕНТРАТА

    КОНДРАТЬЕВА Т.Ф., МУРАВЬЁВ М.И., ФОМЧЕНКО Н.В. — 2015 г.

    Исследованы стадии химического выщелачивания и биоокисления двухстадийного процесса биоокисления золотосодержащего сульфидного концентрата, содержащего пирротин, арсенопирит и пирит. Химическое выщелачивание концентрата (плотность пульпы 200 г/л) биораствором сульфата трехвалентного железа (начальная концентрация 35.6 г/л), полученного микробным окислением сульфата двухвалентного железа, в течение 2 ч при 70°С и pH 1.4 позволяло окислить 20.4% арсенопирита и 52.1% серы в составе сульфидов. Наиболее эффективное биоокисление химически выщелоченного концентрата наблюдалось при 45°С в присутствии дрожжевого экстракта. Окисление концентрата в двухстадийном процессе протекало более эффективно, чем в одностадийном. При этом извлечение золота из осадка было на 10% больше, а содержание в нем элементной серы было в 2 раза меньше.

  • ИССЛЕДОВАНИЕ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ОРГАНИЗАЦИИ СИГНАЛЬНОГО ПЕПТИДА ПРО-ЭНТЕРОТОКСИНА В ИЗ STAPHYLOCOCCUS AUREUS

    ВЕЙКО В.П., МОРДКОВИЧ Н.Н., ОКОРОКОВА Н.А. — 2015 г.

    Сконструирована серия генов про-энтеротоксина В из Staphylococcus aureus, содержащих мутантные формы сигнального пептида и исследована функциональная роль введенных мутаций. Показано, что внесенная протяженная мутация n-района сигнального пептида, в отличие от аналогичной мутации h-района, не влияла на эффективность секреции про-энтеротоксина В. Получены точечные мутации сигнального пептида про-белка, включающие N-концевой аминокислотный остаток зрелого белка. Показано, что введенные структурные изменения приводят к снижению эффективности секреции и перераспределению белка в составе различных компартментов клеток Escherichia coli.

  • К 80-ЛЕТИЮ ИНСТИТУТА БИОХИМИИ ИМЕНИ А.Н. БАХА РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК

    2015

  • КАТАЛИТИЧЕСКИЕ И СТЕРЕОСЕЛЕКТИВНЫЕ СВОЙСТВА ИММОБИЛИЗОВАННОЙ АМИДАЗЫ RHODOCOCCUS RHODOCHROUS 4-1

    ГОРБУНОВА А.Н., МАКСИМОВ А.Ю., МАКСИМОВА Ю.Г., ОВЕЧКИНА Г.В. — 2015 г.

    Амидазу Rhodococcus rhodochrous 4-1 иммобилизовали, используя ковалентное присоединение к активированному хитозану, физическую сорбцию на углеродсодержащих адсорбентах и образование поперечно-сшитых агрегатов фермента в отсутствие носителя. Проведен сравнительный анализ некоторых каталитических свойств свободной и иммобилизованной на хитозане амидазы. Показано, что фермент, ковалентно иммобилизованный на хитозане, сохранял 50–60% исходной активности и обладал более высокой термостабильностью по сравнению с растворимой амидазой, а также сохранял более 20% активности на протяжении пяти 24-часовых циклов трансформации акриламида. Изучено влияние способов иммобилизации на стереоселективные свойства амидазы в модельной реакции трансформации рацемического лактамида до D- и L-молочной кислоты. Показано, что поперечно-сшитые агрегаты амидазы обладали высокой D-стереоселективностью (до 77–94%). Максимальная энантиоселективность иммобилизованного фермента наблюдалась при 60°С.