ЖУРНАЛ ВЫСШЕЙ НЕРВНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ, 2013, том 63, № 4, с. 486-494
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ПАТОЛОГИЯ ВЫСШЕЙ НЕРВНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ
УДК 612.821.6
ПРОАГРЕССИВНЫЙ ЭФФЕКТ ДИАЗЕПАМА У САМЦОВ МЫШЕЙ С ПОВТОРНЫМ ОПЫТОМ АГРЕССИИ
© 2013 г. А. Е. Григорьева, Д. А. Смагин, Н. П. Бондарь, А. Г. Галямина, Н. Н. Кудрявцева
Сектор нейрогенетики социального поведения, Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт цитологии и генетики Сибирского отделения Российской академии наук, Новосибирск,
e-mail: natnik@bionet.nsc.ru Поступила в редакцию 04.07.2012 г. Принята в печать 19.10.2012 г.
Ранее было показано, что повторный опыт агрессии в ежедневных агонистических взаимодействиях сопровождается развитием тревожности у самцов мышей. Целью настоящей работы было исследование влияния анксиолитика диазепама (0.5 мг/кг) на состояние тревожности и уровень агрессивности животных. Препарат вводили хронически в течение 2 недель в процессе приобретения опыта агрессии. Было показано, что диазепам снижает уровень тревожности животных, не оказывая влияния на уровень агрессии, оцениваемый общим временем атак за время теста. Однако под влиянием препарата снижалась в 2 раза демонстрация ритуальных форм агрессии — агрессивного груминга. При разделении группы самцов с введением диазепама на подгруппы по проявлению этого типа поведения выяснилось, что у самцов, не проявлявших агрессивный груминг, диазепам оказал выраженный анксиолитический эффект, но при этом уровень агрессии у них был повышен по сравнению с самцами, которым вводили физиологический раствор. В то же время у подгруппы агрессивных самцов, проявлявших агрессивный груминг, показатели тревожности и агрессивности после введения диазепама не изменялись. Таким образом, можно сделать вывод, что наряду с анксиолитическим эффектом диазепам может повысить агрессивность у части самцов с повторным опытом агрессии в качестве побочного эффекта.
Ключевые слова: повторный опыт агрессии, тревожность, мыши, диазепам.
Pro-Aggressive Effect of Diazepam in Male Mice with Repeated Experience of Aggression
А. Е. Grigoryeva, D. A. Smagin, N. P. Bondar, А. G. Galyamina, N. N. Kudryavtseva
Neurogenetics of Social Behavior Sector, Institute of Cytology and Genetics, Russian Academy of Sciences,
Siberian Division, Novosibirsk, e-mail: natnik@bionet.nsc.ru
Previous studies have reported that repeated experience of aggression is attended with the development of increased anxiety in male mice. The paper aimed to investigate effect of anxiolytic, diazepam, on the level of anxiety and aggression in these animаls. The drug was chronically administrated for two weeks at the process of aggression experience acquisition. It was shown that diazepam decreased anxiety but didn't influence aggression level assessed by total time of attacks. However, diazepam decreased demonstration of aggressive grooming in part of aggressive males. Group of diazepam-treated aggressive males which displayed aggressive grooming didn't differ in level of anxiety and aggression in saline-treated male mice. Diazepam had anxiolytic and pro-aggressive effects in male mice without demonstrating aggressive grooming. Thus, we can conclude that anxiolytic effect of diazepam is accompanied with increased aggression as side effect in some male mice which have repeated experience of aggression.
Keywords: repeated aggression, anxiety, mice, diazepam. DOI: 10.7868/S0044467713040059
Взаимосвязь между агрессией и тревожностью была показана неоднократно и у людей, и у животных, причем характер этой взаимосвязи варьирует: высокому уровню агрессии может соответствовать как повышенная, так и пониженная тревожность [4, 7, 11, 13, 20— 22]. Однако в большинстве случаев эта взаимосвязь отражала наследственно обусловленные особенности индивида. Ранее неоднократно было показано, что приобретение повторного опыта агрессии в ежедневных агонистических взаимодействиях приводит к развитию состояния тревожности у самцов мышей [19], которое длительно сохраняется даже после периода прекращения конфрон-таций [3]. При этом под влиянием повторного опыта агрессии поведенческая реакция самцов на однократное введение анксиоли-тиков изменялась. У особей с кратковременным опытом агрессии однократная инъекции буспирона оказывала анксиогенное действие, при этом их агрессивность снижалась [1]. У самцов с длительным опытом агрессии препарат не влиял ни на состояние тревожности, ни на агрессивность [1]. Другой анксио-литик диазепам при однократном введении самцам мышей с кратковременным опытом агрессии оказывал, так же как и буспирон, анксиогенный эффект. В то же время у самцов с длительным повторным опытом агрессии его эффект был уже анксиолитическим. При этом в обоих случаях наблюдалось снижение агрессивности самцов мышей под влиянием диазепама [2]. Однако, отражая различную чувствительность самцов мышей с разным опытом агрессии к действию анксио-литиков при однократном введении, эти исследования свидетельствовали лишь о том, что нейрохимический фон, который у этих самцов был разным [17], модифицирует эффекты препаратов, в частности анксиолити-ков. В то же время эти исследования не отвечали на вопрос, можно ли, повлияв на развитие тревожности путем хронического введения анксиолитика в процессе приобретения повторного опыта побед, снизить агрессивность самцов мышей. Целью настоящей работы было исследовать эффекты хронического введения диазепама, вводимого самцам мышей на фоне продолжающихся агонистических взаимодействий.
