МИКРОБИОЛОГИЯ, 2014, том 83, № 5, с. 599-604
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
УДК 582.28:594.1(265.4)
СРАВНЕНИЕ ГРИБНЫХ КОМПЛЕКСОВ ПРИМОРСКОГО ГРЕБЕШКА MIZUHOPECTEN YESSOENSIS (JAY, 1856) ИЗ РАЗЛИЧНЫХ РАЙОНОВ ЗАЛИВА ПЕТРА ВЕЛИКОГО ЯПОНСКОГО МОРЯ
© 2014 г. О. Г. Борзых1, Л. В. Зверева
Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского ДВО РАН, Владивосток Поступила в редакцию 27.03.2014 г.
Проведено микологическое обследование приморского гребешка Mizuhopecten yessoensis (Jay) (Bi-valvia) из различных районов залива Петра Великого Японского моря. Из внутренних органов приморского гребешка были выделены изоляты 72 видов мицелиальных грибов из 30 родов сумчатых, анаморфных грибов и зигомицетов. Видовое богатство мицелиальных грибов, в первую очередь грибов родов Aspergillus, Penicillium, Cladosporium, Chaetomium, во внутренних органах двустворчатых моллюсков возрастает в загрязненных прибрежных водах.
Ключевые слова: морские мицелиальные грибы, приморский гребешок М11иЪорес1вп yessoensis, залив Петра Великого, Японское море.
DOI: 10.7868/S0026365614050073
Приморский гребешок Mizuhopecten yessoensis (Jay, 1856) (Bivalvia) — ценный объект промысла и марикультуры [1]. Его ареал охватывает прибрежье южных Курил, о. Сахалин, Приморья, Кореи и Японии. У материкового побережья Японского моря наибольшее количество гребешка отмечено в зал. Петра Великого [2].
Исследования патогенных и токсикогенных грибов, заселяющих внутренние органы приморского гребешка, необходимы для безопасного использования моллюсков в пищу, для предотвращения токсикоинфекций людей при употреблении зараженных грибами морепродуктов, а также для успешного развития хозяйств марикультуры. С вступлением России во Всемирную торговую организацию (ВТО) будут ужесточаться требования к регламентации морепродуктов на содержание патогенных микроорганизмов и их токсинов.
Цель исследования — изучить таксономический состав микобиоты приморского гребешка Mizuhopecten yessoensis (Jay, 1856) из различных районов залива Петра Великого Японского моря.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалом для микологических исследований
служили особи приморского гребешка Mizu-hopecten yessoensis, собранные в различных районах залива Петра Великого в период с 2008 по 2012 гг. Местом отбора моллюсков для исследова-
1 Автор для корреспонденции (e-mail: alien-og@mail.ru).
ний были выбраны акватории Амурского залива, подверженные воздействию промышленно-бы-товых стоков г. Владивостока [3], акватория у о. Рикорда, где располагается плантация по выращиванию двустворчатых моллюсков, и относительно чистые акватории залива Восток [4].
Методы микологического обследования моллюсков. Моллюски были собраны водолазным методом на глубинах 4—10 м. Сбор производили в стерильные пакеты. До камеральной обработки пробы хранили при —18°С в морозильной камере. Затем пробы размораживали для препарирования. Отпрепарированные внутренние органы (мантию, жабры, пищеварительную железу, мускул, почки, гонады) трехкратно промывали в стерильной морской воде. Далее в течение двух часов их вымачивали в растворе антибиотиков (500000 ед. пенициллина и 0.5 г стрептомицина на 1 л стерильной морской воды [5]) для подавления сопутствующей бактериальной флоры, а затем промывали в стерильной морской воде для удаления антибиотиков. Участки органов раскладывали на поверхность агаризованной питательной среды. Створки раковины перед вымачиванием очищали от обрастаний, промывали стерильной морской водой, дробили на кусочки размером 2 х 2 см и проводили те же операции, что и с отпрепарированными органами.
Грибы, выросшие в смешанных культурах, пересевали на свежую питательную среду для получения чистых культур.
Питательные среды. Для выделения и культивирования грибов были использованы следующие питательные среды: универсальная среда Сабуро и среда на отваре из тканей приморского гребешка с добавлением глюкозы (30 г/л), дрожжевого экстракта (0.5 г/л) и бакто-агара (15 г/л) [6, 7]. Среды были приготовлены на профильтрованной и разбавленной (75%) морской воде, pH среды 7.5-7.8 [5].
Перед розливом среды в чашки Петри добавляли антибиотики: пенициллин (500000 ед./л) и стрептомицин (0.5 г/л) и тщательно размешивали до полного растворения.
Для идентификации выделенных грибов были использованы общепринятые ключи и определители [8-13].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Всего c поверхности раковины и из внутренних органов приморского гребешка были выделены изоляты 72 видов мицелиальных грибов из 30 родов, из них 60 видов анаморфных грибов, принадлежащих к 23 родам: Acremonium (4 вида), Alternaría (3), Aphanocladium (1), Aspergillus (13), Aureobasidium (1), Beauveria (1), Botrytis (1), Chry-sosporium (2), Cladosporium (3), Cochliobolus (1), Fusarium (2), Geomyces (1), Gliomastix (1), Hyalocy-lindrophora (1), Isaria (1), Monilia (1), Oidiodendron (1), Paecilomyces (1), Penicillium (17), Phialophoro-phoma (1), Sarocladium (1), Scopulariopsis (1) и Tri-choderma (1), 5 видов сумчатых грибов из 4 родов: Chaetomium (1), Eurotium (1), Purpureocillium (1) и Talaromyces (2), а также 6 видов из 3 родов зиго-мицетов: Mucor (4), Pilaira (1) и Rhizopus (1) (таблица).
