ВЛИЯНИЕ ОПИОИДНЫХ ПЕПТИДОВ НА ПОГЛОТИТЕЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ И МОНОЦИТОВ У ДОНОРОВ МУЖСКОГО И ЖЕНСКОГО ПОЛА РАЗЛИЧНЫХ ВОЗРАСТНЫХ ГРУПП
Гейн С. В., Гилёва С. Г., Шаравьёва И. Л., Тендрякова С. П.
ФГБУН Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН; ГБОУ ВПО «Пермский государственный научно-исследовательский университет», Пермь, Россия
Бета-эндорфин оказывал стимулирующее влияние на фагоцитарное число и активность фагоцитоза нейтрофилов в группе доноров-мужчин 20-29 лет и снижал поглотительную способность нейтрофилов по фагоцитарному числу и фагоцитарной активности в группе доноров 50-59. У доноров женского пола во всех возрастных группах влияния бета-эндорфина на фагоцитарную функцию нейтрофилов зарегистрировано не было. У доноров мужского пола во всех возрастных группах влияния лей- и мет-энкефалинов на активность фагоцитарной функции нейтрофилов не выявлено. В группе доноров женского пола 30-39 лет мет и лей-энкефалины снижали фагоцитарное число и активность фагоцитоза.
Ключевые слова: фагоцитоз, опиоидные пептиды, возраст
Мет- и лей-энкефалины относятся к семейству опиоидных пептидов и обладают широким спектром биологического действия. В организме они выполняют нейромедиатор-ную, нейроэндокринную, иммунореактивную функции, влияя на эмоциональное и психическое состояние организма, обладая антиноци-цептивным, антистрессорным и иммунорегу-ляторным действием. Энкефалины реализуют иммуномодулирующие эффекты через стимуляцию мю, дельта-опиатных рецепторов, экспрессия которых доказана на всех популяциях клеток иммунной системы.
Врожденный иммунитет страдает при старении в меньшей степени, чем адаптивный. Это объясняется меньшей подверженностью возрастным изменениям основных эффекторов врожденного иммунитета - миелоидных клеток по сравнению с лимфоидными клетками, ответственными за адаптивный иммунитет. Фагоцитарная активность нейтрофилов и моноцитов/макрофагов с возрастом может даже усиливаться, в то время как внутриклеточная бактерицидность, являющаяся мерой эффективности фагоцитарной реакции, при старении, как правило, ослабевает [1].
Опиоидные пептиды, так же как и другие биологически активные соединения, оказыва-
ют модулирующее влияние на фагоцитарный процесс. Так, в ряде работ показано стимулирующее действие бета-эндорфина на фагоцитарную активность [2], модулирующее действие на моноциты и нейтрофилы. Пептид изменяет их секреторную активность и бактерицидный потенциал, усиливает образование активных форм кислорода в низких концентрациях (10-7М) [3], активизирует процессы метаболизма арахидоновой кислоты в ней-трофилах (динорфин А) [4]. А под влиянием бета-эндорфина и мет-энкефалина в концентрациях (10-3-10-5 М) [5] отмечено угнетение выработки активных форм кислорода и азота.
Цель работы - исследовать влияние бета-эндорфина, лей- и мет-энекефалинов на фагоцитарную активность нейтрофилов и моноцитов здоровых доноров - добровольцев мужского и женского пола различных возрастных групп.
