БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ
Том 20 * № 1 * 1994
УДК 547.598'458.22/466.057
© 1994 Л. А. Болтина, С. А. Рыжова, Е. В. Васильева,
Г. А. То лети ков
ТРАНСФОРМАЦИЯ ГЛИЦИРРИЗИНОВОЙ кислоты IV*. СИНТЕЗ ТРИТЕРНЕНОВЫХ ГЛИКОПЕПТИДОВ
Институт органической химии Уфимского научного центра РАН
Ключевые слова: ¡З-глицирризиновая кислота, гликопептиды.
Осуществлен синтез новых тритерпеновых гликопептидов — производных Р"глицирризиновой кислоты с использованием бензило-вых (4-нитробензиловых) эфиров ¿--аминокислот. Активацию карбоксильных групп гликозида осуществляли с помощью М-гидроксибен-зотриазола-^Н'-дициклогексилкарбодиимида. Деблокирование полученных соединений проводили каталитическим гидрогенолизом над
Ранее нами были синтезированы тритерпеновые гликопептиды — производные (З-глициррнзиновой кислоты (GA) — основного ингредиента корня солодки голой и уральской (Glycyrrhizae glabra и Glycyrrhizae uralensis), содержащие фрагменты метиловых эфиров L- и £>-аминокислот и представляющие интерес для медицины в качестве иммуномодуляторов и анти-ВИЧ-агентов [1—4].
В настоящей работе описывается синтез тритерпеновых гликопептидов (IV), полученных с использованием бензиловых (4-нитробензиловых) эфиров L-
*Сообщение ill см. [2]. Сокращения: GA — p-глицирризиноваи кислота, HOBt — N-гидроксибенз-триазол.
Pd/C.
zs Me
so COR
ОН
NBZ = ^-NO^jH^CH^
Карбоксилзащищенные гликопептиды глицирризиновой кислоты
Соединение Т. пл., 0 С [а]!?, град (с,МеОН) УФ-спектр, ?*пах, нм (lg е)*
(Illa) 185—187 (разл.) +40(0,01); EtOH 250 (4,14)
(III6) 123—125 (разл.) + 35 (0,01) 251 (4,29)
(Шв) — + 35 (0,01) 255 (4,24)
("ir) — . + 32 (0,025);ЕЮН 218 (5,44); 262 (4,42)
(Шд) — +30 (0,02) 250 (4,11)
(Ше) — + 29 (0,27) 248 (4,54)
* УФ-спектр соединения (Ша) — в метаноле, остальных — в этаноле.
аминокислот и последующим удалением защитных группировок каталитическим гидрогенолизом в мягких условиях.
Активацию карбоксильных групп молекулы GA (I) проводили с помощью N-гидроксибензотриазола (HOBt) и НЫ'-дициклогексилкарбодиимида (DCC) без предварительной защиты гидроксильных групп углеводной цепи гликозида. Образовавшийся трис-1Ч-оксибензотриазоловый эфир GA(II) без выделения конденсировали с гидрохлоридами, бензолсульфонатами или тозилатами бензиловых (4-нитробензиловых) эфиров L-аминокислот в присутствии небольшого избытка триэтиламина или N-метилморфолина в тетрагидрофуране или диоксане. Таким образом получали карбоксизамещенные гликопептиды (Ша—е) с выходами, близкими к количественным. Оптическая активность и данные УФ-спектров этих соединений приведены в табл. 1.
Каталитический гидрогенолиз соединений (Ша—е) над 10% Pd/C в 75% уксусной кислоте привел к деблокированным гликопептидам (IVa—е) с выходами 65—75%. Соединения (IVa—е) выделены в индивидуальном состоянии хроматографией на силикагеле L и охарактеризованы ИК-, УФ-, 13 С -ЯМР-спектрами (табл. 2—5). Данные элементного анализа гликопептидов (IVa—е) удовлетворительно соответствуют теоретическим значениям.
В ИК-спектрах гликопептидов GA (III) присутствуют максимумы поглощения, соответствующие группам NH (1530—1550 см-1, амид II) и С=0 (1650—1660 см-1). В ИК-спектрах деблокированных продуктов (IV) отсутствуют характеристические максимумы поглощения сложноэфирных бензильных (нитро-бензильных) групп при 1740 см-1, а появляются максимумы поглощения карбоксильных групп (1710—1720 см-1). ИК-спектры соединений (IV6) и( IVr) содержат также максимумы поглощения ароматических циклов аминокислотных фрагментов (1500 и 1610 см"1).
УФ-спектры всех соединений содержат максимумы поглощения, характерные дляфрагмента 12-ен-11-онаагликона ~ 250 нм[ 5].
