ОНТОГЕНЕЗ, 2007, том 38, № 4, с. 313-320
УДК 591
ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ КОНФЕРЕНЦИИ МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ ИНСТИТУТА БИОЛОГИИ РАЗВИТИЯ ИМ. Н.К. КОЛЬЦОВА РАН
(29 НОЯБРЯ 2006 г.)
ФОРМИРОВАНИЕ СВЯЗЕЙ МАММИЛЛЯРНЫХ ТЕЛ В ПРОЦЕССЕ ПЕРИНАТАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ У КРЫС
© 2007 г. Е. В. Алпеева, И. Г. Макаренко
Группа оптических методов исследования
Маммиллярные тела (МТ), расположенные в вентральной части заднего гипоталамуса, являются важным компонентом круга Пейпеца, что обеспечивается их многочисленными связями с лимбическими структурами мозга. У взрослых грызунов подробно описаны крупные миелинизи-рованные эфферентные тракты: маммилло-тала-мический и маммилло-тегментальный. Волокна ядер покрышки среднего мозга, иннервирующих МТ, образуют маммиллярную ножку. Афферентные и эфферентные волокна МТ проходят в составе свода и продольного пучка переднего мозга, однако сведения о развитии этих проводящих систем немногочисленны и не систематизированы. Цель настоящего исследования - выяснить, на каких стадиях онтогенеза происходит формирование основных проводящих путей, связывающих МТ с лимбическими структурами мозга.
Исследование проводили на фиксированном мозгу крыс с 14.5 дня эмбрионального (Э14,5) по 11-е сут постнатального (П11) развития с помощью метода диффузии карбоцианинового красителя 1,1'-диоктадецил-3,3,3',3'-тетраметилиндо-карбоцианина перхлората (Dil) по мембранам нейронов. Маркер наносили на МТ и покрышку среднего мозга и после инкубации в фиксаторе
выявляли в мозгу тела нервных клеток и нервные волокна, содержащие флуоресцентную метку.
Маммилло-тегментальный тракт обнаруживается уже на Э14,5. Маммилло-таламический тракт, волокна которого являются коллатераля-ми аксонов маммилло-тегментального тракта, начинает развиваться позже и к Э21 подрастает к передней группе ядер таламуса, где обнаруживаются первые меченые терминали. На П10 аксоны маммилло-таламического тракта образуют густую сеть терминальных ветвлений в ядрах переднего таламуса: переднемедиальном, передне-вентральном и переднедорсальном. Нейроны покрышки среднего мозга, посылающие аксоны в МТ, выявляются на Э20, а к П8 они группируются в виде двух ядер покрышки: вентрального и дорсального. Меченые волокна выявляются на П11 в составе свода, однако DiI-положительные нейроны в гиппокампе на более поздних сроках постнатального развития не обнаруживаются, что является неожиданным фактом и требует дополнительных исследований.
Работа поддержана РФФИ (проект № 04-0448073).
ОСОБЕННОСТИ СЕЛЕКЦИИ ТИМОЦИТОВ НА РАННИХ ЭТАПАХ ИХ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ В ПЕРИНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ КРЫС
© 2007 г. М. А. Афанасьева
Лаборатория гистогенеза Предшественники Т-лимфоцитов на ранних антигенов, и в этапах дифференцировки в тимусе подвергаются позитивной и негативной селекции. Не прошедшие селекцию предшественники подвергаются апоптозу. При негативной селекции элиминируются клетки, распознающие аутоантигены. Механизмы представления аутоантигенов в тимусе до настоящего времени мало изучены, а данные о становлении этого процесса в раннем онтогенезе практически отсутствуют. В отличие от тимуса в периферических органах и тканях иммунной системы происходит представление чужеродных
этом процессе участвуют иммунные протеасомы.
Цель нашей работы - проверка предположения об участии иммунных протеасом в представлении аутоантигенов в тимусе, а также изучение становления процесса негативной селекции в раннем онтогенезе. Количественную оценку экспрессии субъединиц иммунных протеасом LMP7 и LMP2 в тимусе проводили с помощью Вестерн-блоттинга в пре- и постнатальном онтогенезе у крыс. Распределение иммунных протеасом в клетках тимуса анализировали с помощью имму-
ногистохимии. Параллельно оценивали динамику уровня апоптоза в тимусе на тех же этапах онтогенеза с помощью проточной цитофлуоримет-рии. Иммуногистохимически показано, что экспрессия иммунных протеасом наблюдается не в тимоцитах, а вероятнее всего, в эпителиальных и дендритных клетках тимуса, которые являются антигенпредставляющими для Т-клеток. Этот факт дает основание полагать, что негативная селекция в тимусе происходит с участием иммунных протеасом. Обе иммунные субъединицы иммунных протеасом обнаруживаются в тимусе, начиная с 18-го эмбрионального (Э) дня развития. Причем количество этих субъединиц на Э18 невелико и возрастает к Э21, а затем остается на том же уровне до 19-х сут постнатального (П19) развития. В то же время на Э18 в тимусе регистрируется высокий уровень апоптоза, который снижается к Э21 и далее остается неизменным до П30.
Полученные данные свидетельствуют о том, что негативная селекция в тимусе может происходить у плодов уже на Э18, а к Э21 усиливается до уровня, характерного для постнатальных животных. Высокий уровень апоптоза, наблюдаемый на Э18, связан, по-видимому, не столько с процессами негативной селекции, сколько с активной миграцией предшественников Т-лимфоцитов в тимус в этот период, а как известно, количество локу-сов для мигрирующих предшественников в тимусе ограничено. Таким образом, впервые была показана экспрессия иммунных протеасом в тимусе, участвующих в представлении аутоантигенов при негативной селекции, в перинатальном онтогенезе. Становление процесса негативной селекции у крыс происходит еще в пренатальном онтогенезе.
