ОНТОГЕНЕЗ, 2004, том 35, № 6, с. 466-468
= ХРОНИКА =
КОНФЕРЕНЦИЯ ЕВРОПЕЙСКОЙ РАБОЧЕЙ ГРУППЫ ПО ИЗУЧЕНИЮ
КЛЕТОЧНОЙ ПРОЛИФЕРАЦИИ
Очередная 26-я встреча Европейской рабочей группы по изучению клеточной пролиферации проходила с 13 по 16 мая 2004 г. в Праге. Организаторами с чешской стороны являлись Институт молекулярной генетики Чешской академии наук и Интерконгресс. Председателем организационного комитета был Ян Ковач.
Программа симпозиума включала доклады по следующим разделам: передача сигналов и контроль экспрессии генов, апоптоз, канцерогенез, контроль пролиферации, контроль клеточного цикла, стволовые клетки, контроль дифференци-ровки, экспериментальные и теоретические модели, клиническое применение, а также стендовые сообщения.
В работе конференции приняли участие около 100 ученых из Англии, Италии, Чехии, Франции, Польши, Дании, России, Германии, Швеции, Югославии.
Вступительная речь председателя Европейской рабочей группы M.R. Alison (Лондонский императорский колледж, Англия) была посвящена истории группы, организованной в конце 60-х гг. XX века по инициативе специалистов в области изучения клеточной пролиферации из Англии, Италии и Советского Союза. Группа издает собственный журнал "Cell Proliferation", главным редактором которого долгое время был известный исследователь в области пролиферации эпителия C.S. Potten.
Первая сессия конференции была посвящена вопросам передачи сигнала и контроля экспрессии генов. Два доклада авторов из Франции затронули проблему ацетилирования гистонов как возможного механизма регуляции структуры хроматина и экспрессии генов. Известно, что устойчивые к лекарствам линии опухолевых клеток имеют более рыхлую организацию хроматина, чем неустойчивые к терапии клетки. Однако биологические механизмы, лежащие в основе этого феномена, мало изучены. Авторы изучили уровень ацетилирования гистона H4 и методом хроматиновой иммунопреципитации выяснили, что в линиях карцином с лекарственной устойчивостью уровень ацетилирования гистона существенно выше в области промотора известного гена лекарственной устойчивости mdrl. В то же время в линиях, чувствительных к винкристину и этопо-зиду, этого не наблюдалось. Следует отметить,
что общий уровень ацетилирования гистона H4 в ядерных экстрактах изученных линий не коррелировал с наличием лекарственной устойчивости.
Доклад группы ученых из Чехии, представленный V. Boudny, касался изучения активации транскрипционного фактора STAT1 в ответ на обработку интерферонами а и у в культурах ме-ланом, полученных из биопсийного материала от 41 пациента, и в 21 линии меланом. Известно, что активация STAT1, его связывание с ДНК и транскрипционная активность требуют фосфорилиро-вания по позициям Tyr701 и Ser727. Исследования показали, что в 2/3 линий меланом отсутствует фосфорилирование Ser727 после обработки интерфероном. Менее выраженным оказался дефект фосфорилирования по второму положению. Клетки от более 75% пациентов также имели дефект фосфорилирования по позиции Ser727, однако фосфорилирование по второй позиции отсутствовало у 70% пациентов после обработки интерфероном а и у 30% - после обработки интерфероном у. Полученные данные свидетельствуют о том, что в клетках меланом существуют дефекты активации STAT1 в ответ на обработку интерферонами. Однако результаты, получаемые с использованием постоянных линий, не всегда коррелируют с ситуацией in vivo.
Кроме этого, были представлены сообщения относительно участия белка JIP-1 в сигнальном пути IGF II и определения уровня экспрессии генов в фибробластах, культивированных в трехмерном коллагеновом матриксе. В последней работе, представленной C.E. Saraff (Вестминстерский университет, Англия), культивирование проводили в специальных биореакторах, и колла-геновые пленки с фибробрастами были подсоединены к датчикам, позволяющим фиксировать силу натяжения, которую развивают клетки в процессе контракции коллагенового геля, а также к прибору, с помощью которого можно прикладывать к коллагеновым пленкам с фибробластами определенное усилие. Данная система позволила авторам с помощью метода ДНК микрочипов определить уровень экспрессии генов в контрольных клетках и в фибробластах, подвергшихся нескольким циклам натяжения.
На сессии, посвященной проблеме апоптоза, ключевая лекция была прочитана Б. Животов-ским из Каролинского института (Швеция). Глав-
КОНФЕРЕНЦИЯ ЕВРОПЕЙСКОЙ РАБОЧЕЙ ГРУППЫ
467
ная мысль его лекции заключалась в том, что процесс апоптоза требует скоординированного участия в нем всех органелл клетки, в частности митохондрий, которые, с одной стороны, поддерживают необходимый для процессов апоптоза уровень энергии, а с другой - высвобождают ряд митохондриальных белков, запускающих каскад каспаз и участвующих в деградации ядерного материала.
