ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
УДК 543.426:546.65:615.07
ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЯДА НЕСТЕРОИДНЫХ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ С ПРИМЕНЕНИЕМ СЕНСИБИЛИЗИРОВАННОЙ ЛЮМИНЕСЦЕНЦИИ ЛАНТАНИДОВ
© 2015 г. А. В. Егорова*, ^ А. В. Анельчик**, И. И. Леоненко*, Ю. В. Скрипинец*, В. П. Антонович*
*Физико-химический институт им. А.В. Богатского Национальной академии наук Украины 65080 Украина, Одесса, Люстдорфская дорога, 86 1E-mail: yegorova@interchem.com.ua **ОДО "ИНТЕРХИМ" 65080 Украина, Одесса, Люстдорфская дорога, 86 Поступила в редакцию 26.02.2014 г., после доработки 15.04.2014 г.
Изучены спектрально-люминесцентные характеристики ряда нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) и их комплексов с Eu(III) и Tb(III). Показана возможность определения НПВП с использованием сенсибилизированной люминесценции лантанидов. Выявлен синергети-ческий эффект влияния триоктилфосфиноксида (ТОФО) и тритона Х-100 на интенсивность люминесценции аналитических форм, в качестве которых использованы разнолигандные комплексы Ьп(Ш)—НПВП—ТОФО в мицеллярной среде (тритон Х-100). Пределы обнаружения НПВП в различных лекарственных формах составляют от 0.012 и 2.0 мкг/мл.
Ключевые слова: разнолигандные комплексы, тербий, европий, сенсибилизированная люминесценция, нестероидные противовоспалительные препараты.
Б01: 10.7868/80044450215040052
Нестероидные противовоспалительные препараты, производные уксусной, пропионовой, ан-траниловой кислот обладают противовоспалительным, анальгезирующим и жаропонижающим эффектами. Их широко применяют в медицинской практике [1], что обусловливает необходимость разработки простых, экспрессных и высокочувствительных методик их определения в лекарственных формах, биожидкостях, смывах с поверхностей фармацевтического оборудования при его очистке.
Для определения НПВП используют различные варианты ВЭЖХ со спектрофотометриче-ским, флуоресцентным и масс-спектрометриче-ским детекторами [2—5]. Предложены простые, чувствительные, с хорошими метрологическими характеристиками методики люминесцентного и спектрофотометрического определения НПВП, основанные на собственной флуоресценции или поглощении в УФ-области спектра самих препаратов или продуктов их химических превращений [6].
В последние годы для определения низких концентраций лекарственных препаратов (ЛП) и их метаболитов предложено использовать различные варианты люминесцентного метода, в том числе
основанного на характеристической 4/-люминес-ценции ионов лантанидов (Ьп), сенсибилизированной лигандным окружением центрального иона.
Сенсибилизированную люминесценцию лантанидов (СЛЛ), в частности европия(Ш) и тер-бия(Ш) в их комплексах с различными ЛП, эффективно используют для определения последних. В качестве аналитических форм для определения лиганда — сенсибилизатора люминесценции центрального иона применяют однородно- и разно-лигандные комплексы (РЛК). Работы по определению ЛП в биожидкостях, биообъектах и в дозированных лекарственных формах с использованием СЛЛ систематизированы в монографиях [7, 8] и обзорных статьях [9—13]. Показаны возможности косвенного люминесцентного определения лекарственных препаратов, применяемых в форме солей органических оснований, катионы которых не реагируют с ионами Ьп(Ш), но анионы этих солей влияют на СЛЛ [9, 10, 14], а также препаратов, не способных к взаимодействию с ионами лантанидов, но образующих аддукты с лигандом-сенсибилизатором по эффекту тушения эмиссии люминесцентного зонда (комплекс ТЬ(Ш) с производным амида оксохинолин-3-карбоновой кис-
лоты) [11]. Известны методики люминесцентного определения некоторых НПВП, основанные на применении в качестве аналитических форм их комплексов с ионами Еи(111) и ТЬ(Ш) [15—21].
