ANTIBODIES TO OPPORTUNISTIC ENTEROBACTERIA IN PATIENTS WITH RHEUMATIC DISEASES
Gulneva M. Y., Noskov C. M., Malafeeva E. V.
Yaroslavl State Medical Academy, Yaroslavl, Russia
The presence and the levels of IgG antibodies to bacterial antigens derived from cells of microorganisms: Escherichia coli, Proteus vulgaris, Salmonella (O-12), Klebsiella pneumoniae in 66 patients with rheumatic diseases were studied by ELISA. The frequency of detection and levels of IgG antibodies to bacterial antigens of opportunistic enterobacteria in patients with rheumatic diseases varied significantly, that can testify to participation of these microorganisms in the pathogenesis of the disease.
Keywords: antibodies to enterobacteria, rheumatic diseases
ВОССТАНОВЛЕНИЕ МАЛЫХ СУБПОПУЛЯЦИЙ Т-ХЕЛПЕРОВ ПОСЛЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК У ДЕТЕЙ С ПЕРВИЧНЫМИ ИММУНОДЕФИЦИТАМИ
Гусева О. А.1, Жогов В. В.1, Лившиц А.М.1, Хайдуков С. В.2
ФГБУ Федеральный Научно-Клинический Центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева, МЗ РФ; 2ФГБУН Институт биоорганической химии им. акад. М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН, Москва, Россия
В посттрансплантационный период восстановление малых субпопуляций Т-хелперов, таких как регуляторные Т-хелперы, центральные и эффекторные Т-хелперы памяти, наивные Т-хелперы с экспрессией CD45RA и CCR7 регистрируется на 90-е сутки и активно продолжается в последующие 120-е и 150-е сутки.
Ключевые слова: Т-хелперы, иммунодефицит, гемопоэтические стволовые клетки
Введение. Трансплантация гемопоэтиче-ских стволовых клеток (ТГСК) является наиболее перспективным методом лечения ряда как онкогематологических заболеваний, так и первичных иммунодефицитов (ПИД). Вместе с тем, у детей, перенесших ТГСК, повышается риск развития посттрансплантационных осложнений, опосредованных иммунологической недостаточностью, в т.ч. РТПХ [1]. В связи с этим, цель настоящего исследования заключалась в динамическом анализе восстановления наиболее важных показателей Т-хелперного звена иммунитета через 30-150 суток после ТГСК у детей с ПИД различной этиологии.
Материал и методы. Было обследовано 32 человека с ПИД различной этиологии. Материалом исследования являлась венозная кровь, забор которой осуществляли через 30
(32 чел.), 60 (25 чел.), 90 (17 чел.), 120 (9 чел.) и 150 суток (5 чел.) после ТГСК. Для окрашивания клеток были использованы мАТ: CD3, CD4, CD25, CD31, CD45, CD45RA, CD45R0, CD62L, CCR7 (CD 197) (все Beckman Coulter, США), меченные флуорохромами: FITC, PE, ECD, PC5, PC7. Окрашенные клетки анализировали на проточном цитофлюориметре Navios (США) как описано в [2].
Анализировали следующие субпопуляции лимфоцитов: общие Т-лимфоциты, Th, Tactiv/reg,
Thnaev tym, Thnaev, Th-эффекторы/памяти, Thnaev/mem,
хемокиновый рецептор CCR7 на Th. Гематологические показатели определяли на гематологическом анализаторе UniCel® DxH™ 800 (Beckman Coulter, США). Математическую обработку данных проводили при помощи программы Kaluza v. 1.2 (Beckman Coulter, США).
524
Иммунопатология
Статистическую обработку данных проводили при помощи программного обеспечения Statistica 6.1 (StatSoft). Построение графиков осуществляли по средним арифметическим значениям позитивных клеток.
Результаты. У детей, обследованных на 30-е сутки после ТГСК, обнаруживалась выраженная недостаточность Т-лимфоцитов, и Т-хел-перов в частности, которая сохранялась так же и на 60-е сутки после ТГСК. Как видно из рис. 1, положительная динамика восстановления Т-клеточного звена отмечалась лишь на 90-е сутки, к 150-и суткам количество Т-клеток и Т-хелперов практически достигало физиологической нормы (ФН).
Не менее важным в процессе изучения реконструкции иммунной системы представляется анализ соотношения наивных CD45RA+ Т-хелперов и CD45R0+ Т-хелперов-эффекторов/памяти. На рис. 2 представлено динамическое восстановление уровня наивных CD45RA+ Т-хелперов с 1.79% (30-е сутки) до 54,28% (150-е сутки). В то же время отмечалось значительное уменьшение количества CD45R0+ Т-хелперов эффекторов/ памяти от 94,97% до 29,18% соответственно. Соотношение этих субпопуляций, наблюдаемое на 150-е сутки практически соответствует таковому, характерному для лиц с нормально функционирующей иммунной системой.
