m
БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ, 1995, том 21, № 6, с. 468 - 473
УДК 542,918.022:543.422.25
ТРИТЕРПЕНОВЫЕ ГЛИКОЗИДЫ Hederá táurico XIII*. СТРОЕНИЕ ТАУРОЗИДОВ St-Ix И St-I2 ИЗ СТЕБЛЕЙ ПЛЮЩА КРЫМСКОГО
© 1995 г. В. И. Гришковец#, О. Я. Цветков, А. С. Шашкой1, В. Я. Чирва
Симферопольский государственный университет, 333036, г. Симферополь, Ялтинская, 4 1 Институт органической химии им. Н.Д. Зелинского РАН, Москва Поступила в редакцию 28.06.94 г.
Из стеблей плюща крымского Hederá taurica Carr. (сем. Araliaceae) выделены таурозиды St-¡, и St-I2, представляющие собой соответственно известный 3-0-[р-0-глюкопиранозил-(1—«-2)-0-a-L-apa6H-Н^пиранозил]-28-0-[а-£-рамнопиранозил-(1—►4)-0-р-0-глюкопиранозил-(1—«-6)-0-р-£>-глюкопи-ранозил]хедерагенин и новый 3-0-[а-£-рамнопиранозил-(1—»-2)-0-Р-£-глюкопиранозил]-28-0-[(¿-¿-рамнопиранозил-(1—►4)-0-Р-0-глюкопиранозил-(1—>"6)-0-р-/)-глюкопиранозил]хедерагенин.
Ключевые слова: Hederá taurica Carr., Araliaceae; тритерпеновые гликозиды; таурозиды; глико-зиды хедерагенина; 'Н- и ,3С-ЯМР.
С целью поиска новых источников тритерпе-новых гликозидов как соединений с потенциальной биологической активностью нами продолжено изучение гликозидного состава стеблей плюща крымского Hederá taurica Carr. (сем. Araliaceae).
Ранее нами было описано выделение из стеблей плюща крымского гликозидной фракции St-I [2]. В настоящей работе проведено ее разделение на индивидуальные таурозиды St-I, и St-I2 многократным хроматографированием на силикагеле (при элюировании системой растворителей хло-роформ-этанол-вода) с последующей дополнительной очисткой от примеси фенольных соединений путем ацетилирования, хроматографичес-кой очистки полных ацетатов на силикагеле и последующего дезацетилирования.
В результате полного кислотного гидролиза в составе таурозида St-I, идентифицированы сахара глюкоза, арабиноза, рамноза и агликон хедераге-нин. Прогенин таурозида St-I,, полученный расщеплением ацилгликозидной связи (у С-28) щелочным гидролизом, хроматографически идентичен заведомому образцу 3-0-[|3-£>-глюкопиранозил-(1—1-2)-0-а-£-арабинопиранозил]хедерагенину (хе-дерозиду D2 из ягод плюща крымского) [3]. Окончательное установление структуры St-I, проведено с применением ЯМР-спектроскопии. Так, в его ПМР-спектре (см. "Экспериментальную часть") наблюдаются пять сигналов аномерных протонов, а в 13С-ЯМР-спектре - пять сигналов аномерных С-атомов. Следовательно, таурозид St-I, явля-
# л
Автор для переписки.
* Часть XIlcM.il).
ется бисдесмозидным пентаозидом хедерагенина, и, с учетом строения его прогенина, можно предположить, что по карбоксильной группе аглико-на находится трисахаридный фрагмент строения Rhaa—*-4GlcP—►6Glcp, как наиболее часто встречающийся в гликозидах растений семейства аралиевых [2].