Цель данного исследования — разработка методик люминесцентного определения ряда нестероидных противовоспалительных препаратов в дозированных лекарственных формах с использованием синергетического влияния триоктил-фосфиноксида и тритона Х-100 при образовании новых аналитических форм — разнолигандных комплексов лантанидов.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Реагенты. Использовали исходные растворы хлоридов европия и тербия (0.01 М), которые готовили из соответствующих оксидов высокой чистоты. Концентрацию металлов стандартизовали комплексонометрически. Исходные растворы лекарственных препаратов (0.01 М, 1000 мкг/мл) готовили растворением точных навесок соответствующих субстанций в воде или в воде с подщела-чиванием 0.1 М раствором NaOH до рН 7.5—8.0. Рабочие растворы готовили соответствующим разбавлением водой. Исходные растворы поверхностно-активных веществ (ПАВ) (0.01 М) получали растворением их точных навесок в воде. Рабочие растворы готовили соответствующим разбавлением водой. Кислотность растворов создавали 40%-ным водным раствором уротропина. Использовали фармацевтические субстанции ряда НПВП, все реактивы квалификации ч. д. а. и х. ч., бидистил-лированную воду.
Аппаратура. Спектры люминесценции и возбуждения, а также времена жизни регистрировали с помощью Cary Eclipse Varian (Австралия) с двойным источником света (ксеноновая лампа 150-W сплошного спектра и импульсная лампа) и FluoroLog-3 Horiba Jobin Yvon (Франция) с ксено-новой лампой 450-W. Все измерения проводили при комнатной температуре (2l—23°C). Спектры поглощения регистрировали на спектрофотометре UV-2401 PC (Shimadzu). Для получения кривых затухания люминесценции изученных комплексов использовали: возбуждение образца импульсами света длительностью до б мс с временным разрешением 10 мкс и 30 повторами. Времена жизни возбужденного состояния ионов тербия(Ш) и европия(Ш) вычисляли с использованием программного обеспечения Cary Eclipse. Энергии три-плетных уровней (Т) органических реагентов определяли регистрацией спектров фосфоресценции их комплексов с гадолинием при 77 K [22]. Кислотность растворов измеряли с помощью рН-метра Lab 850 (Schott Instruments GmbH, Germany) со стеклянным электродом, градуировку проводили с помощью стандартных буферных растворов.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Спектрально-люминесцентные характеристики.
Установленные нами спектрально-люминесцентные характеристики двухкомпонентных комплексов европия(Ш) и тербия(Ш) с рядом НПВП представлены в табл. 1. Из этих данных следует, что для НПВП характерно сильное светопогло-щение в УФ-области. Энергии триплетных уровней изученных лигандов выше энергий возбужденных уровней тербия(Ш) и европия(Ш), что делает возможным передачу энергии возбуждения на уровни (20500 см-1) ТЬ(Ш) и ^ (17300 см-1) Еи(111).
Установлено, что мефенамовая, нифлумовая кислоты, дифлунизал, ортофен, ибупрофен, ке-топрофен, кеторолак, флурбипрофен и этодолак образуют комплексные соединения с ионами ТЬ(Ш) и Еи(111), сенсибилизируя их люминесценцию. Однако интенсивность люминесценции (1люм) иона Еи(111) в соединениях с этими реагентами значительно ниже, что, очевидно, обусловлено большой разницей между Т лигандов и энергией уровня европия(Ш). Напроксен, индометацин и тиапрофеновая кислота образуют комплексы с ионами ТЬ(Ш) и Еи(111), но сенсибилизация люминесценции наблюдается только для ионов Еи(111), поскольку триплетные уровни данных реагентов меньше энергии уровня тербия(Ш). Спектрально-люминесцентные характеристики НПВП и их лантанидных комплексов получены из соответствующих спектров возбуждения и люминесценции, кривых ее затухания.
