научный журнал по химии Прикладная биохимия и микробиология ISSN: 0555-1099

Архив научных статейиз журнала «Прикладная биохимия и микробиология»

  • МИКРООРГАНИЗМЫ ОЗЕР БАЙКАЛ И НЬЯСА КАК ИНДИКАТОРЫ АНТРОПОГЕННОГО ВЛИЯНИЯ И ПЕРСПЕКТИВА ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В БИОТЕХНОЛОГИИ

    ВЕРХОЗИНА В.А., ВЕРХОЗИНА Е.В., ГОНЧАР Д.А., ДЕГТЯРЁВ С.Х., ДЕДКОВ В.С., КУСНЕР Ю.С. — 2004 г.

    В 650 штаммах, выделенных из водной толщи и донных осадков глубоких рифтовых озер мира Байкал (Россия) и Ньяса (Юго-Восточная Африка), выявлены эндонуклеазы рестрикции (рестриктазы). Изучение спектра ферментов рестрикции бактериальных штаммов позволило выявить наличие уникальных (Fan I, Aca I, Sse 91), а также весьма редких, не типичных для водных экосистем ферментов (Bsi I, Cci N I). В чистых участках водной толщи, в кернах глубинного бурения и донных отложениях Байкала и Ньясы обнаружены только известные ферменты рестрикции. Полученные результаты дают основания полагать, что в прибрежной части Байкала, находящейся под антропогенным влиянием, могут появляться мутантные штаммы бактерий с неизвестными ранее рестриктазами.

  • ОБРАЗОВАНИЕ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ПРИ РОСТЕ ШТАММА RHODOCOCCUS ERYTHROPOLIS ЭК-I НА ГИДРОФИЛЬНЫХ И ГИДРОФОБНЫХ СУБСТРАТАХ

    ВОЛОШИНА И.Н., КАРПЕНКО Е.В., ПИРОГ Т.П., ШЕВЧУК Т.А. — 2004 г.

    Изучена способность к образованию поверхностно-активных веществ (ПАВ) при росте штамма Rhodococcus erythropolis ЭК-1 на гидрофильных (этанол, глюкоза) и гидрофобных (жидкие парафины, гексадекан) субстратах. Установлено, что штамм синтезирует как свободные, так и ассоциированные с клетками ПАВ, обладающие эмульгирующими и поверхностно-активными свойствами. Показана зависимость синтеза ПАВ от состава питательной среды, природы и концентрации углеродного и азотного источников питания, длительности процесса культивирования. По химической природе ПАВ, синтезируемые при росте Rhodococcus erythropolis ЭК-1 на этаноле, представляют комплекс липидов с соединениями полисахаридно-белковой природы. В составе липидов выявлены гликолипиды (трегалозомоно- и трегалозодикориномиколаты) и общие липиды (цетиловый спирт, пальмитиновая кислота, метиловый эфир н-пентадекановой кислоты, триглицерид, миколовые кислоты).

  • ОСАЖДЕННЫЕ, СООСАЖДЕННЫЕ И УГЛЕМИНЕРАЛЬНЫЕ АДСОРБЕНТЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ВНЕКЛЕТОЧНОЙ КАТАЛАЗЫ PENICILLIUM PICEUM F-648

    ДРОЖДЕНЮК А.П., ЕРЕМИН А.Н., МАКАРЕНКО М.В., МИХАЙЛОВА Р.В., МОРОЗ И.В. — 2004 г.

    Проведено сравнение эффективности связывания каталазы (КАТ, КФ 1.11.1.6) из фильтрата культуральной жидкости (ФКЖ) гриба Penicillium piceum F-648 с использованием различных адсорбентов. Фосфат кальция, гидроксиапатит (ГАП), соосажденные адсорбенты, содержавшие гидроксиды магния и алюминия, и углеминеральные адсорбенты, включавшие фосфат кальция или гидроксид магния, более эффективно связывали внеклеточную КАТ, чем оксид и фосфат алюминия, кварцевый песок. Фермент выделен из ФКЖ гриба P. piceum с использованием ГАП и двухкомпонентного соосажденного адсорбента (Ca 3(PO 4) 2 + Mg(OH) 2, 1 : 1) (СМ). Образец КАТ(СМ) содержал минимальное количество примесных белков, характеризовался максимумами в спектре поглощения при 279.6; 406.8 (полоса Соре), 540, 585, 636 и 703 нм и минимумами отрицательной молярной эллиптичности при 207 и 210-214 нм. Кинетические характеристики образцов (К м, V макс/К м, удельная активность) сложным образом зависели от концентрации белка в среде реакции. В разбавленных растворах К м и удельная активность КАТ(СМ) и кАт(ГаП) равны 667 и 137 мМ, 300.9 × 10 4 и 30.0 × 10 4 МЕ/мг белка соответственно. Эффективные константы скорости инактивации КАТ(ГАП), КАТ(СМ) и ФКЖ в ходе разложения H 2O 2 резко возрастали при разведении образцов и в бесконечно разбавленном растворе составляли 4.30 × 10 -2, 6.46 × 10 -2 и 1.12 × 10 -2 с -1 соответственно.