Применение методики COSY (Correlation Spectroscopy - корреляционная спектроскопия) к отнесению сигналов скелетных протонов моноса-харидных остатков в 'Н-ЯМР-спектре St-I, было малоэффективным ввиду сильного перекрывания кросс-пиков мультиплетов. Более успешным оказалось описанное нами ранее [2] применение одномерного варианта НОНАНА-эксперимента (HOmonuclear HAjtmann-HAhn polarisation transfer -гомоядерный перенос поляризации по принципу Хартмана-Хана) [4] с возбуждением аномерных протонов селективными DANTE-импульсами (Delays Alternating with Nutations for Tailored Excitation - чередование задержек и нутаций для "скроенного" возбуждения) [5], что позволило определить сигналы трех моносахаридных остатков Glc'", Glc"" и Rha...... Для остатков Glc" и Ara'
селективность DANTE-импульса недостаточна для раздельного возбуждения их аномерных протонов (с Ô 4.92 и 4.97 м. д.), так что в обоих случаях удалось выявить лишь суммарно сигналы скелетных протонов этих моносахаридных остатков. Применение методики двойного гомоядер-ного резонанса с пониженной мощностью насыщающего радиочастотного поля в разностном варианте [6] начиная с протонов с Ô 4.30 и 3.60 м. д., однозначно отнесенных по положению и
ТРИТЕРПЕНОВЫЕ ГЛИКОЗИДЫ Hederá taurica 469
Рис. 1. Фрагмент двумерного спектра ЕЮЕЭУ таурозида БЫ^ Цифрами обозначены кросс-пики между сигналами протонов: / - (3-5)"", 2 - (6-5)", 3 - (3-4).....,4- (2-3)....., 5 - (6-6)"', 6 - (5-3)....., 7-(1-3)"", 8- (1-5)"", 9 - (1-3)', 10 -(1-5)',
11 - (1-2)", 12 - (1-5)", 13 - (1-2)....., 14 - (12-18), 15 - (1-3)"', 16- (1-5)'".
St-I¡ подтверждает вышеуказанные типы связей, поскольку наблюдаются кросс-пики протонов
Н-1 Glc" - Н-2 Ara', Н-1 Rha.....- Н-4 Glc"", Н-1 Glc"" -
Н-6 Glc'" (рис. 1).
Анализ 13С-ЯМР-спектра таурозида St-I, (табл. 1 и 2) выявил, что хим. сдвиги сигналов его агликон-ной части совпадают с литературными данными для 3,28-дигликозилированного хедерагенина [8]; остальные отнесения выполнены путем сопоставления с хим. сдвигами сигналов |3С-атомов для фрагментов GlcP—2Атаа [3] и Rhaa—^4GlcP -6GlcP [8]. Таким образом, таурозид St-I, представляет собой 3-0-[р-£)-глюкопиранозил-(1—<-2)-0-а-£-арабино-пиранозил]-28-0-[а-/,-рамнопиранозил-( 1—*-4)-0-(3-£>-глюкопиранозил-(1—^6)-0-Р'0-глюкогшрано-зил]хедерагенин.
Ранее гликозиды аналогичного строения выделялись из растений Fatsia japónica [9, 10], Caltha polypetala [11] и Pulsatilla campanella [12]. Детальное определение типа связи во фрагменте Glcp—"-2Ага" гликозида St-I, из Hederá taurica
характеру расщепления к Н-2 остатка Ага' и Н-5 остатка Glc", позволило выявить остальные сигналы этих моносахаридов и тем самым подтвердить их природу как ß-глюкопиранозу и а-араби-нопиранозу.
Типы связей в обеих углеводных цепях St-I, установлены анализом 1Н-ЯМР-спектра его полного ацетата, отнесения сигналов в котором выполнены с помощью экспериментов по двойному го-моядерному резонансу [6] и COSY. При этом сигналы протонов Н-2', Н-4"" и Н-6'" имеют относительно сильнопольное положение (в области 3.5 - 4.2 м. д.), что определяет типы связей 1—^2, 1—»-4 и 1—>-6 в остатках Ara', Glc"" и Glc'" соответственно. Остатки Glc" и Rha.....по положению сигналов скелетных протонов являются незамещенными.
Анализ двумерного спектра ROES Y (Rotating frame nuclear Overhauser Effect SpectroscopY - спектроскопия ядерного эффекта Оверхаузера во вращающейся системе координат) [7] гликозида
Таблица 1. Химические сдвиги (8, м. д, 13С агликонов фрагмента таурозидов (C,D5N,70oC)
) сигналов атомов St-I, (I) и St-I2 (II)
С-Атом I II С-Атом I II
1 39.4 39.3 16 24.4 24.0
2 26.7 26.6 17 47.8 47.2
3 83.3 81.7 18 42.3 41.9
4 43.9 43.7 19 47.0 46.4
5 48.3 48.1 20 31.3 30.9
6 18.8 18.4 21 34.7 34.2
7 33.1 32.7 22 33.4 32.9
8 40.5 40.1 23 65.2 64.2
9 48.7 48.4 24 13.8 14.3
10 37.5 37.0 25 16.7 16.4
11 24.0 23.6 26 18.2 17.7
12 123.4 123.1 27 26.4 26.4
13 144.8 144.4 28 177.6 176.8
14 42.8 42.4 29 33.7 33.3
15 28.8 28.5 30 24.4 24.0
7 аблица 2. Химические сдвиги (5, м. д.) сигналов атомов
'•С углеводных фрагментов таурозидов St-I, (I) и St-I2
(II) (C2D5N, 70°С)
С-Атом I II С-Атом 1 II
А га Glc Glc Glc
Г 104.2 104.7 Г" 96.0 95.8
2' 80.2 79.8 2'" 74.0 74.0
3' 73.6 77.7 3"' 79.4 78.7
4' 68.7 72.2 4'» 71.1 70.8
5' 65.3 78.0 5"' 78.1 78.1
6' 62.8 6"' 69.6 69.3
Glc Rha Glc Glc
1" 105.2 101.7 1"" 104.7 104.9
2" 76.0 72.3 2"" 75.3 75.4
3" 78.3 72.6 3"" 76.7 76.6
4" 71.8 74.2 4-" 78.5 78.5
5" 78.1 69.7 5"" 77.1 77.2
6" 62.9 18.8 б"" 61.9 61.4
Rha Rha
1..... 102.9 102.8
2..... 72.5 72.6
з..... 72.7 72.7
4..... 74.0 74.0
5..... 70.8 70.5
6..... 18.7 18.7
проведено в связи с тем, что в перечисленных выше растениях содержатся также и изомерные гликозиды аналогичного состава с 1—«-4-связью между остатками глюкозы и арабинозы.