Методика исследования. Объектом исследования служили лейкоциты периферической крови 36 соматически здоровых доноров - добровольцев мужского и женского пола, разделённых на 4 возрастные группы: 20-29 лет, 30-39 лет, 40-49 лет и 50-59 лет. Фагоцитарную активность нейтрофильных лейкоцитов оценивали по результатам мо-
286
Иммунорегуляция
дифицированного метода Каплина В. Н. [6]. В микропробирках с антиадгезивным покрытием смешивали 25 мкл гепаринизирован-ной крови и 25 мкл бета-эндорфина («Skytek laboratories», США), мет- и лей-энкефалины в концентрациях 10-7-10-10 М, пробы инкубировали в течение 1 ч при температуре 37°С. После инкубации к пробам добавляли 25 мкл суспензии формалинизированных эритроцитов барана (ФЭБ) (100*106/мл в среде 199 с добавлением 10 мМ HEPES и 2 мМ L-глутамина). В качестве объектов фагоцитоза использовали формалинизированные эритроциты барана (ФЭБ). Пробы инкубировали 20 минут при 37°C, после чего готовили мазки, которые после фиксации окрашивали по Романовскому. Активность фагоцитарной функции оценивали по фагоцитарному числу (количество объектов фагоцитоза, которое в среднем приходится на 1 из 300 подсчитанных фагоцитов) и активности фагоцитоза (количество клеток, захвативших объекты фагоцитоза, из 100 подсчитанных фагоцитов). Дифференцированный подсчёт клеток проводился по морфологическим признакам биомикроскопическим методом. Полученные результаты были обработаны статистически с помощью однофакторного дисперсионного
анализа для парных данных и LSD-критерия Фишера для межгруппового сравнения.
Результаты. Оценка влияния бета-эндорфина на фагоцитарную функцию ней-трофилов доноров мужского пола показала стимулирующее влияние пептида на фагоцитарное число и активность фагоцитоза ней-трофилов в группе 20-29 лет в концентрациях 10-7, 10-8 и 10-10 М (данные не приводятся). В группах доноров 30-39 и 40-49 лет пептид поглотительную способность нейтрофилов не модулировал, а в группе доноров 50-59 лет пептид выражено снижал поглотительную способность нейтрофилов по фагоцитарному числу и фагоцитарной активности в концентрациях 10-7 и 10-8 М. У доноров женского пола во всех возрастных группах влияния бета- эн-дорфина на фагоцитарную функцию нейтро-филов зарегистрировано не было. Аналогичным образом не выявлено влияния пептида на фагоцитоз моноцитов у доноров обоих полов во всех исследуемых возрастных группах (данные не приводятся).
При анализе эффектов энкефалинов были получены следующие результаты. У доноров мужского пола во всех возрастных группах влияния лей- и мет-энкефалинов на активность фагоцитарной функции нейтрофилов
Таблица. Зависимость влияния лей- и мет-энкефалина на активность фагоцитарной функции нейтрофилов периферической крови женщин от возраста
Пептид (концент рация) Показатели фагоцитоза
20-29 лет 30-39 лет 40-49 лет 50-59 лет
фагоцитарное число активность фагоцитоза (%) фагоцитарное число активность фагоцитоза (%) фагоцитарное число активность фагоцитоза (%) фагоцитарное число активность фагоцитоза (%)
Лей-энкефалин
контроль 1,44±0,12 72,85±3,50 1,95±0,13 86,63±2,80 1,48±0,13 72,17±4,47 1,39±0,19 67,53±5,15
10-7М 1,61±0,15 75,02±3,43 1,72±0,13 81,13±4,35 1,40±0,11 69,89±3,32 1,47±0,18 74,00±5,14
10-8М 1,59±0,14 74,31±4,40 1,69±0,11 82,23±3,80 1,45±0,18 69,68±5,70 1,30±0,10 65,89±2,61
10-9М 1,50±0,10 72,43±3,22 1,75±0,13 82,44±4,78 1,59±0,13 73,57±3,98 1,42±0,14 66,83±3,24
10-10М 1,69±0,16 74,73±4,40 1,74±0,13 81,57±3,65 1,53±0,17 71,42±4,55 1,31±0,15 65,82±4,33
Мет-энкефалин
контроль 1,44±0,12 72,85±3,50 1,90±0,13 86,63±2,80 1,48±0,13 72,17±4,47 1,39±0,19 67,53±5,15
10-7М 1,66±0,11 75,40±3,44 1,63±0,14 81,13±3,52 1,31±0,16 65,88±5,12 1,40±0,15 67,64±4,21
10-8М 1,62±0,16 74,61±3,68 1,63±0,17 79,34±5,22 1,57±0,18 71,46±5,67 1,41±0,11 69,68±2,61
10-9М 1,66±0,14 75,73±5,36 1,83±0,15 82,94±3,92 1,45±0,11 71,06±3,53 1,49±0,16 70,94±3,86
10-10М 1,50±0,15 69,92±2,98 1,71±0,15 82,04±3,59 1,57±0,13 73,52±2,53 1,48±0,14 70,13±4,80
Примечание: жирным шрифтом выделены значения, статистически значимо отличающиеся от контроля (р±0,05)
не выявлено. В группе доноров женского пола 30-39 лет лей-энкефалин во всём диапазоне исследуемых концентраций снижал фагоцитарное число и активность фагоцитоза (табл.).
