ВЛИЯНИЕ ИНТЕРФЕРОНО- И ИММУНОТЕРАПИИ НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ У ИММУНОКОМПРОМЕТИРОВАННЫХ ДЕТЕЙ С ВОЗВРАТНЫМИ ВИРУСНО-БАКТЕРИАЛЬНЫМИ
ИНФЕКЦИЯМИ
Нестерова И. В.1, Ковалёва С. В., Чудилова Г. А., Ломтатидзе Л. В., Клещенко Е.И., Шинкарева О.Н.
ГБОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет» Минздрава РФ, Центральная научно-исследовательская лаборатория, Краснодар; 'ГБОУ ВПО «Российский университет дружбы народов» Минобрнауки РФ, Москва, Россия
Настоящими исследованиями показано наличие трансформации фенотипа и дефекты фагоцитарной функции нейтрофильных гранулоцитов (НГ) у иммунокомпрометирован-ных детей с возвратной ассоциированной вирусной респираторной и герпетической инфекциями и хроническими заболеваниями ЛОР-органов. Пролонгированная и адекватная интерферонотерапия в комбинации с иммунотерапией демонстрирует высокую клиническую эффективность, сопровождающуюся перестройкой функционирования системы НГ в виде реорганизации мембранной экспрессии функционально-значимых рецепторов (СБ64, СБ32, СБ16, СБ11Ь) и модулированием фагоцитарной активности НГ.
Ключевые слова: нейтрофильный гранулоцит, иммунофенотип, фагоцитоз, возвратные респираторные инфекции
Нейтрофильный гранулоцит (НГ) по современным представлениям является мульти-функциональной клеткой и участвует в реализации реакций врожденного и адаптивного иммунитета, осуществляя противоинфекци-онную защиту. В механизмах реализации антибактериального и противовирусного иммунитета активная роль принадлежит НГ. Высокая частота возвратных острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ) и обострений хронических заболеваний ЛОР-органов у детей является клиническим критерием дефектного функционирования иммунной системы, в частности системы НГ [1, 2, 3]. Известно, что фагоцитарная и микробицидная функция НГ, в том числе вирусоцидная активность, находится в непосредственной зависимости от их фенотипических особенностей: количества и плотности ряда экспрессируемых рецепторов. Экспрессия на мембране НГ СБ32, СБ16 важна в осуществлении фагоцитарной функции и ан-тителозависимой цитотоксичности, что ассоциируется с СВ11Ь/СБ18-зависимым повышением адгезии, дегрануляцией и киллингом [4]. СБ64, СБ32, СБ16 - триггерные молекулы, запускающие иммунный фагоцитоз и процессы киллинга. Блокирование СБ11Ь вызывает вы-
ключение активации СБ64, СБ32, СБ16 [7]. Остаются неясными механизмы функционального праймирования НГ ассоциированного с их фенотипическим оснащением у детей с возвратными вирусно-бактериальными инфекциями респираторного тракта и ЛОР-органов и динамические изменения функционирования НГ при проведении иммунореаби-литации. Кроме того, стойкий протективный эффект - основной элемент успешного лечения данной категории пациентов, который, к сожалению, не всегда достигается на фоне традиционной терапии и эпизодических коротких курсов интерфероно- или иммунотерапии, что вызывает разочарование у клиницистов [1, 2, 3]. В связи с этим, актуальность разработки новых иммунотерапевтических подходов для лечения возвратных вирусно-бактериальных респираторных инфекций не вызывает сомнения.
Цель исследования: выявление особенностей реорганизации фенотипических и функциональных характеристик НГ у детей с ассоциированной вирусной респираторной и герпетической инфекциями и хроническими заболеваниями ЛОР-органов на фоне проведения интерфероно- и иммунотерапии.
712
Иммунофармакология
Материал и методы. Под нашим наблюдением находилось 20 детей 5-8 лет (12 мальчиков и 8 девочек) с повторными ОРВИ, хроническими латентными или рецидивирующими герпесвирусными инфекциями (ВПГ I/II типа, ВЭБ, ЦМВ, ВГЧ 6 тип) и хронической ЛОР-патологией вне острого периода. Иммунологическими методами исследованы: а) фенотип НГ периферической крови (CD64, CD32, CD16, CD11b) методом проточной цитометрии на CYTOMICS FC500 (Beckman Coulter, США) с панелью моноклональных антител с определением уровня плотности экспрессируемых рецепторов (MFI); б) фагоцитарная и микро-бицидная (NADPH-оксидаза) функции НГ. Контроль - 20 условно-здоровых детей, сопоставимых по полу и возрасту. Разработанная программа интерфероно- и иммунотерапии включала: а) системную и локальную базисную терапию рекомбинантным IFNa2 (вифероном) в течение 2,5 мес.; б) для элиминации герпес-вирусов - изопринозин, из расчета 50 мг/кгМТ 3 курса по 10 дней с перерывом 14 дней; в) для коррекции антибактериального иммунитета использовались бактериальные лизаты - ИРС-19 по 14 дней 3 курса, чередуя с изопринозином.
Результаты исследования. Клинико-анам-нестически у детей частота ОРВИ была 7-24 эпизода в год и длительность от 4 до 21 и более дней на протяжении 2 и более лет (в среднем 4,7лет). У всех детей повторные ОРВИ сочетались с хроническими заболеваниями ЛОР-органов с частыми обострениями и рецидивирующей и/или моно- и микст-герпетической инфекцией (ВПГ I/ II типа, ВЭБ, ЦМВ, ВГЧ 6 тип). У 65% детей выявлена репликация герпесвирусов. Микробиологический пейзаж носо- и ротоглотки у 60% больных представлен монокультурами, а в 40% случаев -ассоциациями микробной флоры.