МЕТОДИКА
Экспериментальные животные. Эксперименты проводили на половозрелых самцах мышей линий C57BL/6J в возрасте 2.5— 3.5 мес., массой 25—30 г. Животных разводили и содержали в стандартных условиях вивария Института цитологии и генетики СО РАН, при фиксированном световом режиме 12.00 : 12.00 часов (свет : темнота). Стандартный корм (гранулы) и воду животные получали без ограничения. После отсаживания от матерей в возрасте 1 мес. самцы содержались в отдельной комнате группами по 8—10 животных до начала эксперимента. Все экспериментальные процедуры проводились в соответствии с международными правилами и стандартами, использующимися при работе с животными (European Communities Council Directive of November 24, 1986 (86/609/EEC)), и одобрены Комиссией по биоэтике ИЦиГ СО РАН (протокол заседания № 4 от 1.11.2010 г.)
Модель сенсорного контакта. Для формирования групп животных с разным опытом агрессии использовали модель сенсорного контакта [15]. Выровненных по массе мышей попарно помещали в металлические экспериментальные клетки размером 28 х 14 х 10 см, разделенные на два равных отсека прозрачной перегородкой с отверстиями, которая позволяла им видеть, слышать и воспринимать запахи друг друга (сенсорный контакт), но предотвращала физическое взаимодействие. Через 3 дня, после адаптации мышей к новым условиям, начинались конфронтации. Ежедневно, после замены крышки клетки на прозрачное стекло для удобства наблюдения, и 5- минутной активации особей — адаптации к новому освещению, перегородку убирали на 10 мин. Это приводило к агрессивному взаимодействию самцов. Как правило, если демонстрация сильной агрессии со стороны одного из партнеров продолжалась более 3 мин, то перегородку опускали. Уже в 1-2-й конфронтации выявлялись победители и побежденные. Успех победы или опыт поражения закрепляли в течение последующих 3 дней при агрессивных контактах мышей с тем же самым противником, в последующем после агрессивного взаимодействия производили замену побежденного партнера в клетке для предотвращения затухания агрессии. В результате этих манипуляций формировалась группа мышей с агрессивным типом поведения, которые имели последовательный опыт
побед в 20 социальных конфронтациях (агрессоры, победители) и ежедневно демонстрировали выраженную агрессию, атакуя незнакомого партнера.
Поведенческие тесты
Тест "приподнятый крестообразный лабиринт". Приподнятый крестообразный лабиринт (ПКЛ) представляет собой один из наиболее общепринятых тестов, который используется для оценки тревожного состояния у крыс и мышей. Лабиринт состоит из двух открытых (25 х 5 см) и двух закрытых (25 х 5 х х 30 см) рукавов, расположенных крестообразно и установленных на высоте 50 см от пола. За 5 мин до тестирования животное переносили в экспериментальную комнату для активации и привыкания к новым условиям освещения. Во время съемки в условиях тусклого освещения животное помещали в центр лабиринта, ориентируя носом в закрытый рукав. За 5 мин теста определяли следующие параметры: число входов в открытые рукава, на центральную площадку и в закрытые рукава, представленное в виде процента от общего числа входов и выходов; время, проведенное в открытых рукавах, на центральной площадке и в закрытых рукавах, представленное в виде процента от общего времени тестирования; число заглядываний под открытые рукава; число выглядываний из закрытых рукавов; число переходов из одного закрытого рукава в другой и общее число входов/выходов. Лабиринт тщательно мыли и высушивали после каждого животного.
Агонистические взаимодействия. Исследование агрессивного поведения проводилось в экспериментальной клетке, где предварительно животные приобретали опыт побед в агонистических столкновениях (см. раздел "Модель сенсорного контакта"). За сутки до начала тестирования у агрессоров меняли партнера, так чтобы агрессор за ночь успел познакомиться с запахом жертвы (партнера) за перегородкой. На следующий день животное переносили в тестовую комнату и после 5-минутной активации из клетки убирали перегородку, разделяющую мышей, и у агрессивных самцов за 10 мин теста регистрировали следующие формы поведения:
— 1 — прямые атаки — укусы, преследование;
— 2 — агрессивный груминг: покусывание морды, спины и загривка побежденного жи-
вотного (партнер в этот момент демонстрирует позы полного подчинения и замирает под агрессором);
—3 — разбрасывание чужой подстилки (ворошение и разрывание подстилки, гнезда и туалетного места побежденного самца на его территории);
— 4 — обнюхивание морды, тела или гениталий партнера.
Дл
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.