Условия комплексообразования. Комплексооб-разование Ьп(Ш) с НПВП наблюдается в интервале рН 2.5-9.5 с максимумами /люм при рН 6.5-7.5. В кислых растворах степень образования комплексов мала, а при рН > 9 комплексообразованию, очевидно, препятствует гидролиз ионов Ьп(Ш).
Установлено, что для достижения максимальной /люм комплексов необходимы 5-20-кратные избытки реагентов по отношению к ионам Ьп(Ш). По люминесцентным данным методом ограниченного логарифмирования установлено, что при недостатке лигандов образуются комплексы с соотношением Ьп(Ш) : НПВП = 1 : 1, а при избытке лигандов - 1 : 2.
Изучено влияние растворителей различной природы (рис. 1а) на /люм комплексов. Установлено, что добавление к комплексам Ьп(Ш)-НПВП органических растворителей снижает интенсивность люминесценции лантанида(Ш) на 50-80% (ацетон, изопропанол, ацетонитрил) и на 25-35% (этанол, диметилформамид, диметилсульфоксид, метанол). Интенсивность люминесценции максимальна в водных растворах.
Изучено влияние на люминесценцию комплексов донорно-активных веществ (ДАВ). Для
Таблица 1. Спектрально-люминесцентные характеристики НПВП* и их комплексов с ионами ланта-нидов (1 : 1) (Стъ = сЕи = 1 X 10-3 М, Снпвп = 1 х 10-4 М)
НПВП Формула Т х 10-4, см-1* X, нм* Б X 10-4, л/ (моль ■ см)** Xвозб, нм Ьп(Ш) Компл Ьп(Ш) : ^люм, отн. ед.*** 1екс НПВП т, мкс
МК ^.СООИ ^гр И3С СИз 2.17 285 1.60 290 320 ть 195 365
НК СБз 2.09 287 2.06 275 310 ть 12.4 246
Диф СООИ 2.20 258 305 3.68 1.84 248 300 ть 3580 140
Орт С1 О^тО С1 1— СООЙа 2.13 276 1.54 250 312 ть 25 496
Ибп ИзС И3С ^-^ у—И-СООИ ^^ Сиз 2.05 272 1.32 294 318 ть 30 452
Кф СИ3 )—СООИ 2.08 262 1.88 240 280 ть 2042 450
Кл О О 2.06 249 323 0.82 2.19 290 350 ть 664 114
Фл Б С^З ¿^СООИ СИз 2.14 247 0.82 2.30 240 290 ть 2460 830
Таблица 1. Окончание
НПВП Формула Т х 10-4, см-1* X, нм* Б X 10-4, л/ (моль ■ см)** Xвозб, нм Еп(Ш) Комп Еп(Ш) : /люм, отн. ед *** лекс НПВП т, мкс
Эт /СИз Г И /СИз гтА 1 кЛ/Лус - си 2.35 224 279 2.30 0.50 237 270 ТЬ 170 267
Нап СИз СИзС^^^ 2.02 262 272 317 330 0.46 0.46 0.14 0.17 250 310 Ей 64 60
Инд СИзС^^ ^СССИ 1.91 281 0.81 240 290 Ей 6608 85
ТК с 8 СИз (Т^Г ^ /СССИ 1.95 308 1.12 265 315 Ей 156 185
* МК — мефенамовая кислота, НК — нифлумовая кислота, Диф — дифлунизал, Орт — ортофен, Ибп — ибупрофен, Кф — ке-топрофен, Кл — кеторолак, Фл — флубипрофен, Эт — этодолак, НАП — напроксен, Инд — индометацин, ТК — тиапрофеновая кислота.
** сИнд, Эт - 5 х 10 5 М, сФл, Кл, Кф, МК, НК, Орт, Ибп, Диф - 2.5 х 10 5 М, сНап, ТК - 1 х 10 4 М, 1 - 1 см;
*** щели монохроматоров 10-10, усиление 850.
примера на рис. 1б представлена зависимость /люм от типа ДАВ для индометацина. Установлено, что только ТОФО и трифенилфосфиноксид (ТФФО) увеличивают интенсивность люми
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.