Тематический выпуск «Российский научный форум на Урале»
705
МЕХАНИЗМ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ
ПЕПТИДА GLU-TRP
Малинин В. В.1, Фаустова Н.М.2, Пожарицкая О.Н.2
'ЗАО «Медико-биологический научно-производственный комплекс «Цитомед»;
2ЗАО Институт экспериментальной фармакологии, Санкт-Петербург, Россия
Целью исследования являлся анализ взаимодействия пептида Glu-Trp с ферментами каскада арахидоновой кислоты циклооксигеназой-1 и 2 (ЦОГ1/2). Ферменты ЦОГ1/2 катализируют реакции оксигенации полиненасыщенных жирных кислот, главным образом арахидоновой кислоты, с образованием класса липидных соединений простаноидов, ответственных за инициацию, пролонгацию и завершение воспалительного процесса. Установлено, что пептид Glu-Trp является неспецифическим ингибитором двух изоформ ци-клооксигеназы.
Ключевые слова: дипептид, циклооксигеназа, воспаление
Изучение механизмов действия противовоспалительных средств пептидной природы является актуальной задачей современной фармакологии. На сегодняшний день охарактеризована большая группа полипептидов (до 100 аминокислотных остатков), которые обладают широким спектром биологических свойств, в том числе антимикробным, иммуномодулирующим и противовоспалительным действием [1].
Ранее показано выраженное иммуномоду-лирующее, анальгетическое и противовоспалительное действие синтетического аналога пептидного гормона тимулина [2, 3, 4]. Противовоспалительные свойства пептида Glu-Trp (тимогена) установлены при лечении больных с различными иммунопатологическими состояниями [5]. Одним из возможных механизмов противовоспалительного действия пептида Glu-Trp может быть снижение синтеза про-стагландинов и лейкотриенов [6].
Простагландины образуются из арахидоновой кислоты под действием ферментов ци-клооксигеназы 1 и 2 (ЦОГ1 и ЦОГ2), обладают широким биологическим действием, участвуют в нормальном гомеостазе, являются ключевыми медиаторами в развитии воспалительного процесса. Ферменты ЦОГ1 и ЦОГ2 являются перспективными мишенями для поиска новых противовоспалительных средств.
Целью работы явилась оценка влияния пептида Glu-Trp на энзиматическую активность двух изоформ циклооксигеназы.
Исследование влияния пептида Glu-Trp на энзиматическую активность ЦОГ1 и ЦОГ2 проводили с использованием тест-системы «COX inhibitory screening assay kit» (Cayman Chemicals, США). В отношении ЦОГ1 пептид Glu-Trp изучали в концентрациях мг/мл, в отношении ЦОГ2 в концентрациях мкг/мл. В качестве позитивного контроля для ЦОГ1 использовали селективный ингибитор SC-560, для ЦОГ2 использовали неселективный ингибитор индометацин. Количество высвободившегося простагландина F2a определяли методом иммуноферментного анализа на планшетном спектрофотометре xMark (BioRad, США).
Установлено, что пептид Glu-Trp дозоза-висимо ингибировал активность фермента ЦОГ2, но при этом полного ингибирования фермента достигнуто не было. Кривая имела сигмоидный вид с выходом на плато. Рассчитанная концентрация IC50 для пептида Glu-Trp составила 1,15 мкМ. Полученное значение IC50 для дипептида в 2 раза выше, чем значение, полученное для индометацина в концентрации 0,69 мкМ.
Раствор пептида Glu-Trp с концентрацией 5 мкг/мл ингибировал действие фермента ЦОГ-1 в среднем на 26%. При сравнении инги-бирующей активности в отношении фермента ЦОГ-2 (52±5%) и ЦОГ-1 (26±8%), полученных для раствора дипептида с концентрацией 5 мкг/мл, можно сделать предположение о не-
706
Иммунофармакология
высокой селективности данного препарата в отношении ЦОГ-2. Таким образом, пептид Glu-Trp является неспецифическим ингибитором двух изоформ циклооксигеназы.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Уракова И. Н. и др. Биология моря 2012, 38, 6, 421-427.
2. Safieh-Garabedian B., Dardenne M., Pleau J. M., Saade N. E. Br. J. Pharmacol. 2002, 136, 947-955.
3. Lunin S. M., Khrenov M. O., Novoselova T. V., et al. Immunological Investigations 2008, 37, 8, 858-870.
4. Babizhayev M. A., Semiletov Y. A., Lul'kin Y.A., et al. Clinical and Experimental Immunology 2005, 139, 447-457.
5. Клиническая фармакология тимогена, Под ред. В. С. Смирнова. СПб: ФАРМиндекс, 2004, 172 с.
6. Малинин В. В., Смирнов В. С. Вестн. урал. мед. академической науки 2012, 41, 4, 50-51.
ANTI-INFLAMMATORY MECHANISM OF PEPTIDE GLU-TRP Malinin V. V.1, Faustova N. M.2, Pozharitskaya O. N.2
'Medical-Biological Research-Industrial Complex CYTOMED; 2Institute of Experimental Pharmacology,
St. Petersburg, Russia
The aim of the study was to evaluate the interaction between the peptide Glu-Trp with arachidonic acid cascade enzymes cyclooxygenase 1 and 2 (COX1/2). Enzymes COX1/2 catalyzed the reaction oxygenation of polyunsaturated fatty acids, mainly arachidonic acid, to form a class of lipid compounds prostanoids are responsible for initiation and completion of the prolongation of the inflammatory process. It was established that the peptide Glu-Trp is nonspecific inhibitor of the two isoforms cyclooxygenase.
Key words: dipeptide, cyclooxygenase, inflammation
НОВЫЕ ТЕНДЕНЦИИ В АНТИЦИТОКИНОВОЙ ТЕРАПИИ
Ефимов Г. А.1, Круглов А.А.2,3, Шварев Д. С.1,4, Друцкая М.С.1,4,
Недоспасов С. А.1,2,3,4
'Лаборатория молекулярных механизмов иммунитета, ФГБУН Институт молекулярной биологии им. В. А. Энгельгардта РАН, Москва; 2Лаборатория экспериментальной иммунологии, НИИ молекулярной биологии и региональной
экологии, ФГАОУ ВП «Нижегородский государственный университет им. Н. И. Лобачевского», Нижний Новгород; 3Отдел молекулярной иммунологии, НИИ Физико-химической биологии им А. Н. Белозерского, ФГБОУ ВПО МГУ им. М. В. Ломоносова, Москва; 4Кафедра иммунологии, Биологический факультет, ФГБОУ ВПО МГУ им. М. В. Ломоносова, Москва, Россия
Многие цитокины - белковые медиаторы физиологических процессов, в т.ч. иммунитета и других защитных процессов - отобраны эволюцией и имеют уникальные, невырожденные, функции. Настоящий прорыв в медицине произвела концепция антицитокино-вой терапии, которая основана на терапевтическом блокировании одного-единственного цитокина, такого как TNF, IL-1 или IL-6. К сожалению, в силу невырожденности свойств индивидуальных цитокинов, такая терапия принципиально не может быть свободна от побочных нежелательных эффектов. Поэтому в последнее время разрабатываются идеи более тонкого блокирования функций цитокинов, при котором нейтрализуются «патогенные» последствия их повышенной экспрессии, но сохраняется определенный уровень полезного, протективного сигнала, передаваемого тем же цитокином. Эти концепции кратко рассматриваются в настоящем мини-обзоре.
Ключевые слова: цитокины, TNF, IL-6, IL-1, аутоиммунные заболевания, воспаление, ан-тицитокиновая терапия
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.