РОССИЙСКИЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 2009, ТОМ 3(12), № 2
КРАТКОЕ СООБЩЕНИЕ
ЦИТОКИНЫ В ПРОГНОЗЕ РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО ТЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННОГО МОНОНУКЛЕОЗА У ДЕТЕЙ
© 2009 г. А.С. Левина, Г.Ф. Железникова, В.В. Иванова, И.В. Бабаченко, Н.Е. Монахова, Е.А. Мурина
ФГУ «НИИ детских инфекций Росздрава», Санкт-Петербург, Россия
Поступила: 08.10.2008 . Принята: 12.05.2009
На основании анализа результатов клинико-лабораторного обследования детей от 2 до 15 лет (п = 101) в острый период инфекционного мононуклеоза и катамнестического наблюдения за этими детьми в течение 3-х лет выявлены прогностические критерии рецидивирующего течения заболевания: слабая активация синтеза ФНОа, ИЛ-8, ИФНу при усиленной секреции ИЛ-4 — ци-токина Т-хелперов 2 типа.
Ключевые слова: инфекционный мононуклеоз, иммунный ответ, цитокины, дети
Инфекционный мононуклеоз (ИМ) — инфекционное заболевание, в большинстве случаев вызываемое вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ), характеризующееся поражением ре-тикулоэндотелиальной и лимфатической систем. ВЭБ пожизненно сохраняется в организме, и в ряде случаев инфекция может принимать хроническое рецидивирующее течение [1 — 3]. Основную роль в защите от острой ВЭБ-инфекции играют клеточные механизмы иммунитета, связанные с действием специфических СБ8 + и СБ4+ цитотокси-ческих Т-лимфоцитов [4, 5]. Менее значимы гуморальные факторы защиты, так как ВЭБ может инфицировать соседние клетки, проникая в них по цитоплазматическим мостикам и избегая действия нейтрализующих антител. Особенностью ВЭБ является способность блокировать многие факторы иммунной защиты, модифицируя иммунный ответ человека, в частности, ответ системы цитоки-нов [6, 7]. Многие исследователи связывают процесс хронизации с нарушением баланса между субпопуляциями СБ4+ Т-лимфоцитов-хелперов 1 (ТЫ) и 2 (1Ъ2) типов и изменением выработки различных цитокинов [8, 9]. Однако механизмы формирования рецидивирующего течения ВЭБ-инфекции остаются малоизученными. Не разработаны алгоритмы прогноза развития рецидивов после перене-
Адрес: 197022 Санкт-Петербург, ул. Проф. Попова, дом 9, Отдел капельных инфекций. Е-таП:го88п@таП.га
сенного ИМ.
Цель работы: выявить прогностические критерии рецидивирующего течения ИМ для дифференцированного назначения противовирусных и иммуномодулирующих препаратов при ИМ у детей.