  • ОЧИСТКА ПОЧВЫ ОТ НЕФТЯНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДЕНИТРИФИЦИРУЮЩИХ УГЛЕВОДОРОДОКИСЛЯЮЩИХ МИКРООРГАНИЗМОВ

    ЗАРИПОВА С.К., ОСИПОВА А.Л., РАХИМОВА Э.Р. — 2004 г.

    В лабораторных условиях исследовали эффективность применения нефтеокисляющего сообщества микроорганизмов в биоремедиации нефтезагрязненной почвы. Особенностью сообщества является способность эффективно окислять углеводороды нефти как в аэробных, так и в аноксических условиях. Степень разложения углеводородов нефти в вариантах биоремедиации за первые два месяца эксперимента увеличилась в ряду: самоочищение (40%) < внесение нитрата (42%) < интродукция денитрифицирующего нефтеокисляющего сообщества (50%) < интродукция денитрифицирующего нефтеокисляющего сообщества + внесение нитрата (60%). Интенсификация процесса биоремедиации связана с увеличением численности углеводородокисляющих микроорганизмов, прежде всего денитрифицирующих, при интродукции сообщества.

  • ПЕРОКСИДАЗНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ФЕНОЛОВ

    ДАВИДЕНКО Т.И. — 2004 г.

    Частично очищенная пероксидаза хрена эффективно трансформировала фенольные соединения (фенол, о-хлорфенол, 2,4,6-трихлорфенол, пентахлорфенол с образованием нерастворимых в воде полимерных продуктов, резорцин и тимол с образованием низкомолекулярных соединений). Определены оптимальные условия пероксидазного окисления, приводящие к максимальной степени удаления фенольных соединений: температура 15-25°С для фенола, 25-30°С для хлорфенольных соединений, мольное соотношение Н 2О 2-фенол 1 : 1, время трансформации 1-3 ч, наибольшая степень трансформации наблюдалась в широком интервале рН, несколько увеличиваясь при рН 6.0-7.5. Предложено многократно проводить пероксидазное окисление фенолов, используя частично очищенную пероксидазу, содержащуюся в диализной мембране, которая помещается в раствор фенольного соединения с добавлением пероксида водорода.

  • ПЕРСПЕКТИВЫ ПРАКТИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ СУБСТРАТСВЯЗЫВАЮЩИХ МОДУЛЕЙ ГЛИКОЗИЛГИДРОЛАЗ (ОБЗОР)

    ВЕЛИКОДВОРСКАЯ Г.А., ВОЛКОВ И.Ю., ЛУНИНА Н.А. — 2004 г.

    В обзоре рассмотрены свойства субстратсвязывающих модулей гликозилгидролаз. Благодаря вариабельности свойств использование модулей в составе химерных белков - перспективная и быстро развивающаяся область биотехнологии. Описаны примеры использования субстратсвязывающих модулей гликозилгидролаз для иммобилизации белков и целых клеток на полисахаридах, очистки белков. Кратко изложены также перспективные методы детекции соединений с помощью гибридов субстратсвязывающих модулей с антителами, определения локализации полисахаридов в живых тканях и другие.

  • ПОИСК ДРОЖЖЕЙ - ПРОДУЦЕНТОВ БРАССИЛОВОИ И СЕБАЦИНОВОЙ ЖИРНЫХ КИСЛОТ

    РОГОЖИН И.С., УЛЕЗЛО И.В. — 2004 г.