Анализ фенотипического состояния НГ им-мунокомпрометированных детей с возвратными вирусно-бактериальными инфекциями позволил рандомизировать 2 группы детей с ориентированностью на особенности дефектов фагоцитарной функции НГ, достоверно отличающихся друг от друга, в том числе и фенотипически [2]. Так, в I гр. (55%) вошли дети с выраженными дефектами фагоцитарной функции НГ, а во II гр. (45%) - с неадекватным ответом фагоцитарной реакции НГ на имеющийся инфекционно-воспалительный процесс. При оценке состояния НГ на фоне интерфероно- и иммунотерапии выявлены особенности трансформации фенотипа,
сопряженные с изменением фагоцитарной функции НГ в группах исследования.
СБ64+НГ - СБ64+НГ% достоверно сниженный до лечения в 2,2 раза у больных I гр. увеличился до уровня контроля после лечения (р>0,05). При этом МГ1 СБ64 не менялся. Во II гр. СБ64+НГ% снизился в 2,4 раза после лечения (р<0,05). Изменений МГ1 СБ64 на фоне лечения не отмечено. Увеличение количества СБ64+НГ - маркер тяжести бактериального процесса [5, 6], в связи с чем полученные данные свидетельствуют о регрессии воспалительного процесса бактериальной этиологии после проведенного лечения.
СБ16+НГ - СБ16+НГ% достоверно не отличался от контроля до и после лечения, как в I гр., так и во II гр. Следует отметить, что МГ! СБ16 существенно увеличился в обеих группах. Так, в I гр. МИ СБ16, находящийся в пределах контроля до лечения, возрос в 1,5 раза и стал выше контроля (р<0,001). Во II гр. при достоверном повышении МИ СБ16 по сравнению с контролем до лечения отмечалось увеличение MFI СБ16 в 1,3 раза после лечения (р<0,001).
СБ32+НГ - СБ32+НГ% в I гр., не отличающийся от контроля до лечения, достоверно уменьшился в 1,5 раза ниже контроля (р<0,05). В то же время, во II гр. значительно сниженное количество СБ32+НГ% до лечения (р<0,001) после лечения практически не изменилось и оставалось в 4,2 раза ниже контроля (р<0,001). При этом MFI СБ32 в I гр. пациентов не отличался от контроля до и после лечения (р>0,05). В то же время, MFI СБ32 во II гр., сниженный до лечения по отношению к контролю, возрос до уровня контроля (р>0,05).
СБПЬ+ - СБПЬ+НГ% до лечения не отличался от такового здоровых детей как в I гр. (р>0,05), так и во II гр. (р>0,05). После окончания терапии значимых изменений количества СБПЬ+НГ в обеих группах не выявлено. В то время как MFI СБПЬ после лечения существенно повысился в обеих группах в 1,8 и в 1,5 раза (р1<0,001; р2<0,05).
Сопоставительный анализ продемонстрировал, что в I гр. на фоне более выраженных дефектах фагоцитарной функции НГ до лечения и восстановлении процессов поглощения после лечения в динамике имеет место снижение количества СБ32+НГ. При этом уровень экспрессии СБ32 на мембране НГ соответствует контролю. В то же время, во II гр. на фоне фагоцитарной дисфункции НГ до лечения и сохранении дефектов поглотительной и перевари-
вающей активности НГ после лечения, имело место неизменяющееся снижение количества СБ32+НГ. При этом после лечения произошло восстановление плотности экспрессии СБ32 на НГ. Следует подчеркнуть, что параллельно с наличием количественных и/или качественных дефектов СБ32+НГ, выявлено усиление экспрессии СБ16 и СБ11Ь в обеих группах исследования, что, возможно, имеет компенсаторный характер и необходимо для поддержания и активации фагоцитарной функции НГ, и, в основном, процессов поглощения. Проведение интерфероно- и иммунотерапии у имму-нокомпрометированных детей с возвратными вирусно-бактериальными инфекциями сопровождалось позитивными клиническими эффектами: сокращение частоты и длительности ОРВИ, обострений хронических заболеваний ЛОР-органов в 2-4 раза, снижение герпесвирус-ной нагрузки, увеличение длительности клинически благополучного периода в 1,5-2 раза.
Выводы. 1. У детей с возвратными вирусно-бактериальными инфекциями выявлена трансформация фенотипа сопряженная с дефектами фагоцитарной функции НГ (выраженные дефекты фагоцитарной функции НГ и неадекватный ответ фагоцитарной реакции НГ на имеющийся инфекционно-воспалительный процесс).
2. Проведение интерфероно- и иммунотерапии у иммунокомпрометированных детей с возвратными вирусно-бактериальными инфекциями сопровождалось реорганизацией мембранной экспрессии рецепторов НГ и их фагоцитарной функции.
3. Установлено снижение количества CD64+ НГ до контроля после лечения у детей с неадекватной имеющемуся воспалительному процессу фагоцитарной функцией НГ, что свидетельствуют о регрессии воспалительного процесса бактериальной этиологии.
3. Количественные и/или качественные дефекты CD32+Hr сопровождаются усилением экспрессии CD16 и CDllb, которое носит компенсаторный характер и необходимо для поддержания и активации фагоцитарной функции НГ, и, в основном, процессов поглощения.
4. Программа прологированной в адекватных дозах интерферонотерапии и иммунотерапии продемонстрировала высокую клиническую эффективность у иммуноком-прометированных детей с возвратными ОРВИ, герпесвирусными инфекциями и хр
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.