В табл. 3—5 приведены химические сдвиги 13С-ЯМР для соединений (IVa—е). Отнесение сигналов С-атомов гликопептидов GA осуществлено на основании данных спектров 13С-ЯМР гликозида (I) и его производных [ 6—8]. Спектры исследованных гликопептидов (углеводная и агликоновая части) аналогичны спектрам 13С-ЯМР ß-глицирретовой кислоты и исходного гликозида [ 6, 7]. Сигналы аномер-ных атомов С-1' и С-1" обнаружены в области слабого поля .при 104—105 м. д. (табл. 5). Спектры гликопептидов (IV6, г) содержат в области слабого поля дополнительные сигналы ароматических атомов углерода (116—157 м. д., табл. 4).
Деблокированные гликопептвды глицирризиновой кислоты
Соединение град (с, ЕЮН) УФ-спектр, А,щах, нм (^ е) (EtOH)
(1Уа) + 65 (0,01) 249,5 (4,02)
(1У6) 4-65(0,01) 248 (4,14)
(1Ув) + 70 (0,01) 247,5 (4,14)
(1Уг) + 45 (0,03) 227 (4,49);
253 (4,35)
(1Уд) +45 (0,025) 249,5 (4,11)
(1Уе) + 35 (0,025) 249,5(3,90)
Таблица 3
Химические сдвиги сигналов аглихоновой части в спектрах |3С-ЯМР гликопептидов (б, м. д.,
СОзСЩ 25° С, 75,5 МГц)
Атом углерода (1Уа) (ЗУб) (1Ув) (1Уг) (1Уд) (1Уе)
С1 40,32 40,32 40,52 40,29 40,09 40,26
С2 27,67 27,62 27,87 27,60 27,42 27,58
сз 90,63 90,60 90,66 90,77 89,92 90,61
С4 40,70 40,65 40,60 40,64 40,09 40,59
С5 56,43 56,46 56,68 56,36 56,18 56,30
С6 18,43 18,48 18,72 18,44 18,54 18,34
С7 33,85 33,86 34,11 33,93 33,79 33,74
С8 44,61 44,33 44,91 44,52 44,56 44,44
С9 63,14 . 63,13 63,42 63,12 63,08 63,01
СЮ 38,07 38,05 38,33 38,05 38,07 37,95
СП 202,67 202,73 202,89 202,82 202,52 202,54
С12 129,09 129,59 129,22 129,77 129,30 129,11
С13 171,30 171,33 171,43 171,33 171,39 171,43
С14 46,76 46,73 47,04 46,70 46,69 46,73
С15 27,48 27,45 27,67 27,43 27,03 27,36
С16 27,45 27,45 27,67 28,46 28,79 • 28,36
С17 32,90 32,81 33,24 32,98 32,92 32,76
С18 48,20 48,20 48,44 48,20' 48,18 48,15
С19 42,64 42,60 42,71 42,48 42,44 42,43
С20 44,92 44,76 45,17 44,73 44,80 44,72
С21 32,14 32,10 32,29 31,96 32,00 32,46
С22 38,65 38,41 39,28 39,04 38,07 38,61
С23 28,41 28,44 28,66 28,97 28,79 28,80
С24 17,00 17,02 17,34 17,05 17,00 17,03
С25 17,30 17,30 17,36 17,32 17,15 17,32
С26 19,36 19,36 19,61 19,35 19,35 19,34
С27 23,74 23,76 23,73 23,78 23,80 23,79
С28 29,08 28,97 29,04 29,23 29,20 29,14
С29 29,24 29,31 29,47 29,31 29,28 29,32
СЗО 178,56 178,50 180,69 180,47 179,00 178,86
Химические сдвиги сигналов аминокислотных фрагментов в спектрах 13С-ЯМР глихо-пептидов (б, м. д., С0}00, 25° С; 75,5 МГц)
Аминокислоты c1 С2 СЗ С4 С5 С6
3 2 ch3chnh 1 176,27 175,52 49,05 48,86 18,26 18,13
соон 175,32 48,86 17,53
3 2 c6h5ch2chnh СбН5
175,13 54,87 37,92 138,90 128,10 130,58
1 174,14 54,64 37,77 137,97 128,04 130,50
соон 172,57 54,44 37,25 137,66 127,78 130,29
5 СНз 4 3 2 >CHCH2CHNH 175,93 173,14 52,30 52,20 40,95 40,84 27,29 26,82 22,48 22,33 24,13 23,73
6 ✓ 1 CHj 1 173,00 52,15 40,65 26,30 21,00 23,42
СООН
3 2 СбШОН
C6H4CH2CHNH 178,77 56,36 38,05 116,98 131,64 157,67
I 1 178,44 55,31 37,77 116,53 131,50 157,41
он соон 175,18 54,76 37,58 116,45 131,22 157,23
5 4 3 7 hoocch2ch2chnh 176,68 56,29 27,76 31,24 173,74
1 174,98 56,18 27,60 31,00 173,16
соон 174,76 56,09 27,42 29,12 172,90
5 4 3 2 CH3SCH2ch2chnh 178,86 52,92 31,95 31,28 17,03
