ЖУРНАЛ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ХИМИИ, 2007, том 62, № 11, с. 1192-1196
^=ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
УДК 543.544
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРИМЕСЕЙ В ТАБЛЕТКАХ "ВАЛИДОЛ" МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
© 2007 г. Г. Б. Голубицкий*, Е. М. Басова**, В. М. Иванов***
*ОАО "Фармстандарт-Лексредства" 305039 Курск, ул. 2-я Агрегатная, 1а/18 ** Международный университет природы, общества и человека "Дубна" 141980 Московская обл., Дубна, ул. Университетская, 19 *** Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, химический факультет
119992 Москва, Ленинские горы Поступила в редакцию 22.06.2006 г., после доработки 19.08.2006 г.
Разработана методика определения примесей в таблетках "Валидол" методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ). При анализе модельных смесей, содержащих действующие и все вспомогательные вещества таблеток, подтверждена достоверность получаемых результатов. Предложенная методика включена в нормативную документацию на выпускаемые таблетки.
Наличие примесей в таблетках "Валидол", обусловленное технологией синтеза субстанции валидола, неизбежно, поэтому серийный контроль продукции по этому показателю очень важен для обеспечения качества.
При синтезе одного из основных компонентов субстанции валидола (В) - ментилового эфира изовалериановой кислоты (МЭИВК) в качестве катализатора реакции
НзС
О-С-СН2-
СН3
-СН
СН3
МЭИВК
этерификации используют конц. Н28О4. Согласно исследованиям разработчиков технологии, в этих условиях образуется ряд побочных веществ, в том числе смесь изомерных продуктов деструкции ментола (М) - ментонов (МН):
СН
НзС
ОН
СНз
НзС
М
СНз СНз
Л ж
Г 1 + С1
V ч V
^СН^ ^СН
СНз НзС " СНз
МН-1 МН-2
Эти и другие побочные вещества, в отличие от М и МЭИВК, не обладают полезными фармакологическими свойствами и являются нежелатель-
ными примесями в готовом продукте, поэтому важно достоверно определять их для обеспечения качества как субстанции валидола, так и таблеток на ее основе.
Разработка методики анализа таблеток "Валидол" по показателю "Посторонние примеси" и определение ее метрологических характеристик -цель настоящей работы.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Реагенты. Для приготовления растворов использовали валидол и ментол фармацевтического качества, проверенные отделом качества предприятия и соответствующие всем требованиям нормативной документации (НД), и диэтиловый эфир "для наркоза". Стандартный образец МЭИВК получали в лаборатории ректификацией валидола. Его чистоту (99.9%) подтверждали методом ГЖХ. Все остальные реактивы имели квалификацию не ниже ч.д.а.
Аппаратура. Использовали газовый хроматограф "Кристалл 2000М" (СКБ "Хроматэк", Россия) с пламенно-ионизационным детектором (ПИД-1) и капиллярную колонку из плавленого кварца (50 м х 0.3 мм) с неподвижной жидкой фазой 0У-101. Температуру колонки по ходу анализа повышали от 100 до 240°С со скоростью подъема 5°С/мин; общая продолжительность анализа 35 мин, температура испарителя и детектора 250°С. Газ-носитель - азот с расходом 20 мл/мин и делением потока 1 : 20. Расходы водорода и воздуха 20 мл/мин и 200 мл/мин соответственно. Объем пробы 1.0 мкл.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРИМЕСЕЙ В ТАБЛЕТКАХ "ВАЛИДОЛ" 1193
Рис. 1. Хроматограмма модельной смеси примесей.
Приготовление модельной смеси примесей. В
стакане емк. 100 мл в течение 10 мин смешивали 30 мл конц. Ы2804 и 5 г ментола. Полученную смесь оранжевого цвета переливали в стакан емк. 150 мл с 20 г льда, перемешивали до полного таяния льда и затем еще 5 мин. После отстаивания в течение 10 мин верхний органический слой зеленого цвета (около 3 мл) сливали в стакан емк. 50 мл с 20 мл воды. В полученную двухфазную систему добавляли при перемешивании небольшими порциями гранулированный №ОН и проверяли реакцию органического слоя по индикаторной бумаге после добавления каждой порции щелочи. По достижении нейтральной реакции нижний водный слой удаляли пипеткой, а оставшийся органический осушали безв. №2804. Получали около 2.0 мл маслянистой желтовато-коричневой жидкости. Хроматограмма полученной смеси представлена на рис. 1.
Приготовление тест-растворов для подтверждения достоверности результатов. Правильность методики определения примесей в таблетках "Валидол 0.06 г" проверяли на модельных растворах, содержащих валидол, примеси и вспомогательные компоненты таблеток в количествах, в которых они могли быть извлечены эфиром в испытуемый раствор. Модельные растворы готовили из расчета на 150 таблеток (120 г). Полученную смесь переносили в коническую колбу емк. 0.75 л, добавляли 200 мл эфира и встряхивали 15 мин. После отстаивания фильтровали полученный раствор в коническую колбу емк. 500 мл через бумажный фильтр "красная лента" и выпаривали растворитель на водяной бане при 50-
60°С до объема 6-7 мл (практически полное удаление эфира).
К точным навескам полученного валидола добавляли точные навески примесей в интервале от 2.0 до 15.0 мас. %, что соответствовало интервалу от 0.7 до 5.4%, определенному по хроматограмме. Было приготовлено 17 тест-растворов, для каждого из которых получено по 3 хроматограммы.