Мет-энкефалин в этой же возрастной группе у женщин угнетал фагоцитарную функцию нейтрофилов по фагоцитарному числу в концентрациях 10-7 и 10-8 М, а по активности фагоцитоза - в концентрациях 10-7, 10-8 и 10-10 М. Влияния данных пептидов на активность фагоцитарной функции моноцитов у доноров обоих полов во всех исследуемых возрастных группах не зарегистрировано.
Таким образом, основной эффект опио-идные пептиды оказывают на фагоцитарную способность нейтрофилов. У доноров мужского пола бета-эндорфин стимулирует поглотительную способность нейтрофилов в группе 20-29 лет и угнетает - в группе доноров 50-59 лет. У доноров женского пола во всех возрастных группах влияния бета-эндорфина на активность фагоцитарной функции ней-трофилов зарегистрировано не было. В то же время, энкефалины проявили своё действие только у женщин в возрастной группе 30-39 лет, снижая поглотительную способность нейтрофильных гранулоцитов. Таким обра-
зом, можно сделать заключение, что в данной возрастной группе модулирующие эффекты опиоидных пептидов проявляются наиболее ярко. А также предположить наличие некоторых особенностей в экспрессии опиатных рецепторов у лиц различного пола. Так у мужчин фагоцитоз модулировал бета-эндорфин, а у женщин энкефалины, поскольку все пептиды данного семейства связываются с рецепторами с разной степенью аффинности [7].
Работа выполнена при поддержке гранта программы Президиума РАН «Фундаментальные науки - медицине».
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Meyer K. C., Soergel P. Uorax. 1999, 54, 697-700.
2. Ortega E., Forner M. A.,Barriga C. Comp. Immunol. Microbiol. Infect. Dis. 1996, 19, 267-274.
3. Menzebach A., Hirsch J., Hempelmann G. et al. Br. J. Anaesth. 2003, 91, 546-550.
4. Pasotti D., Mazzone A., Ricevuti G. Minerva Med. 1992,83,433-438.
5. Pasnik J., Tchórzewski H., Baj Z. et al. Immunol. Lett. 1999, 67, 77-83.
6. Шилов Ю. И., Владыкина В. П., Атнагузи-на А. Т. Перм. мед. журнал 1998, 15, 2, 3-9.
7. Schwarzer C. Pharmacology & ^erapeutics 2009, 123,353-370.
INFLUENCE OF OPIOID PEPTIDES ON ACTIVITY OF NEUTROPHILS AND MONOCYTES FROM THE DONOR MALES AND FEMALES OF DIFFERENT AGE GROUPS
Gein S. V., Gileva S. G., Sharavieva I. L., Tendrykova S. P.
Institute of Ecology and Genetics of Microorganisms, Ural Branch of the Russian Academy of Sciences,
Perm; Perm State University, Perm, Russia
Beta-endorphin has a stimulating effect on the phagocytic number and phagocytic activity of neutrophils in the donor-mail group 20-29 years and decreased absorbency neutrophil phagocytic and phagocytic activity in the donor group 50-59. Donors females in all age groups influence of beta- endorphin on the phagocytic function of neutrophils were reported. Donors males in all age groups influence leu- and met- enkephalin on the activity of phagocytic functi
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.