научная статья по теме ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ ЛИМФОЦИТЫ И МАКРОФАГИ ОПУХОЛЕВОЙ ТКАНИ КАК ПРЕДИКТИВНЫЕ ФАКТОРЫ ПРИ ФОЛЛИКУЛЯРНОЙ ЛИМФОМЕ Биология

Текст научной статьи на тему «ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ ЛИМФОЦИТЫ И МАКРОФАГИ ОПУХОЛЕВОЙ ТКАНИ КАК ПРЕДИКТИВНЫЕ ФАКТОРЫ ПРИ ФОЛЛИКУЛЯРНОЙ ЛИМФОМЕ»

БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕМБРАНЫ, 2014, том 31, № 1, с. 68-76

УДК 577.3

ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ ЛИМФОЦИТЫ И МАКРОФАГИ ОПУХОЛЕВОЙ ТКАНИ КАК ПРЕДИКТИВНЫЕ ФАКТОРЫ ПРИ ФОЛЛИКУЛЯРНОЙ ЛИМФОМЕ

© 2014 г. Е. С. Нестерова1*, С. К. Кравченко1, Э. Г. Гемджян1, Е. А. Османов2, А. М. Ковригина1

1Гематологический научный центр МЗ РФ; 125167, Москва, Новый Зыковский проезд, 4А; *электронная почта: nest.ek@yandex.ru 2Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН, 115478, Москва, Каширское ш., 24

Поступила в редакцию 28.05.2013 г.

С помощью иммуногистохимического (ИГХ) исследования биоптатов лимфатических узлов оценена предиктивная значимость количества цитотоксических лимфоцитов и макрофагов в опухолевой ткани при фолликулярной лимфоме (ФЛ). ИГХ исследование выполнено до лечения пациентов с использованием антител к гранзиму В и СБ68. Показано, что количество цитотоксических лимфоцитов (цитотоксических Т-лимфоцитов и МК-клеток) у больных с благоприятным исходом лечения ФЛ (группа 1, п = 31) статистически значимо (р < 0.05) больше, чем у больных с неблагоприятным исходом (группа 2, п = 28). Количество СБ68-позитивных макрофагов оказалось достоверно больше (р < 0.01) в группе 2 по сравнению с группой 1 при нодулярно-диффузном характере роста ФЛ. Повышенное количество цитотоксических лимфоцитов может свидетельствовать об активации адаптивного клеточного иммунитета, который способствует благоприятному исходу заболевания. Увеличение количества макрофагов, наоборот, ассоциировано с неблагоприятным исходом ФЛ. Полученные данные указывают на возможность использования параметров клеточного микроокружения опухоли в качестве прогностического критерия исхода ФЛ. Роль клеточного микроокружения в механизме развития ФЛ требует дальнейшего исследования.

Ключевые слова: фолликулярная лимфома, макрофаги, цитотоксические лимфоциты.

Б01: 10.7868/80233475513050125

Фолликулярная лимфома (ФЛ) — наиболее часто встречающаяся В-клеточная лимфоидная опухоль [1], которая характеризуется различиями не только в морфологической и клинической картине, но и ответе на проводимую терапию. Заболевание характеризуется, как правило, длительным, часто рецидивирующим течением. 5-летняя общая выживаемость (ОВ) пациентов после проведения стандартных курсов полихимиотерапии (ПХТ) по программе Я-СИОР равна 50% [2]. Заболевание рецидивирует в первые 3—4 года после окончания лечения: 2-летняя безрецидивная выживаемость (БРВ) после проведения курсов ПХТ по программе Я-СИОР составляет 60%, 4-летняя — 40% [3]. Несмотря на характерное длительное, медленно прогрессирующее течение заболевания, у 15—20% больных наблюдается увеличение размеров опухоли в короткие промежутки времени. Пациенты этой группы погибают в первые 1.5—2 года после установления диагноза [2, 4]. Известные прогностические индексы для фолликулярной лимфомы БОРЫ и РЫР1-2, основанные на клинических характеристиках ФЛ, не позволяют достаточно надежно предсказывать характер

течения и исход заболевания, в связи с чем возникает необходимость разработки дополнительных прогностических критериев (клинических, имму-ногистохимических, молекулярных, генетических).