Традиционно Европейская рабочая группа по изучению клеточной пролиферации активно участвует в исследованиях, в том числе клинических, по механизмам канцерогенеза, экспрессии опухолевых маркеров, закономерностям опухолевого роста, новым подходам к лечению онкологических заболеваний. Значительная часть докладов на симпозиумах группы всегда посвящена этим проблемам. Поэтому закономерно, что следующая сессия носила название "Канцерогенез" и включала доклады, представляющие результаты исследований различных аспектов биологии рака. В частности, группа ученых из Италии (S. Stra-no) представила данные о взаимодействии му-тантных форм белка р53 с другим недавно открытым белком из этого семейства р63. При этом некоторые из мутантных форм были способны инактивировать ингибирующую клеточный рост активность р63. Таким образом, инактивация белков из семейства р53 мутантными формами этого белка может быть еще одним механизмом биологического действия р53-мутаций в канцерогенезе и давать преимущество в росте опухолевым клеткам. Проблему экспрессии р53 и его сплайс-вариантов в опухолевых тканях затронул в своем сообщении Z.T. Milicevic (Институт исследований ядра, Сербия). Белок теломеразы hTERT, теломеразную активность и пролифера-тивный индекс по Ki-67 в биопсиях опухолей мозга изучали в работе, представленной L.M.T. Maes. При получении культур из биопсийного материала было замечено, что высокая теломеразная активность в большинстве случаев присуща клеткам тех пациентов, у которых впоследствии развивались рецидивы.
Научная программа второго дня симпозиума состояла из двух сессий, касающихся проблем контроля пролиферации и клеточного цикла. Ключевая лекция J. Gerdes (Исследовательский центр, Германия) называлась "Известное и неизвестное о белке Ki-67" и освещала современное состояние знаний об этом белке, открывателем которого является автор лекции. В настоящее время Ki-67 является "золотым стандартом" при изучении пролиферативной активности клеток в экспериментальных работах и в онкологии. Индекс мечения биопсий опухолей антителами к Ki-67 имеет прямую связь со степенью злокачественности опухоли. Антитела к этому белку были получены случайно при исследовании панели антител к не-
ходжкинским лимфомам. Было показано, что этот ядерный белок экспрессируется только в клетках, находящихся в пролиферативном цикле. Данные по мечению антителами к Ki-67 хорошо коррелируют с данными по меченому тимидину, который ранее чаще всего использовался при изучении пролиферативного статуса клеточных популяций. В настоящее время в лаборатории J.Gerdes получены новые поколения антител к Ki-67 с различными сайтами связывания. Кроме того, получены антитела к аналогу Ki-67 у грызунов, что чрезвычайно важно для проведения экспериментальных работ. Несмотря на то что известна структура гена Ki-67, его функция остается практически полностью не изученной. Автор представил данные, которые позволяют говорить о том, что Ki-67 физически ассоциирован с комплексом рибосомальных генов и может играть определенную роль в генерации рибосом. Кроме этого, было показано, что Ki-67 также ассоциируется с белком HP1 (heterochromatin protein 1) и может участвовать в компактизации хроматина. Еще одно перспективное направление исследований - использование биологических свойств Ki-67 в лечении опухолей.
На этой сессии был также представлен доклад группы R.P. Revoltella (Институт биомедицинских технологий, Италия) по селективному выращиванию базальных/стволовых клеток эпителия простаты в трехмерной коллагеновой губке. Маркером стволовых/прогениторных клеток эпителия простаты авторы считают р63.
Третий день работы конференции был посвящен проблемам стволовых клеток, контролю дифференцировки, использованию математических моделей в биологии и медицинским аспектам исследований. В ключевой лекции M.R. Alison акцент был сделан на возможности использования стволовых клеток взрослого организма в клеточной терапии. Данные последних лет свидетельствуют о том, что этот тип стволовых клеток, присутствующий практически во всех тканях взрослого организма, обладает, вероятно, более высоким потенциалом, чем это предполагалось ранее. И, хотя некоторые примеры пластичности связаны, вероятно, со слиянием стволовых и дифференцированных клеток, во многих случаях использование взрослых стволовых клеток остается единственно возможным вариантом клеточной терапии. Кроме этого, изучение биологии взрослых стволовых клеток важно с точки зрения их участия в канцерогенезе и в развитии генетически обусловленных заболеваний. Другому виду стволовых клеток, а именно эмбриональным стволовым клеткам, была посвящена лекция профессора R.P. Revoltella. Направленная дифферен-цировка эмбриональных стволовых клеток остается в настоящее время актуальной проблемой. При совместном культивировании эмбриональ-
ОНТОГЕНЕЗ том 35 < 6 2004
5*
468
ВОРОТЕЛЯК
ных стволовых клеток приматов и фибробластов или кератиноцитов в трехмерном коллагеновом матриксе возможно до некоторой степени управлять процессами дифференцировки и получать клетки того или иного типа. Вероятно, совместное культивирование с определенными типами клеток в трехмерной системе является перспективным для дальнейшего изучения управляемой дифференцировки эмбриональных стволовых клеток.
На конференци
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.