Приготовление испытуемого раствора таблеток. В коническую колбу емк. 250 мл с притертой пробкой помещали 6.0 г тщательно растертых таблеток, добавляли 50 мл эфира и встряхивали 15 мин. Полученную суспензию фильтровали через бумажный фильтр "красная лента" в коническую колбу емк. 100 мл. Фильтрат упаривали на водяной бане при 50-60°С до объема около 1 мл.
Расчет результатов. Содержание посторонних примесей в таблетках (%) рассчитывали методом внутренней нормализации [1, 2] по формуле:
X = (Е^бщ - ^валУ^общ X 100%, (1)
где Е£общ - сумма площадей всех пиков на хроматограмме, за исключением площадей пиков эфира и его примесей (примерно 1.5 мин после выхода пика эфира), мВ с; £вал - сумма площадей пиков М и МЭИВК на хроматограмме, мВ с.
Содержание примесей не должно превышать 4.0%.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Определение коэффициента отклика детектора по отношению к массовой концентрации примесей. Было предположено, что процентное содержание примесей в валидоле по методу внутрен-
Таблица 1. Расчет коэффициента отклика детектора по отношению к массовой концентрации примесей
№ п/п Наименование пробы Хввед, мас. % ^общ, мВ с ^вал, мВ с ^прим, мВ с Х, % Х - Хисх, % Коткл
1 Валидол 0 432900 428600 4300 0.993
0 519860 514610 5250 1.010
0 460760 456110 4650 1.009
2 Та же 0 560640 554730 5910 1.054
0 569110 562790 6320 1.111
0 615400 608760 6640 1.079
0 652330 644800 7530 1.154
3 » 0 537280 531 240 6040 1.124
0 575460 568880 6580 1.143
0 651330 644800 6530 1.003
4 » 0 536490 531 240 5250 0.979
0 574550 568880 5670 0.987
5 Валидол + примеси 7.594 564760 542980 21780 3.857 2.803 0.369
7.594 492860 473240 19620 3.981 2.927 0.385
7.594 461190 443430 17760 3.851 2.797 0.368
6 Та же 10.838 432140 411330 20810 4.816 3.762 0.347
10.838 429700 408440 21260 4.948 3.894 0.359
10.838 597330 568020 29310 4.907 3.853 0.356
7 » 3.971 561210 547830 13380 2.384 1.330 0.335
3.971 539680 527180 12500 2.316 1.262 0.318
3.971 504010 492365 11645 2.310 1.257 0.316
8 » 1.880 515400 506780 8620 1.672 0.619 0.329
1.880 533400 524370 9030 1.693 0.639 0.340
1.880 457590 450110 7480 1.635 0.581 0.309
Среднее 0.344
S 0.024
ней нормализации пропорционально массовой процентной концентрации этих примесей в валидоле, но не равно ей. Для определения коэффициента пропорциональности проанализировали 4 образца субстанции валидол, используемой в производстве таблеток, и 4 модельных раствора, приготовленных смешением точных навесок валидола и синтезированных примесей. Для каждой пробы получено по 3 хроматограммы. Коэффициент отклика (-Коткл) рассчитывали по формуле:
^откл = (Х — Хисх)/Хввед, (2)
где X - содержание примесей в субстанции валидол с добавкой примесей (в %) по хроматограмме; Хисх - содержание примесей в исходной субстан-
ции валидол (в %) по хроматограмме; Хввед - количество введенных в субстанцию валидол примесей (в мас. %).
Результаты представлены в табл. 1. Среднее значение ^откл из всех результатов равно 0.344. Сходимость результатов удовлетворительная (яг = = 0.065). Значение ^откл использовали для расчета относительной погрешности определения примесей в тест-растворах по методу "введено - найдено". В методику, предназначенную для серийного контроля, эту величину не ввели для упрощения анализа. Это допустимо, поскольку для обеспечения качества продукции важна не сама концентрация примесей, а гарантия, что она не превышает установленный в НД уровень.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРИМЕСЕИ В ТАБЛЕТКАХ "ВАЛИДОЛ"
1195
Т, усл. ед.
(а)
t, мин
Т, усл. ед.
(б)
t, мин
Рис. 2. Хроматограмма испытуемого раствора для количественного анализа таблеток "Валидол" (а, б - разные партии).
Метрологические характеристики методики
определяли при анализе тест-растворов, содержащих субстанцию валидол, все вспомогательные вещества таблеток, экстрагируемые диэтиловым эфиром, и точные навески добавленных примесей. Получены следующие результаты: 5тах =
= 0.193%, 5 тах = 0.0372.
Среднее значение относительной погрешности анализа егср = -0.361% меньше соответствующего доверительного интервала ег = 0.745%, следовательно, методика не имеет систематической погрешности.
Пределы обнаружения и определения методики. С помощью программы обработки данных рассчитан уровень шумов базовой линии на участке хроматограммы испытуемого раствора, свободном от пиков. Получено значение N = = 3.62 х 10-4 В. Эта величина Р составляет 0.002% от высоты пика МЭИВК, поэтому в качестве теоретических пределов обнаружения и определения могут быть приняты значения соответственно 3Р = 0.006% и 10Р = 0.02%. При анализе фактически полученных хроматограмм установлено, что надежно детектируются пики с высотой не менее 0.01 В, что составляет 0.06% от высоты пика МЭИВК. Эту величину можно
Таблица 2. Результаты определения примесей в таблетках "Валидол" (%; п = 9; Р = 0.95; норма по НД не более 4%)
Номера образцов —ср 5 SY Хср А-ср £, %
1 1.07 0.01 0.0033 0.0078 0.73
2 1.04 0.04
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.