Под наблюдением в течение 3-х лет находился 101 ребенок в возрасте от 2 до 14 лет, перенесший ИМ. Этиологическую диагностику в острый период заболевания проводили методом ИФА, выявляя антитела к антигенам ВЭБ — 1дМ к капсидному и 1дС к раннему (ЕА) и ядерному антигенам (НА), с использованием тест-системы «Вектор-Бест» (Новосибирск). Уровень цитокинов в сыворотке крови (ФНОа, ИФНу, ИЛ-1, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, рецепторного антагониста ИЛ-ф (РАИЛ)) определяли методом твердофазного ИФА с использованием стандартных систем производства ООО «Цитокин» (СПб) и «Протеиновый контур» (НИИ ОЧБ, СПб). Оценку пролиферативной активности Т-лимфоцитов выявляли в реакции бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) на фитогемагглюти-нин фирмы «Б11ео» (США). Фенотипирование лимфоцитов проводили в лимфоцитотоксиче-ском тесте с использованием моноклональных антител серии ИКО (НПЦ «Медбиоспектр», Москва). Концентрацию иммуноглобулинов определяли методом радиальной иммунодиф-фузии по МапеЫш с использованием моноспецифических антисывороток предприятия по производству бактерийных препаратов
Цитокины в прогнозе ВЭБ-инфекции 185
Таблица 1. Сывороточные уровни цитокинов (ЦК) в динамике у больных ИМ с разным исходом заболевания
ЦК (пг/мл) Норма (п = 17) Острый период Период ранней реконвалесценции
1-я группа (п = 41) 2-я группа (п = 20) Р1-2 < 1-я группа (п = 41) 2-я группа (п = 20) Р1-2 <
ФНОа 19±4 145±32* 31±7 0,05 115±42* 48±13*
ИЛ-1Р 27,3±7 572±86* 438±97* 386±52* 653±172*
РАИЛ-1 220±57 1300 ±134* 1417±181* 802±77* 902±193*
ИЛ-8 49±11 133±14* 55±8 0,001 130±13* 58±14 0,001
ИЛ-6 49±11 68±17 87±21 57±11 82±29
ИФНу 92±24 742±158* 201±52* 0,01 524±135* 95,4±34 0,05
ИЛ-4 51±7 81±13* 430±118* 0,05 73±12 52±15
* достоверное отличие от нормы, р < 0,05
Нижегородского НИИЭМ. Достоверность различий определяли по критерию Стъюден-та (1), различия считали достоверными при р < 0,05 [10].
В ходе катамнестического наблюдения за детьми, перенесшими ИМ, пациенты были разделены на две группы: 1-я — дети, не имевшие рецидивов после перенесенного ИМ (77 детей), и 2-я — дети, у которых после перенесенного ИМ были диагностированы однократные или повторные рецидивы ИМ (24 ребенка). Для выявления прогностических критериев у детей обеих групп проводили сравнение преморбидного фона, клинической картины заболевания и показателей иммунного статуса в остром периоде болезни и в периоде ранней реконвалесценции.
Из 101 ребенка 7 человек переносили ИМ в легкой форме, 61 — в среднетяжелой и 33 — в тяжелой форме. У пациентов, перенесших ИМ в легкой форме, рецидивов не отмечали. У детей, перенесших среднетяжелую и тяжелую формы ИМ, рецидивы наблюдали с одинаковой частотой (27,9% и 27,3%).
Анализ больных по возрасту и полу показал, что группу максимального риска рецидивирующего течения ИМ составляют мальчики в возрасте до 7 лет, у которых рецидивы регистрировали в 36,3% случаев, а группой минимального риска — девочки старше 7 лет (14,3%).
Продолжительность и выраженность клинических симптомов у детей обеих групп в остром периоде заболевания существенно не различались. Единственным достоверным отличием был более высокий уровень лихорадки (39,2 ± 0,09 °С против 38,8 ± 0,16 °С, р < 0,05) у детей 1-й группы (без рецидивов в дальнейшем).
При исследовании количественного состава субпопуляций лимфоцитов, содержания
1дА, 1дМ, 1дС и 1дЕ, ЦИК, активности лимфоцитов в спонтанной РБТЛ и индуцированной ФГА не было обнаружено существенных отличий между группами. Можно отметить только повышенное количество «негативно» активированных лимфоцитов с маркером апоптоза СБ95 + (28 ± 1,6% при норме 22,2 ± 1,6, р < 0,05) у детей 1-й группы в периоде ранней реконвалесценции, тогда как у детей 2-й группы этот показатель не отличался от нормы (23,4 ± 2%).
Однако анализ цитокинового статуса детей позволил выявить значительные различия между группами. Как видно из представленных в таблице 1 данных в остром периоде ИМ уровень ФНОа у детей 1-й группы превышал как показатели возрастной нормы, так и уровень соответствующего показателя у детей с рецидивирующим течением заболевания. Уровень ИФНу у детей 1-й группы в 8 раз превышал базальный показатель, что отражает выраженный ответ ТЫ типа. У детей с рецидивирующим течением ИМ активация синтеза ИФНу была менее значительной. Содержание ИЛ-4, цитокина Тк2 типа, у детей 1-й группы не отличалось от нормы, а у пациентов с развившимися впоследствии рецидивами имела место выраженная активация синтеза этого цитокина.
