ВЕСТНИК ЮЖНОГО НАУЧНОГО ЦЕНТРА РАН, Том I, № 1, 2005, стр. 41-^44
БИОЛОГИЯ
УДК 639.3.043.13 : 636.087.73
ПОВЫШЕНИЕ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОСЕТРОВЫХ РЫБ НА РАННИХ ЭТАПАХ ОНТОГЕНЕЗА ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ
ВИТАМИННЫХ ПРЕПАРАТОВ
© 2005 г. E.H. Пономарева1, C.B. Пономарев2, М.Н. Сорокина2, A.B. Храмова2
Для подготовки самок осетровых рыб к нересту и улучшения их физиологического состояния были проведены инъекции комплекса витаминов С, Е и В|2. Результаты исследований показали высокую эффективность применения комплекса витаминов для самок осетровых рыб с целью повышения качества полученного потомства. Отмечено влияние цианкобаламина на повышение жизнестойкости развивающейся икры и личинок русского осетра. Процент выживаемости свободных эмбрионов увеличивается на 9 %, личинок - на 6%.
В мировой практике вопросы совершенствования методов искусственного разведения ценных промысловых рыб и дальнейшее повышение продуктивности водоемов за счет обеспечения высококачественным посадочным материалом выдвигаются на первый план. Индустриальные технологии выращивания в последнее время широко применяются на предприятиях, занимающихся промышленным воспроизводством ценных видов промысловых рыб. В то же время до сих пор существует необходимость в совершенствовании технологий выращивания жизнеспособной крупной молоди. Ухудшение экологических показателей водной среды на юге России, мощные антропогенные воздействия, в том числе - перелов, привели к сокращению численности ценных промысловых видов рыб. В связи с этим роль искусственного воспроизводства в формировании и сохранении видового состава и запасов осетровых рыб еще более возрастает и приобретает доминирующее значение [1].
В настоящее время ведется поиск биологически активных веществ, ослабляющих отрицательное воздействие окружающей среды, с целью их использования на самых ранних стадиях развития. Применяется несколько групп веществ, повышающих жизнестойкость рыб. Потребление витаминов - необходимое условие нормального функционирования живого организма. Витамины в течение последней четверти века успешно применяют в животноводстве с целью увеличе-
1 Южный научный центр РАН, г. Ростов-на-Дону
2 Астраханский государственный технический университет, г. Астрахань
ния общей сопротивляемости организма неблагоприятным воздействиям и акселерации роста [2]. Доказана защитная роль аскорбиновой кислоты и витамина Е при отравлении хлороргани-ческими токсикантами и ртутью [3, 4]. Однако до настоящего времени очень мало работ посвящено изучению возможного защитного действия биологически активных веществ на организм в периоды раннего онтогенеза на фоне интоксикации [5].
В качестве стимулятора развития в периоды раннего онтогенеза успешно применяются витамины группы В. Витамин В12 - единственный водорастворимый витамин, способный аккумулироваться в организме. Он связан с осуществлением биокаталитических реакций, обеспечивающих кроветворную функцию организма, и способствует нормализации функции печени, благоприятно влияет на регенерацию нервных волокон. Витамин В12 необходим для нормального роста и функционирования организма. Совместно с холином и метионином он обладает эффективным липотропным действием (предотвращает отложение жира в печени). Витамин В,2 повышает жизнестойкость и резистентность рыб к действию токсикантов как органической, так и неорганической природы. Результаты обработки витамином В12 особей кижуча, симы, балтийского лосося и радужной форели в концентрации 0,4—1,0 мг/л и экспозиции 2-6 часов существенно повышают токсикорезистентность и жизнестойкость рыб. При этом не отмечено нарушений в развитии, скорости эмбриогенеза и массовости вылупления [6]. Цианкобаламин совместно с тиамином используют для увеличения
токсикорезистентности производителей карпа и растительноядных рыб и получения жизнестойких личинок в условиях повышенного загрязнения водоемов. Применение инъекций витаминов В, и В12 производителям в процессе получения потомства, на стадии предварительного инъецирования самок гипофизарной инъекцией, повышает выход трехдневных личинок карпа, пестрого и белого толстолобиков, снижает посленерес-товую гибель [7].
Таким образом, использование комплекса витаминов С, Е и В]2 в преднерестовый период будет способствовать повышению жизнестойкости не только производителей, но и впоследствии улучшит качество полученного потомства, повышая жизнестойкость ранней молоди осетровых рыб и увеличивая выход молоди.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Материалом для исследований послужили взрослые особи русского осетра, икра и личинки. Для подготовки самок осетровых рыб к зимнему содержанию и улучшения их физиологического состояния были проведены инъекции комплекса витаминов С, Е и В12. Инъецирование витаминами проводили перед зимовкой и перед нерестом. Кратность инъецирования перед зимовкой составила один раз в месяц - с сентября по ноябрь, а перед нерестом - один раз в две недели. В контрольном варианте инъекции витаминов самкам не проводили. Для проведения инъекций использовали фармацевтические препараты аскорбиновой кислоты (5% раствор), а-токоферол-ацетата (10%) и витамина В12 (500 мкг).