Работа поддержана РФФИ (проект № 05-0448830).
ИССЛЕДОВАНИЕ С ПОМОЩЬЮ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ПОПУЛЯЦИОННОЙ СТРУКТУРЫ ГАММАРИД БАССЕЙНОВ РЕК ВОЛГА И ДОН
© 2007 г. Ю. Брагин, Н. С. Мшге
Лаборатория биохимической эмбриологии
На протяжении, по крайней мере, 10 тыс. лет существовала изоляция между амфиподами Каспийского и Азовско-Черноморского бассейнов и, соответственно, рек, в них впадающих. Многие виды амфипод, обитающие в обоих бассейнах, оказались разделены на две изолированные популяции. Для видов амфипод, ареалы которых включают в себя б0льшую часть нижнего течения Волги и Дона, эта изоляция прервалась после строительства Волго-Донского канала.
Без помощи молекулярно-генетических методов было обнаружено проникновение в Дон вида Dikerogammarus caspius, а также расширение ареала (по сравнению с ранее описанным) вида Gmelina pusilla. С помощью секвенирования ми-тохондриального гена CO1 было выявлено проникновение в Дон из Волги особей видов Pontoga-mmarus crassus, Pontogammarus robustoides, Ponto-gammarus (Euxinia) maeoticus и Dikerogammarus
haemobaphes. Для видов Pontogammarus crassus и Dikerogammarus haemobaphes было показано совместное обитание особей с каспийским и азовско-черноморским типами строения гена CO1, что, по-видимому, свидетельствует об отсутствии репродуктивной изоляции между аборигенными и экзогенными особями. Все особи вида Pontogammarus maeoticus, отобранные из Дона, обладали каспийским типом строения гена CO1. Также было обнаружено, что строение этого гена у каспийской и азовско-черноморской популяций этого вида отличается значительно сильней, чем у других исследованных нами видов - на 6% нуклеотид-ных замен. Это указывает на существование репродуктивной изоляции между каспийской и азовско-черноморской формами этого вида.
Работа поддержана РФФИ (проект № 04-04-48949а).
МОРФОЛОГИЧЕСКИИ АНАЛИЗ ЛЕТАЛЬНЫХ ЭМБРИОНОВ, МУТАНТНЫХ ПО ГЕНУ leg-arista-wing complex У Drosophila melanogaster
© 2007 г. Н. В. Бурдина
Лаборатория молекулярной биологии развития
Мутации в транс-регуляторном гене дрозофилы leg-arista-wing complex (lawc) обладают широким плейотропным эффектом и приводят к го-меозисной трансформации аристы в тарзус, нарушению сегментации торакальных ног, формированию обрезанных расставленных крыльев и изменению паттерна механосенсорных ор-
ганов. Анализ компьютерной базы данных, содержащей сиквенс генома дрозофилы, показал, что часть клонированной последовательности гена lawc лежит на расстоянии примерно 10 т.п.н. от ORF - недавно обнаруженного гомолога гена человека, кодирующего фактор базовой транскрипции TBP related factor 2 (trf2).
В лаборатории Ю.Г. Ильина (ИМБ РАН) были установлены реальные границы и экзон-интрон-ная структура гена trf2 и показано, что этот ген входит в состав гена lawc. Таким образом, наличие гомолога у человека делает актуальным исследование функций гена lawc/trf2 у дрозофилы. Для конкретизации функции гена очень важно получение его мутаций с экстремальным феноти-пическим проявлением, поэтому в лаборатории была создана коллекция летальных мутаций этого гена, нарушающих структуру его регуляторно-го района (инверсии, делеции, инсерции), а также получены (Bloomington Stock Center, США) трансгенные инсерционные линии, имеющие летальные мутации в районе гена lawc. Установлены стадии летальности лабораторных и музейных
lawc-леталей, проведен морфологический анализ кутикулы погибших эмбрионов, исследован паттерн экспрессии генов-маркеров сегментации и периферической нервной системы у мутантных эмбрионов.
В результате были установлены четыре основных класса морфологических аномалий эмбрионального развития у lawc-мутантов: нарушение поляризации, морфогенетические дефекты, нарушение сигнальных путей в эпидермисе и нарушение органогенеза. Высказано предположение об участии гена 1омсНГ2 в процессах межклеточной адгезии и формирования клеточного матрикса.
Работа поддержана РФФИ (проект № 05-0449246).
АНАЛИЗ АДИПОГЕННОИ И ОСТЕОГЕННОИ ДИФФЕРЕНЦИРОВОК МЕЗЕНХИМНЫХ РОДОНАЧАЛЬНЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА И ЭМБРИОНАЛЬНОЙ ПЕЧЕНИ КРЫСЫ in vitro
© 2007 г. М. Н. Кожевникова, В. И. Старостин*, А. С. Микаелян
Лаборатория молекулярно-генетических основ онтогенеза *Лаборатория гистогенеза
Мезенхимные родоначальные клетки, присутствующие в кроветворной строме на разных этапах онтогенеза, обладают статусом полипотент-ных стволовых клеток. По своим потенциям к дифференцировке мезенхимные стволовые клетки близки к клеткам эмбриональной мезенхимы. Они способны осуществлять адипо-, остео- и хондроген-ную дифференцировки. Культура мезенхимных ро-доначальных клеток является экспериментальной моделью для изучения механизмов самоподдержания и направленной дифференцировки.
Цель нашей работы - анализ экспрессии маркеров адипогенной и остеогенной дифференци-ровок
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.