    Проведен скрининг культур дрожжей, относящихся к родам Candida, Torulopsis, Saccharomyces, Debaryomyces, Hansenula, Pichia и Yarrowia, способных образовывать брассиловую и себациновую жирные кислоты. Испытано около 200 культур при выращивании на средах с деканом или тридеканом в качестве единственных источников углерода. При культивировании на среде с тридеканом дрожжи синтезировали незначительное количество брассиловой кислоты. На среде с н-деканом более интенсивно образовывалась себациновая кислота. Отобрана культура Candida tropicalis, синтезирующая себациновую кислоту.

  • ПОЛУЧЕНИЕ КОБАЛЬТУСТОЙЧИВЫХ ШТАММОВ ПРОПИОНОВОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ -АКТИВНЫХ ПРОДУЦЕНТОВ ВИТАМИНА В 12

    ГУЛЯМОВА Т.Г., РУЗИЕВА Д.М., СЕЙДАМЕТОВА Э.А., ШАКИРЗЯНОВА М.Р. — 2004 г.

    Путем адаптации к высоким концентрациям нитрата кобальта получено 46 штаммов пропионовокислых бактерий Propionibacterium acidipropionici, обладающих устойчивостью к избытку Со 2+ в среде. Изучена их способность к синтезу витамина В 12 и выявлены наиболее активные культуры. Выход витамина у исходных штаммов удалось увеличить почти в 3 раза.

  • ПРЕДМЕТНЫЙ УКАЗАТЕЛЬ ТОМА 40, 2004 Г

    2004

  • РОЛЬ ЭКЗОМЕТАБОЛИТОВ В ПРОЦЕССЕ ФОРМИРОВАНИЯ И ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ СОЕВО-РИЗОБИАЛЬНОГО СИМБИОЗА

    КИРИЧЕНКО Е.В., КОЦЬ С.Я., ТИТОВА Л.В. — 2004 г.

    Исследовано влияние различного инокулята специфичного для сои штамма клубеньковых бактерий Bradyrhizobium japonicum 6346 (клетки неотмытые, отмытые от экзогликан-белкового комплекса и в композиции с ним) на формирование и функционирование соево-ризобиального симбиоза. Показано, что добавление к штамму экзополисахарид-белкового комплекса вдвое увеличивало способность микросимбионта к образованию клубеньков, массу клубеньков и их нитрогеназную активность. Клетки B. japonicum 6346, отмытые от экзометаболитов, характеризовались сниженными показателями симбиотической активности по сравнению с исходными.

  • СВЯЗЫВАНИЕ КОМПОНЕНТОВ СМЕСИ ЛЕТУЧИХ ОРГАНИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ ИЗ ВОДНЫХ РАСТВОРОВ КУКУРУЗНЫМ КРАХМАЛОМ

    КАЛИНЧЕНКО М.А., МИШАРИНА Т.А., САМУСЕНКО А.Л. — 2004 г.

    Методом капиллярной газовой хроматографии изучено влияние состава смеси органических веществ на степень связывания отдельных компонентов в водных дисперсиях нативных и желатинизированных кукурузных крахмалов с различным содержанием амилозы. Установлено, что степень связывания из смеси спиртов была больше, чем индивидуальных соединений. Для многокомпонентной смеси соединений различных классов обнаружена конкуренция за места связывания. Состав смеси и природа крахмала в меньшей степени влияли на связывание одорантов в водных дисперсиях нативных крахмалов по сравнению с желатинизированными.

  • СЕКРЕТИРУЕМАЯ N-АЦЕТИЛ-Β-D-ГЕКСОЗАМИНИДАЗА МОРСКОГО ГРИБА PHOMA GLOMERATA

    ЖУРАВЛЁВА Н.В., ЛУКЬЯНОВ П.А., ПИВКИН М.В. — 2004 г.

    Из 10 штаммов морских грибов отобран перспективный продуцент N-ацетил-β-D-глюкозаминидазы мицелиальный гриб Phoma glomerata. Подобраны условия выращивания штамма и биосинтеза фермента. Из культуральной жидкости Phoma glomerata с помощью ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе, DEAE-Sephacell и гель-фильтрации на Toyopearl HW-55 выделена N-ацетил-β-D-гексозаминидаза с выходом 35% и степенью очистки 36.4 раза и молекулярной массой 20 кДа. Фермент гомогенен по данным гель-фильтрации и электрофореза с ДДС-Na. Фермент катализировал реакцию трансгликозилирования, выход синтезируемых с его помощью N-ацетил-D-глюкозамина и N-ацетил-D-галактозамина 38 и 46% соответственно.

  • ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ОПТИМИЗАЦИИ РЕЖИМОВ ПОСЛЕУБОРЧНОЙ ОБРАБОТКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ, СИНТЕЗИРУЮЩИХ АЛКАЛОИДЫ

    БУЗУК Г.Н., ЛОВКОВА М.Я., СОКОЛОВА С.М. — 2004 г.

    Методом дисков в сочетании с ТСХ и спектрофотометрией проведена сравнительная оценка различных способов фиксации и ферментации лекарственных растений (листья). Использованы виды, синтезирующие алкалоиды различных структурных типов - изохинолина, в числе которых бензофенантридины, бисбензилизохинолины, четвертичные протоберберины, апорфины, а также стероидные и дитерпеновые алкалоиды. Выявлены существенные различия в количественном содержании и качественном составе алкалоидов в зависимости от применения тех или иных способов фиксации и ферментации. Установлено, что возникающие при этом различия отражают совокупность трех независимых и в значительной мере разнонаправленных процессов: катаболизма алкалоидов, их взаимопревращения друг в друга и ресинтез за счет первичных предшественников. Воздействуя на перечисленные процессы путем их активации или ингибирования, используя с этой целью различные методы фиксации и ферментации, возможна целенаправленная коррекция алкалоидного комплекса исследованных растений.

  • ТРАНСФОРМАЦИЯ АНДРОСТЕНДИОНА И АНДРОСТАДИЕНДИОНА БАКТЕРИЯМИ, ДЕГРАДИРУЮЩИМИ СТЕРИНЫ

    АНДРЮШИНА В.А., ВОЙШВИЛЛО Н.Е., САВИНОВА Т.С., СТЫЦЕНКО Т.С. — 2004 г.

    Изучен состав стероидных метаболитов, образующихся при трансформации андростендиона и андростадиендиона - продуктов микробиологического расщепления боковой цепи стеринов - почвенными и мутантным штаммами бактерий Mycobacterium и Protaminobacter. Установлено, что среди продуктов трансформации отсутствует тестололактон. Его отсутствие свидетельствует в пользу предположения о различных путях расщепления стероидного кольца D бактериями и грибами. При трансформации андростендиона почвенными штаммами выделены в очень незначительном количестве два новых 14а-гидроксипродукта с расщепленным кольцом В. Показано, что мутантный штамм Mycobacterium smegmatis, также как дикие штаммы, способен к 14α-гидроксилированию стероидной молекулы. Предполагается, что расщепление стероидного ядра со стороны колец D и С начинается с введения 14а-гидроксигруппы и последующей дегидратации.

  • УГЛЕВОДЫ ГЛУБИННОГО МИЦЕЛИЯ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ

    БАБИЦКАЯ В.Г., ЩЕРБА В.В. — 2004 г.

    Установлено, что общее содержание углеводов в глубинном мицелии ксилотрофных базидиомицетов находилось в пределах 34.66-57.57%. Свободные углеводы цитозоля клетки составляли 14.5228.64%, структурные - 20.14-32.70%. Изучен качественный состав углеводов, что позволило отнести структурные полисахариды к гетеро- и гомоглюканам с β- и α-гликозидным типом связей.

  • ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И СТРУКТУРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ БЕЛКОВО-ЛИПИДНЫХ КОМПОЗИТОВ ПОВЫШЕННОЙ ПИЩЕВОЙ ЦЕННОСТИ

    АРАБОВА Л.И., КОЛПАКОВА В.В., МАРТЫНОВА И.В., ЧУМИКИНА Л.В. — 2004 г.

    Методами растворимости и электрофореза исследован фракционный и компонентный состав белково-липидных композитов повышенной пищевой ценности в сравнении с белковыми препаратами, с использованием которых они приготовлены. Показаны различия во фракционном составе белков, количестве водородных, ионных и гидрофобных связей. Установлено, что в процессе изготовления композитов с соевой мукой и мукой из пшеничных отрубей изменениям подвергались водо-, соле- и щелочерастворимая фракции белков, а с белковым концентратом из отрубей - водо- и щелочерастворимые. Выявлена гетерогенность компонентного состава и конформационные особенности структуры белков композитов, обусловленные участием дисульфидных связей. Показано, что при изготовлении композитов белки соевой муки агрегировали при участии дисульфидных связей, а белковых продуктов из пшеничных отрубей - дезагрегировали. Дезагрегация сопровождалась разрывом межцепочечных (мука) или внутрицепочечных (концентрат) дисульфидных связей. В целом, свойства и особенности структуры белково-липидных композитов зависели от природы белка (соевые или пшеничные), вида исходных препаратов (мука или концентрат) и особенностей их приготовления (эмульгирование и сушка).