Рис. 1. Динамика восстановления показателей Т-клеточного звена после ТГСК
Рис. 2. Динамика восстановления соотношения CD4+ CD45RA+ и CD4+CD45R0+ после ТГСК
Из рис. 1 следует, что достоверное увеличение Тнаивных/памяти с фенотипом CD4+ CD62L+ проявляется на 90-сутки с последующим значительным увеличением на 120-е и 150-е сутки. Так же отмечена положительная динамика появления в периферической крови регуляторых Т-клеток с фенотипом CD4+cD25+, которые практически отсутствовали в периферической крови на 30-е и 60-е сутки после ТГСК. Заметное их появление регистрировалось на 90-е сутки, а на 120-е и 150-е сутки уровень этих клеток в крови практически соответствовал ФН.
На этом же рис. показано, что накопление в крови наивных тимических Т-хелперов активизируется к 90-м суткам после ТГСК. В последующие интервалы исследования (120-е и 150-е сутки) уровень этих клеток достоверно повышается и достигает 18% к 150-м суткам. В то же время, клетки с фенотипом CD4+CCR7+ до 90-х суток практически отсутствуют, затем медленно возрастают вплоть до 150-х суток, после чего отмечалось резкое увеличение их процентного содержания.
Обсуждение. Поскольку в результате проведения ТГСК наблюдается снижение численности лимфоцитарных субпопуляций, что может привести к серьезным нарушениям в иммунной системе, необходимо прослеживать кинетику восстановления отслеживание макро- и микропопуляций лимфоцитов в посттрансплантационном периоде. Ранее было указано на отсроченное восстановление Т-хелперов, по сравнению с популяцией цитотоксических Т-лимфоцитов, уровень которых значительно возрастал уже на 60-е сутки после ТГСК [3]. Положительные изменения в популяции Т-хелперов отмечаются на 90-е сутки после ТГСК. Следует отметить увеличение количества активированных Т-лимфоцитов с высокой экспрессией CD25, которые могут блокировать активацию донорских цитотоксических лимфоцитов и, следовательно, препятствовать этой субпопуляции Т-лимфоцитов индуцировать острую РТПХ [1]. Необходимо отметить, что на начальном этапе иммунологической реконструкции важным является появление наивных лимфоцитов. В настоящем исследовании показано, что коли-
чество наивных Т-хелперов, выходящих из тимуса в значительной степени возрастает на 90-е сутки с последующим достоверным увеличением на 120-е и 150-е сутки. Обнаруженная аналогичная динамика для Т-хелперов с экспрессией хемокинового рецептора CCR7 позволила предположить восстановление работы тимиче-ских зон, отвечающих за дальнейшую диффе-ренцировку Т-клетоки, и следовательно, за восстановление Т-клеточного звена иммунитета. О состоянии Т-хелперного звена можно судить по распределению наивных и активированных-эффекторных Т-хелперов в периферической крови. Последовательность восстановления их соотношения продемонстрирована на рис. 2.
Выводы. Таким образом, восстановление субпопуляционного состава Т-хелперного
звена иммунитета, включающего регуля-торные Т-хелперы, Т-хелперы центральной и эффекторной памяти, наивные Т-хелперы с экспрессией CD45RA и CCR7 регистрируется на 90-е сутки после ТГСК и активно продолжает увеличиваться в последующие 120-е и 150-е сутки.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Li Q., Zhai Z., Xu X., Shen Y., Zhang A., Sun Z. Leuk Res. 2010, 34, 9, 1158-68.
2. Хайдуков С. В., Зурочка А. В., Тотолян А. А., Че-решнев В. А. Медицинская Иммунология 2009, 11, 2-3,227-238.
3. Гусева О. А., Жогов В. В., Хайдуков С. В. Российский иммунологический журнал 2013, 2-3, 7 (16), 122.
RECONSTRUCTION OF SMALL SUBPOPULATIONS OF T-HELPERS AFTER TRANSPLANTATION OF HEMATOPOIETIC STEM CELLS IN CHILDREN WITH PRIMARY IMMUNODEFICIENCIES
Guseva O. A.1, Zhogov V. V.1, Livshits A. M.1, Khaidukov S. V.2
'Federal Research and Clinical Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology of Dmitry Rogacheva, Ministry of Health; 2Shemyakin-Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry RAS, Moscow,
Recovery of small subpopulations of T-helper cells, such as T-reg cells, central and effector memory T-helper cells, naïve T-helper cells with the expression of CD45RA and CCR7 registered on 90th day and actively continues on 120th and 150th day after transplantation of hematopoietic stem cells.
Key words: T-helpers, immunodeficiency, hemopoietic stem cells
ЭКСПРЕССИЯ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИХ NOD-2 И RIG-I РЕЦЕПТОРОВ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА В КИШЕЧНИКЕ КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ
Деген А. С., Камышный А. М.
Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии Запорожского государственного медицинского университета, Запорожье, Украина
В эксперименте изучалось влияние экспериментального стрептозотоцинового сахарного диабета на интенсивность экспрессии внутриклеточных рецепторов врожденного иммунитета NOD2 и RIG-I иммунными клетками подвздошной кишки. Для определения NOD2+-клеток и RIG-I+-клеток был использован метод непрямой иммунофлюоресценции с использованием поликлональных антител к NOD2 и RЮ-L Установлено, что развитие диабета сопровождалось увеличением количества NOD2+-клеток в кишечнике на 37-45% и RIG-I+-клеток на 45-50% на 14 день, а также влияло на концентрацию изучаемых рецепторов в иммунопозитивных клетках.
Ключевые слова: сахарный диабет, NOD-2, RIG-I, КАЛТ
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.