Влияние витаминных инъекций определяли на основании данных созревания производителей, процента оплодотворения, выхода икры, а также выживаемости эмбрионов и личинок. Для определения процента оплодотворения икры брали пробы на стадии второго деления - 4 бластоме-ра, стадия 5 [8].
Обработку икры русского осетра цианкоба-ламином проводили в период отмывки в аппаратах обесклеивания икры в течение 45 минут перед размещением на инкубацию. Нормы введения витамина В12 составили 0,5 мг/л, 1,0 мг/л и 1,5 мг/л. Самки, которым проводили инъецирование, созрели раньше по времени. Вся отобранная от них икра была доброкачественной, однако процент оплодотворения в опытном варианте у самок русского осетра был выше на 3%.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Результаты использования витамина В12 в период подготовки икры русского осетра к инкубации представлены в таблице 1. Во всех опытных вариантах отмечен высокий выход свободных эмбрионов. Лучшие результаты были получены во втором варианте опыта (1 мг/л В,2), где выход свободных эмбрионов составил 75%, в контроле - 68%.
Вторая серия опытов, где витамины С, Е, и В12 вводили производителям перед нерестом в виде инъекций и дополнительно обрабатывали икру в период отмывки цианкобаламином, выявила лучшие результаты (табл. 1).
При искусственном воспроизводстве качество и жизнестойкость личинок и молоди зависят не только от условий выращивания, но и от качества исходного материала (икры и спермы), которое в свою очередь определяется состоянием производителей [9]. Поэтому необходимо было оценить качество икры, полученной от производителей после проведения витаминных инъекций.
Поступая в организм витамины накапливаются в ооцитах, создавая резерв, который в эмбриональный и постэмбриональный периоды используется для обеспечения зародыша витаминами [10-12]. Определение содержания витаминов С и Е в икре показало, что у русского осетра опытной группы содержание этих витаминов было выше на 40,1% и 29,4%, соответственно при Р< 0,001.
Биохимический анализ показал, что икра, полученная от проинъецированных витаминами
Таблица 1. Результаты влияния витаминов С, Е и В^ на икру и личинки русского осетра
Показатели Обработка икры витамином В]2 перед инкубацией Контроль
0,5 мг/ 1 мг/л 1,5 мг/
л л
Выход свободных 70 75 73 68
эмбрионов, %
Выход личинок при 59 64 63 56
переходе на активное
питание, %
Инъецирование самок витаминами С, Е, В32 и обработка
икры витамином В12
Выход свободных 72 78 76 69
эмбрионов, %
Выход личинок при 60 66 64 60
переходе на активное
питание, %
ПОВЫШЕНИЕ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОСЕТРОВЫХ РЫБ
43
Таблица 2. Общий химический состав икры русского осетра
Показатели Опыт Контроль
Влага % 48,3% ± 14*** 54,6 ± 1,2
Сухое вещество, % 51,7 ± 1,0*** 45,4 ±1,3
Протеин 30,1 ± 1,1*** 24,8-1-0,8
Жир 16 ±0,7** 14+0,8
Углеводы 2,5 ± 0,2** 2,4+0,3
Зола 3,! 4,2
Примечание: различия достоверны при **Р<0,01; ***Р< 0,001
Таблица 3. Нарушения в эмбриональном развитии, %
Виды нарушений Опыт Контроль
Процесс дробления 2,2+0,41*** 4,6+0,33
Закрытие бластопора 1,0+0,32*** 2,7+0,28
Укороченная или искрив- 3,6+0,9! * 5,9+0,36
ленная нервная пластинка
Недоразвитие передних от- 3,4+0,25*** 6,8+0,49
делов головы и тела
Укороченное или искрив- 4,3+0,62* 5,9+0,54
ленное тело
Примечание: различия достоверны *Р < 0,05; ***Р< 0,001
самок, отличалась от контрольной группы более высоким содержанием протеина (на 6,7%) и жира (на 5%), что важно в период эмбрионального развития и в дальнейшем может оказать влияние на жизнестойкость эмбрионов (табл. 2). Высокая концентрация липидов является свидетельством того, что их расход в организме был значительно ниже.
При исследованиях в период эмбриогенеза отмечено, что наибольшая гибель эмбрионов в период инкубации была в контрольной группе и составила 31,9%, тогда как в опытной группе этот показатель составил 25,4%. Высокая гибель эмбрионов в контрольной группе отмечена до начала гаструляции. Наибольший отход эмбрионов в опытных группах наблюдали в период прохождения критических стадий развития, но он был меньше, чем в контрольной группе. Вылуп-ление эмбрионов опытной группы проходило на 4-5-е сутки и по продолжительности составило сутки. Продолжительность зародышевого развития икры контрольной группы было на 2-3 суток дольше, период вылупления предличинок составил двое суток. Очевидно, наибольший отход и замедленное развитие в период эмбриогенеза свидетельствует о более низком качестве икры контрольной группы. Это согласуется с литературными данными [13, 14].
В период развития эмбрионов, полученных от производителей контрольной группы, по сравнению с опытной группой, был отмечен больший процент нарушений в развитии (табл. 3).
В период дробления на стадии второго деления (5 стадия) наблюдали возникновение сразу нескольких бластомеров. Процент таких нарушений в опытной группе составил 2,2%, в контрольной группе он был выше в
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.