Фармакология, клиническая фармакология
Зорикова С.П., младший научный сотрудник
Короткова И.П., кандидат ветеринарных наук, доцент, старший преподаватель Приморской государственной сельскохозяйственной академии Зориков П.С., доктор биологических наук, профессор
(Горнотаежная станция им. В.Л. Комарова Дальневосточного отделения Российской академии наук)
РАНОЗАЖИВЛЯЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ РАСТЕНИЙ, СОДЕРЖАЩИХ ФЛАВОНОИДЫ
Экспериментами на различных моделях установлено, что ранозаживляющую активность проявляют препараты из растений, содержащих флавоноиды.
WOUND-HEALING ACTIVITY OF PLANTS CJNTAINING FLAVONOIDS
By experiments it is established that wound-healing activity is shown by preparations from plants containing flavonoids.
Флавоноиды привлекли внимание ученых как биологически активные вещества с разносторонним спектром действия [4, 5, 16]. Они обнаружены в различных частях растений. Из дальневосточных растений флавоноиды содержатся в горце почечуйном и перечном, зверобое, фиалках, боярышниках, рябине черноплодной, бархате амурском, шлемнике байкальском, солодке уральской и других.
В растениях флавоноиды содержатся в виде гликозидов, растворенных в клеточном соке. Процентное содержание их колеблется в течение вегетационного периода. Максимальное накопление флавоноидов в надземное части отмечается в период бутонизации и цветения, в подземных частях - в период плодоношения.
В результате анализа биологической активности, использования в официальной и народной медицине и содержания флавоноидов мы выбрали для изучения ранозаживляющей активности бархат амурский, солодку уральскую и горец перечный. Эти растения так же обладают большими ресурсами.
В бархате амурском (Phellodendron amurense) имеется около десяти флавоноидов (фелло-зид, дигидрофеллозид, норикаризид и др.). Препараты бархата применяются как тонизирующее, антисептическое, кровоостанавливающее средство. Используются при холециститах, экземе, воспалительных процессах [17].
Солодка уральская (Glycyrrhiza uralensis) содержит 4,3% флавоноидов. Препараты солодки используются в медицине как спазмолитическое, противоязвенное иммуностимулирующее и отхаркивающее средство [1, 4].
Горец перечный (Polugonum hydropiper) содержит сумму флавоноидов до 2,5% (рутин, квертитрин, гиперозид и др.). Препараты горца обладают кровоостанавливающим и болеутоляющим действием. Применяются при язве желудка, экземе, маточных кровотечениях [10].
В настоящее время лечение ран относится к числу наиболее острых вопросов и основных проблем хирургии. В медицине для стимуляции регенеративных процессов в качестве ос-
новной части комплексной терапии широко используются сок и мазь из каланхоэ, облепихо-вое масло и препараты из других растений, которые активизируют и стимулируют обменные процессы и повышают резистентность организма [11].
Препарат на основе хитозана «Полимед», разработанный Тихоокеанским институтом биоорганической химии ДВО РАН, проявляет антибактериальное свойство, ускоряет различные стадии заживления ран [3]. Ферменты - трипсин, химопсин, рибонуклеаза очищают рану, активизируют пролиферацию и эпителизацию. Стимулирует обменные процессы в тканях «Солкосерил». Препарат «Биопин» обладает противовоспалительным, ранозаживляю-щим и антисептическим свойствами. Все это трудоемкие и дорогостоящие препараты.
Применяемые гелевые основы метилцеллюлозы растений, содержащих флавоноиды, дают возможность создать простую композицию ингредиентов для экстренного и эффективного лечения ран. Основой для получения терапевтического эффекта являются экстракты солодки, бархата и горца. Активность экстрактов из растений усиливается в геле с метилцеллюлозой путем более длительного и близкого контакта с раневой поверхностью. Это способствует очищению раны от микроорганизмов, заполнению дефекта новой грануляционной тканью и в связи с репаративными способностями организма ускоренному заживлению раны.
Несмотря на то, что в современной литературе накоплен значительный материал по изучению флавоноидов указанных растений, работ по изучению препаратов на основе геля для лечения ран нет.
Экспериментальная часть
Для изучения действия выбранных растений на процессы регенерации было использовано белых мышей - 91, кроликов породы шиншилла - 30, свиней 25. Опыты на мышах и кроликах проводили на базе лаборатории Горнотаежной станции ДВО РАН, вивария Уссурийского аграрного техникума и Института ветеринарной медицины Приморской государственной сельскохозяйственной академии. Гистоморфологические исследования проводили на базе кафедры патоморфофизиологии акушерства и хирургии Дальневосточного государственного аграрного университета.
Для опытов животных подбирали по принципу аналогов. Они находились в равноценных условиях кормления и содержания. В виварии животные содержались согласно санитарных правил по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник. Кормление осуществлялось в соответствии с нормами и согласно условиям, необходимым для выбранной экспериментальной модели.