Комплекс мицелиальных грибов — ассоциан-тов приморского гребешка из Амурского залива составляет 35 видов грибов из 16 родов, из них 33 вида анаморфных микромицетов из 14 родов: Acremonium (3), Aspergillus (10), Beauveria (1), Chry-sosporium (2), Cochliobolus (1), Geomyces (1), Gliomastix (1), Monilia (1), Oidiodendron (1), Paecilomyces (1), Penicillium (8), Phialophorophoma (1), Scopulariopsis (1) и Trichoderma (1), 1 сумчатый гриб Chaetomium globosum и 1 зигомицет Pilaira anomala (рис. 1).
Комплекс мицелиальных грибов - ассоциан-тов приморского гребешка из акватории у о. Ри-корда составляет 39 видов мицелиальных грибов из 19 родов, из них 30 видов анаморфных грибов из 15 родов: Acremonium (3), Alternaría (2), Aphanocladium (1), Aspergillus (5), Botrytis (1), Cladosporium (1), Fusarium (2), Geomyces (1), Gliomastix (1), Hy-alocylindrophora (1), Isaria (1), Penicillium (8), Phialophorophoma (1), Sarocladium (1) и Scopulariopsis (1); 4 вида сумчатых грибов из 3 родов: Eurotium
(1), Purpureocillium (1) и Talaromyces (2); 4 вида зи-гомицетов из рода Mucor; 1 вид Mycelia Sterilia.
Залив Восток был выбран в качестве контроля как акватория, наименее подверженная антропогенному воздействию [4]. Комплекс грибов — ас-социантов приморского гребешка из этого района составил 15 видов из 8 родов, из них 14 видов анаморфных грибов из 7 родов: Alternaria (3), Aureobasidium (1), Aspergillus (1), Cladosporium (3), Geomyces (1), Penicillium (4), Trichoderma (1) и один зигомицет Rhizopusstolonifer (рис. 1).
Как видно, наибольшее количество грибов было обнаружено в гребешке, собранном в акватории у о. Рикорда. Наиболее широко представленными были роды Penicillium и Aspergillus (рис. 1). В заливе Восток род Aspergillus был представлен всего одним видом — Aspergillus nidulans. Роды Acremonium и Alternaria также сравнительно широко представлены, хотя и не во всех обследованных акваториях. Зигомицеты из рода Mucor (4 вида) были обнаружены только в моллюсках из акватории у о. Рикорда. Мукоровые грибы для жизнедеятельности требуют легко усваиваемую органику [14]. Почему же тогда мукоровые грибы не были обнаружены в моллюсках из Амурского залива? И почему по видовому богатству грибов — ассоци-антов моллюсков Амурский залив уступает акватории у о. Рикорда? По видимому, это связано с тем, что в Амурском заливе биогенные вещества имеют антропогенное происхождение, в то время как в акватории у о. Рикорда они, в основном, образуются из-за жизнедеятельности большого количества культивируемых двустворчатых моллюсков. Кроме того, в Амурском заливе присутствуют тяжелые металлы (Cd, Ni, Mn) в более высокой концентрации [15].
Из общего числа видов грибов только два вида были общими для всех обследованных районов (рис. 2): Geomycespannorum и Penicillium simplicissi-mum. Geomyces pannorum — вид, широко распространенный как в почвах, так и в морских грунтах [16, 17]. Он обладает широким спектром термотолерантности, способен развиваться в антарктическом регионе при низких температурах [18]. Вид Penicillium simplicissimum также широко распространен в грунтах наземных и морских местообитаний, выделен из морских губок [19]. Он продуцирует вторичный метаболит шеринин, обладающий противораковой активностью [20].
Комплексы грибов — ассоциантов приморского гребешка из Амурского залива и акватории у о. Рикорда оказались наиболее сходными — 11 общих видов. Данные виды относятся к группе анаморфных грибов: Acremonium charticola, Acremonium roseogriseum, Aspergillus fumigatus, Aspergillus ochraceus, Aspergillus wentii, Gliomastix murorum, Penicillium chrysogenum, Phialophorophoma litoralis,
№
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
ой состав комплексов мицелиальных грибов I Петра Великого Японского моря
ассоциантов приморского гребешка из различных районов
Виды грибов Районы сбора моллюсков
Амурский залив о. Рикорда залив Восток
Acremonium charticola (Lindau) W. Gams + +
Acremonium breve (Sukapure et Thirum.) W. Gams +
Acremonium fusidioides (Nicot) W. Gams +
Acremonium roseogriseum (S.B. Saksena) W. Gams + +
Alternaria alternata (Fr.) Keissl. + +
Alternaria litorea (Pivkin et Zvereva) E.G. Simmons + +
Alternaria tenuissima (Fr.) Wiltshire +
Aphanocladium album (Preuss) W. Gams +
Aureobasidiumpullulans ( de Bary) G. Arnaud +
Aspergillus awamori Nakaz. +
Aspergillus candidus Link +
Aspergillus flavus Link +
Aspergillus foetidus Thom et Raper +
Aspergillus fumigatus Fresen. + +
Aspergillus lanosus Kamal et Bhargava +
Aspergillus nidulans (Eidam) G. Winter +
Aspergillus niger v. Tiegh. +
Aspergillus ochraceus G. Wilh. + +
Aspergillus repens (Corda) Sacc. +
Aspergillus terricola Marchal et fi.J. Marchal +
Aspergillus ustus (Bainier) Thom et Church +
As
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.