1 177,50 52,72 31,72 30,95 16,86
соон 173,10 52,72 31,42 30,58 15,42
Таблица 5
Химические сдвиги сигналов углеводной части молекулы глнкопептидов (6, м. д., СВзОО, 25° С;
75,5 МГц)
Атом углерода (IVa) (IV6) (IVa) (IVr) (IVA) (IVe)
С Г 104,87 104,75 105,28 104,63 104,70 104,75
С2' 81,84 81,28 84,00 81,42 82,80 79,82
СЗ' 75,88 75,90 75,99 75,87 75,90 75,86
С4' 73,50 73,62 73,91 73,48 73,30 73,74
С5' 77,21 77,26 77,47 77,25 77,30 . 77,04
С6' 171,30 171,33 171,60 172,18 170,68 172,55
С1" 105,06 104,85 105,42 104,87 104,91 104,85
С2" 75,62 75,18 75,99 76,02 75,77 75,86
СЗ" 76,96 76,02 76,27 76,02 77,11 76,14
С4" 73,50 73,54 73,34 73,68 73,30 73,32
С5" 77,77 77,93 77,60 77,91 79,42 77,55
С6" 172,84 172,57 172,30 173,19 172,38 177,55
Бензидовые эфиры ¿.-аминокислот
Соединение Выход, т. пл., 0 С [а]в, град. Литературные данные
% (растворитель)
т. пл., °С [о]о, град, (растворитель) Ссылка
H-Ala-OBzl* 48,4 113—115 . (этанол— эфир) —7,2 (с 0,05; Н20) 114 —6,8 (2%; то) 9
H-Glu(OBzl)-OBz.l* 56,7 145—146 (метанол— эфир) I g 2 (с 0,03; МеОН) 144— 145 + 7,6 (2%; МеОН) 9
H-Phe-OBzl** 62,5 205—206 (этанол— эфир) —23,6 (с 0,04; ШО) 203 —22,5 (0,25 н. НС1) 12
H-Met-GBzl* 51,3 +5,0 (с 0,11; EtOH) 202 И
* Эфиры аминокислот выделены в виде солей с я-толуолсульфокислотой. ** Гидрохлорид.
Экспериментальная часть
Для ТСХ применяли пластинки Silufol (Chemapol, ЧСФР) и системы растворителей хлороформ — метанол — вода, 45: 10: 1 (А), 37: 10: 1 (Б); хлороформ — этанол, 5 : 1 (В), 4 : 1 (Г), 10:1 (Д); хлористый метилен — метанол — вода, 45: 10 : 1 (Е). Вещества обнаруживали 20% раствором фосфорно-вольфрамовой кислоты в этаноле (95%) с последующим нагреванием при 100—120° С в течение 2—3 мин. Колоночную хроматографию проводили на силикагеле L (40/100 и 100/250 мкм) (Chemapol, ЧСФР).
ИК-спектры записаны на спектрофотометрах UR-20 и Specord М 80 в пасте с вазелиновым маслом. Электронные спектры поглощения снимали на спектрофотометре Specord М 40 в метаноле или этаноле. Температуры плавления определяли на микростолике Boetius. Оптическую активность измеряли на поляриметре Perkin — Elmer 24 МС в трубке длиной 1 дм.
Спектры 13С-ЯМР снимали на приборе Bruker АМ-300 (75 МГц) с рабочей частотой 75,5 МГц в дейтерометаноле, внутренний стандарт — тетраметилсилан.
Тетрагидрофуран и диоксан выдерживали сутки над КОН и перегоняли над Na. Триэтиламин и N-метилморфолин сушили над КОН и перегоняли. Растворители упаривали в вакууме при температуре < 50° С.
Для работы использовали (3-глицирризиновую кислоту с содержанием основного вещества 95%, полученную по методике [2], N, N'-дицикл огексилкар--бодиимид (SDS; Ferak, Германия), L-аминокислоты (Reanal, Венгрия), бензолсуль-фонаты 4-нитробензиловых эфиров L-тирозина и L-лейцина марки ч., перекристаллизованные из метанола — эфира. Тозилаты бензиловых эфиров L-аланина, L - г л у та м и н о в о й кислоты и L-метионина получали по методике [9, 10]. Гидрохлорид бензилового эфира L-фенилаланина синтезировали по способу [11]. Перекристаллизацию полученных соединений проводили из смеси эфир — абсолютный этанол или метанол
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.