В периоде ранней реконвалесценции сывороточные уровни ФНО-а и ИЛ-4 не имели достоверных различий между двумя группами, тогда как концентрации ИЛ-8 и ИФНу оставались высокими только у больных 1-й группы, сохраняя свое прогностическое значение и в поздние сроки заболевания.
Таким образом, изучение системной продукции цитокинов в остром периоде ИМ позволило выделить критерии прогноза рецидивирующего течения ВЭБ-инфекции. Высоко информативными оказались уровни цитоки-
186
А.С. Левина и др.
на Th1 типа ИФНу и цитокина Th2 типа ИЛ-4, а также ФНОа и ИЛ-8. Анализ динамики концентраций цитокинов в крови показал, что условием формирования рецидивирующего течения ВЭБ-инфекции у детей является неадекватный цитокиновый ответ в остром периоде ИМ, характеризующийся недостаточной активацией синтеза провос-палительных цитокинов ФНОа, ИЛ-8 и цитокина Thl-типа ИФНу, при усиленной секреции противовоспалительного цитокина Th2 типа ИЛ-4 [11].
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Дранник Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология. М. 2003, 604.
2. Малашенкова И.К., Дидковский Н.А., Сарсания Ж.Ш., Жарова М.А., Литвиненко Е.Н. и др. Лечащий Врач, 2003, 9, 23-27.
3. PichlerR., Berg J., Hengstschlager A., Maschek J. et al. Mil. Med. 2001, 166(8), 733-4.
4. Precopio M.L., Sullivan J.L., Somasundaran M., Luzuriaga K.J. Immunol. 2003, 1; 170(5), 25902598.
5. Attarbaschi T., Willheim M., Ramharter M., Hofmann A. et al. Eur. Cytokine Netw. 2003, Jan-Mar; 14 (1), 34-9.
6. Харламова Ф.С. и др. Детские инфекции 2006, 5, 3, 3-10.
7. Железникова Г.Ф. Вопросы вирусологии 2007, 4, 4-10.
8. Ohga S, Nomura A., Takada H, Hara T. Crit. Rev. Oncol. Hematol. 2002, Dec.; 44(3), 203-215.
9. Hislop A.D., Taylor G.S., Sause D., Rickinson A.B. Annu. Rev. Immunol. 2007; 25, 587-617.
10. Левина А.С. Клинико-иммунологическая эффективность иммуномо-дулирующих препаратов при инфекционном мононуклеозе у детей. Автореф. дисс. канд. наук, СПб, 2006, 22.
11. Левина А.С., Иванова В.В., Железникова Г.Ф., Монахова Н.Е. Способ прогнозирования течения инфекционного мононуклеоза, вызванного вирусом Эпштейна-Барр, у детей. Патент на изобретение № 2285262 от 10.10.2006 г., Бюл. № 28.
CYTOKINES IN THE PROGNOSIS OF RECURRENT COURSE OF INFECTIOUS MONONUCLEOSIS IN CHILDREN
A.S. Levina, G.F. Zheleznikova, V.V. Ivanova, I.V. Babachenko, N.E.
Monachova, E.A. Murina
Research Institute of Children Infections, Ministry of Public Health, Saint-Petersburg, Russia
Based on the results of clinical and laboratory research upon 101 children (aged 2—15 years) performed in the acute phase of infectious mononucleosis and during the 3 years of the post-infection period, prognostic markers of recurrent course of infectious mononucleosis were found: low responses of cytokines TNFa, IL-8, and IFNy along with increased secretion of cytokine Th2-type IL-4.
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.