St-I, St-I2
В полном кислотном гидролизате таурозида St-I2 обнаружены рамноза, глюкоза и агликон хе-дерагенин. Прогенин таурозида St-I2, полученный щелочным гидролизом, также содержит остатки рамнозы, глюкозы и хедерагенина по результатам ТСХ-анализа кислотного гидролизата.
В 'Н-ЯМР-спектре полного ацетата St-I2 с использованием методов COSY и двойного резонанса идентифицированы сигналы пяти моноса-харидных остатков, два из которых - рамнозы и три - ß-глкжозы. По положению сигналов оба ос татка рамнозы являются концевыми. В области 3.5 - 4.1 м. д. кроме сигналов Н-5 всех моносахарид-ных остатков находятся сигналы Н-2 Glc', Н-4 Glc"" и Н-6 Glc'", что определяет типы замещения в этих остатках и структуру углеводных цепей Rhaa—►2Glc'3 и Rhaa—4GlcP—бС1сР. Поскольку сигнал аномерного протона Н-Г" остатка глюкозы, замещенной по C-6-атому, имеет хим. сдвиг в существенно более низком поле по сравнению с другими аномерными протонами, то именно он и соответственно трисахаридный фрагмент связаны ацилгликозидной связью с агликоном.
Типы связей и место локализации дисаха-ридного фрагмента подтверждены и спектром ROESY таурозида St-I2 (рис. 2), в котором отмечаются кросс-пики Н-Г-Н-2', Н-1.....-Н-4"", Н-Г'-Н-б'"
и Н-Г-Н-3 агликона. Положение сигнала протона Н-3 найдено из спектра COSY таурозида St-I2, в котором наблюдаются два кросс-пика, соответствующие Н-3-Н-2а, е в высокопольной (1.5 - 2.5 м. д.) области.
Отнесения сигналов в 13С-ЯМР-спектре таурозида St-I2 выполнены путем сопоставления с литературными данными для 3,28-дигликозилирован ного хедерагенина [8], трисахаридного фрагмента Rhaa—-4GlcP—^6Glcß [8], для 2-О-гликозили-рованного остатка ß-D-глюкозы [13], концевого
6.0
5.5
5.0
4.5
4.0
3.5 м. д.
Рис. 2. Фрагмент двумерного спектра ЯОЕ8У таурозида ЯЫ,. Цифрами обозначены кросс-пики между сигналами протонов: 1 - (3-5)"", 2 - (4-3)"", 3 - (6-6)"", 4 - (4-2)"", 5 - (4-5)"", б - (6-6)', 7- (2-3)....., 8 - (6-6)'", 9 - (6-5)"", 10 - (5-3)",
//-(5-3)'"", /2-0-3)"", 13-(1-2)"", 14-(1-5)"", 75 — (1—2), /6-(1-5)', /7 — (1—2).....,18-(1-3)....., 19 -(1-3)"', 20 -(1-2)'",
21 -(1-5)'", 22 -(1-2)".
остатка рамнозы в дисахариде ЯЬа"—-2Агаа [8] и на основе эффектов гликозилирования [14]. Таким образом, таурозид 8М2 представляет собой 3-0-[а^-рамнопиранозил-(1—~2)-0-|3-£)-глюкопи-ранозил]-28-0-[а-£-рамнопиранозил-(1—>-4)-0-р-£>-глюкопиранозил-(1—- 6)-0-Р-£>-глюкопиранозил]хе-дерагенин и
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.