  • ФОРМИРОВАНИЕ КОМПЛЕКСОВ ДНК С АКТИНОМИЦИНАМИ В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ И ПЛЕНКАХ

    ВЕКШИН Н.Л., САВИНЦЕВ И.В. — 2004 г.

    Изучен механизм взаимодействия ДНК с актиномицином D (AMD), 7-амино-актиномицином D (7-AAMD), а также этидием бромидом (EtBr) в водных растворах и конденсированном состоянии в пленках на пластинах. Использование методов абсорбционной (в УФ-, ИК- и видимой области) и флуоресцентной спектроскопии (стационарной, поляризационной и фазово-модуляционной) показало, что образование комплекса 7-AAMD с ДНК в растворе не сопровождалось переносом энергии с фотовозбужденных нуклеотидов на фенаксозоновый хромофор антибиотика и встраивание лиганда происходило не по типу стэкинга. В пленке комплекса ДНК-7-AAMD, моделирующей нативное состояние в клетке, наблюдалась высокая эффективность переноса энергии, что свидетельствовало об интеркаляции актиномицина в ДНК по стэкинговому типу. В больших концентрациях 7-AAMD в пленке индуцировал денатурацию ДНК, нарушая двуспиральную структуру. В комплексе с AMD молекула ДНК сохранялась в нативной В-форме как в пленках, так и в растворе.

  • ФОТОСИНТЕЗ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ ПРИ НАРАСТАЮЩЕМ ДЕФИЦИТЕ ВОДЫ В ПОЧВЕ И ПРОТЕКТОРНОЕ ВЛИЯНИЕ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНОГО СПИРТА

    БИЛЬ К.Я., КОСОБРЮХОВ А.А., НИШИО ДЖ. Н. — 2004 г.

    Исследовали газообмен СO 2, транспирацию, устьичную проводимость и эффективность использования воды у опрыснутых 40%-ным метанолом листьев сахарной свеклы (Beta vulgaris var. saccharifera (Alef) Krass) на фоне нарастающего дефицита воды в почве. Показано, что у опытных растений снижение отрицательного действия недостатка воды связано с более высокими стресс-устойчивостью фотосинтетического аппарата, скоростью фотосинтеза и эффективностью использования воды.

  • ХИТИНОЛИТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ МИЦЕЛИАЛЬНЫХ ГРИБОВ

    КУЧЕРЯВЫХ П.С., ШУБАКОВ А.А. — 2004 г.

    Исследована хитинолитическая активность 9 видов мицелиальных грибов, принадлежащих к 7 родам: Aspergillus, Penicillium, Trichoderma, Paecilomyces, Sporotrichum, Beauveria и Mucor. Показано, что все они при культивировании в жидкой среде с кристаллическим хитином (1%) образуют внеклеточные хитиназы с активностью от 0.2 ед./мг белка (Sporotrichum olivaceum, Mucor sp.) до 4.0- 4.2 ед./мг белка (Trichoderma lignorum, Aspergillus niger).

  • ШТАММ COMAMONAS TESTOSTERONI TI КАК ПОТЕНЦИАЛЬНАЯ ОСНОВА КЛЕТОЧНОГО СЕНСОРА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

    ВИНТЕР-НИЛЬСЕН М., ИВАЩЕНКО Г.В., РЕШЕТИЛОВ А.Н., ТАРАНОВА Л.А., ФЕСАЙ А.П., ЭМНЕУС Д. — 2004 г.

    Исследована модель клеточного биосенсора на основе штамма Comamonas testosteroni TI, деструктора неионогенного поверхностно-активного вещества (НПАВ) - нонилфенолэтоксилата (ОП-10). Нижний предел обнаружения для биосенсора по отношению к НПАВ составил 0.25 мг/л. Исследована субстратная специфичность биосенсора по отношению к широкому спектру органических соединении - поверхностно-активных веществ (ПАВ), полиароматических углеводородов (ПАУ), углеводов, спиртов и других соединении. Показано, что биосенсор на основе штамма Comamonas testosteroni TI характеризовался отсутствием сигнала на глюкозу, что является преимуществом по сравнению с ранее описанным биосенсором на основе штамма Pseudomonas rathonis T. Величина сигнала сенсора оставалась стабильной на протяжении 10 сут.