Одним из направлений исследовательских работ является изучение взаимодействия системы "опухоль—микроокружение". ФЛ возникает на основе вторичных фолликулов, в которых в условиях нормы В-клетки взаимодействуют с компонентами микроокружения: фолликулярно-денд-ритными клетками (ФДК), интрафолликулярны-ми Т-клетками и макрофагами.

Т-клеточная популяция иммунного микроокружения опухоли может быть представлена эффекторными и регуляторными клетками. Эф-фекторные Т-клетки осуществляют реакции специфического иммунитета. К эффекторным иммунокомпетентным клеткам относятся цито-токсические лимфоциты (ЦТЛ) и плазматические клетки. Регуляторные клетки обеспечивают активацию или угнетение отдельных звеньев иммунных реакций посредством секреции лимфо-

кинов. К регуляторным иммунокомпетентным клеткам относятся: индукторы T-хелперов (иТЬ), индукторы T-супрессоров (иТс), T-хелперы 1 порядка (Th1), T-хелперы 2 порядка (Th2), макрофаги [5].

Роль клеток иммунного микроокружения опухолевой ткани при ФЛ вариабельна. С одной стороны, иммунные клетки являются компонентом реактивного микроокружения, и тогда оценивается популяция иммунных клеток в интраноду-лярном пространстве опухоли (внутри фолликула). С другой стороны, иммунные клетки играют роль предиктивных факторов при иммунохимио-терапии, и тогда оценивается популяция иммунных клеток в интернодулярном и перинодуляр-ном пространствах опухоли (межнодулярное и околонодулярное пространства). Предиктивные факторы (биомаркеры) [6] предсказывают клинический эффект, безрецидивный период, токсичность препарата; напрямую связаны с молекулярными мишенями для таргетного препарата.

Многие исследовательские работы посвящены изучению роли интранодулярных реактивных Т-клеток микроокружения при ФЛ, представленных CD4+ клетками с выделением популяций Т-регуляторных (CD4+, CD25+, Foxp3+) клеток, фолликулярных Т-хелперов (TFh), Т-хелперов 1 и 2 типа (Th1, Th2). Результаты изучения роли Т-клеточного реактивного компонента в характере течения ФЛ неоднозначны [7]. Большая часть исследователей заключает, что повышенная реакция CD4+ клеток ассоциирована с худшим прогнозом, а повышенная реакция CD8+ клеток — с лучшим прогнозом. В работе Wahlin и соавт. [8] были изучены популяции регуляторных Т-клеток и цитотоксических CD8+ лимфоцитов. В исследовании сообщается о том, что повышенная экспрессия CD4+ клеток в интерфолликулярном пространстве и большой коэффициент соотношения CD4/CD8 и CD4+ клеток в фолликулярном и интерфолликулярном пространстве связаны с худшим прогнозом. Повышенная реакция клеток с запрограммированной гибелью, CD8+ клеток и FOXP3+ клеток в опухолевой ткани ассоциирована с лучшим прогнозом. Подобные результаты представили также Alvaro и соавт. [9] и Lee и соавт. [10]. В работе Laurent и соавт. [11] подчеркивается ведущая роль СD8+ цитотокси-ческого компонента в противоопухолевом ответе при ФЛ. Исследователями продемонстрирована связь повышенного количества цитотоксических Т-лимфоцитов с высокой бессобытийной выживаемостью (БСВ).

Роль цитотоксических лимфоцитов, объединяющих цитотоксические Т-лимфоциты и NK-клетки, в течении ФЛ на сегодняшний день не изучена.

Цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ; CD8+ цитотоксические Т-лимфоциты) секретируют в

межклеточное пространство белки-перфорины, накопленные в цитоплазматических гранулах. Перфорины образуют комплекс с гранзимами — сериновыми протезами, содержащимися во внутриклеточных гранулах. Данный комплекс, связавшись с сульфатированными протеогликанами или маннозо-6 фосфатным рецептором на клеточной поверхности опухолевой клетки, активирует рецептор-опосредованный эндоцитоз, следствием чего является проникновение комплекса внутри опухолевой клетки. Внутри клетки гран-зимы, благодаря перфорину, выходят из эндосом в цитозоль и осуществляют протеолитический запуск апоптоза [11—14].

Натуральные киллеры (МК-клетки; выделены в отдельный класс лимфоцитов) — большие гранулярные лимфоциты, выполняющие цитолити-ческую функцию подобно ЦТЛ; содержат гранулы с цитолитическими протеазами [14].

В данной работе охарактеризована популяция активированных цитотоксических лимфоцитов (ЦТЛ) с использованием антитела к гранзиму В. Гранзимы — эндогенные сериновые протеазы, содержащиеся в гранулах активированных МК-кле-ток, активированных СЭ8+ цитотоксических Т-лимфоцитов, СЭ4+лимфоцитов с репрограм-мированием по цитотоксическому типу [13]. ЦТЛ во вторичных фолликулах (внутри фолликула) крайне немногочисленны, что характеризует их как малочисленную популяцию клеток опухолевого реактивного микроокружения. В проведенном исследовании изучались ЦТЛ с целью выявления их роли как предиктивных факторов при иммунохимиотерапии.

Поведение макрофагов в опухолевой ткани зависит от их типа. М1-активированные макрофаги ("классический" тип) являются иммунными эф-фекторными клетками, способными к агрессивному фагоцитированию и активному вырабатыванию лимфокинов. М1-макрофаги вызывают лизис опухолевых клеток. М2-активированные макрофаги ("альтернативный" тип) секретируют провоспалительные лимфокины, стимулируют образование новых сосудов и способствуют росту опухоли [15].

Значение макрофагального компонента в течении ФЛ, как и роль Т-клеточного компонента, расценивается в различных исследованиях неоднозначно. Большинство исследований посвящено изучению интранодулярных макрофагов. В ряде работ сообщается, что повышенное количество СЭ68+ клеток (активированных макрофагов) ассоциировано с плохим ответом на терапию [16—20]. В работе Тазктеп и соавт. [21] представлены данные, доказывающие, что выраженная макрофагальная реакция в опухолевой ткани при ФЛ ассоциирована с лучшими ОВ и БСВ. Wahlin и соавт. [8], проведя иммуногистохимическое (ИГХ) исследование биоптатов лимфатических узлов у 70 паци-

ентов с разным клиническим течением ФЛ, заметили, что повышенное количество активированных макрофагов в интрафолликулярном пространстве ассоциировано с неблагоприятным прогнозом.

Можно предположить, что противоречивость этих результатов объясняется разными типами активированных макрофагов в опухолевом микроокружении: действие одного типа макрофагов способствует уничтожению опухолевой ткани, действие другого — подавлению иммунных реакций и распространению опухоли [23].

Поведение макрофагов и ЦТЛ зависит не только от их биологических характеристик, но и от проводимой терапии. В настоящее время ритук-симаб (моноклональное антитело к СЭ20+ опухолевым клеткам) включают не только в химиоте-рапевтические режимы, но и применяют в качестве поддерживающей терапии при ФЛ. С одной стороны, ритуксимаб в разультате связывания с Бс-рецептором макрофагов или ЦТЛ способствует активации их функциональной активности — лизиса опухолевых клеток. С другой стороны, ри-туксимаб-индуцированный лизис опухолевых клеток усиливает антигенпрезентирующие функции дендритных клеток, что способствует реализации механизма адаптивного клеточного иммунитета ("эффект вакцинаци

Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.

Показать целиком