Показателями по определению эффективности препаратов солодки уральской для стимуляции процессов регенерации при экспериментальных ранах служили сроки образования рубца после отпадения струпа и наличие эпителия на месте нанесения дефекта, определение зрелости рубцовой ткани, а также скорость сокращения площади раневого дефекта.
Динамику скорости заживления определяли по методу Л.Н. Поповой [13] с использованием целлофана, на котором ежедневно обрисовывались контуры раневого дефекта и высчитывали площадь ран с помощью миллиметровой бумаги.
У белых мышей кожные дефекты наносились в области спины. Перед их нанесением готовили операционное поле, выстригали шерстный покров и обрабатывали 5% спиртовым раствором йода. Для наложения одинаковых по размеру дефектов использовали трафарет размером 10х10 мм. Этот трафарет прикладывали к операционному полю и скальпелем делали насечки кожи. Полнослойные кожные лоскуты указанного размера и формы выкраивали с использованием глазных ножниц и пинцета.
Кроликам кожные дефекты наносились в области подвздоха и на наружной поверхности ушной раковины. Для нанесения дефекта использовался трафарет из пластмассовой пластинки
размером 3х1 см. После удаления шерсти и обработки спиртовым раствором операционного поля, по намеченным ориентирам производились насечки кожи П-образной формы. При помощи хирургических ножниц и пинцета кожные лоскуты отпрепаровывали в области подвздоха до поверхностной фасции, на наружной поверхности ушной раковины до надхрящницы.
Свиньям дефекты наносились в области наружной поверхности бедра, отступая на 15 см от позвоночника. На операционном поле выстригали щетину, обрабатывали его 5% спиртовым раствором йода, после чего трепаном цилиндрической формы удаляли кожу и участок сально-мышечной клетчатки глубиной 1,5 см и диаметром 2 см.
Экстракт корней солодки уральской готовили в лаборатории лекарственных растений Горнотаежной станции ДВО РАН способом перколяции 1:1 на 40% водно-спиртовом растворе в соответствии с требованиями Государственной фармакопеи.
Отвар бархата амурского готовили из луба в инфундирном аппарате по методике М.И. Рабиновича [15] в лаборатории лекарственных растений Горнотаежной станции ДВО РАН. Отвар исследовали в концентрированном виде и в 50% концентрации, которую получали на дистиллированной воде.
Экстракт горца перечного готовили из травы в лаборатории лекарственных растений Горнотаежной станции ДВО РАН способом перколяции 1:1 на 40% водно-спиртовом растворе.
По результатам первых опытов выбирали оптимальные водные концентрации, улучшающие заживление ран, и разводили их метилцеллюлозой для получения геля извлечений из растений. Гель готовили согласно ТУ 6-05-1857-78, паспорту 289-в. Метилцеллюлоза представляет собой волокнистый вязкий материал белого цвета с желтоватым оттенком, содержащий золы не более 0,2%; влаги - не более 5%; метоксильных групп - 26-33%; имеющая рН в растворе - 7,0; растворимость в воде - 98%. На 100 мл готового раствора брали взвешенную на торзионных весах ВЛКТ-500 г-М 4 класса метилцеллюлозу в количестве 5 г, размешивали ее на электромагнитной мешалке до образования однородного геля.
Материалом для гистоморфологических исследований служили рубцы, биопсированные на 16 и 22 сутки у свиней из ран. Биоптаты фиксировали в 10% водном растворе нейтрального формалина. Гистосрезы толщиной 5-7 мкм получали на санном микротоме с последующей их окраской гематоксилин-эозином. Для выявления коллагеновых волокон срезы окрашивали по Ван-Гизон, для определения наличия жировых клеток - суданом-3 по общепринятым прописям [12, 2, 14].
Суждение о влиянии гелевых препаратов 2% солодки уральской, бархата амурского и горца перечного, применяемых для стимуляции регенерационных процессов, на морфологическую зрелость рубца в зависимости от сроков заживления ран, производили на основании гистоморфологического формирования рубцовой ткани. Обращали внимание на наличие эпидермиса, его строение. Используя окулярную сетку, подсчитывали количество клеточных элементов в рубцовой ткани. Микрофотографии готовили с помощью микрофотонасадки МФН-12 и фотоаппарата «Зенит Е». Клеточный состав грануляционной ткани, подсчет количества фиброрбластов, сравнение препаратов по состоянию микроаналитических зон проводили по методике Н.С. Кухаренко, С.Б. Стефанова [9, 8, 7].
Исследования, проведенные на белых мышах, показали, что при наружном применении водных растворов экстракта солодки уральской, отвара бархата амурского и горца перечного, лучшую биологическую активность проявлял раствор солодки уральской 2% концентрации, при использовании которого время заживления ран при ежедневном орошении сокращалось в среднем на 5,6 суток, а при применении бархата амурского и горца перечного лучшую биологическую активность проявлял отвар и экстракт. Сроки заживления сокращались в среднем на 3,1 суток по отношению к контролю (табл. 1).
Таблица 1
Сроки заживления ран у белых мышей в опытах с орошением растительными препаратами
Группы животных, получающих препараты Ср
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.