НЕЙРОХИМИЯ, 2013, том 30, № 3, с. 259-263
КЛИНИЧЕСКАЯ НЕЙРОХИМИЯ
УДК 616.895.87-092:612.017.1:612.123
ВОЗМОЖНЫЕ ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ ИЗМЕНЕНИЙ СОДЕРЖАНИЯ НЕКОТОРЫХ ЦИТОКИНОВ И ПОКАЗАТЕЛЕЙ СИСТЕМЫ "ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ-АНТИОКСИДАНТЫ" У БОЛЬНЫХ С ПЕРВЫМ ЭПИЗОДОМ ШИЗОФРЕНИИ © 2013 г. Н. В. Озорнина, А. С. Озорнин, Н. В. Говорин*
ГБОУВПО Читинская государственная медицинская академия
В исследование было включено 66 больных с первым приступом параноидной шизофрении, у которых в крови определяли содержание некоторых цитокинов и изучали параметры системы "Пере-кисное окисление липидов—антиоксиданты". Установлено, что при манифестации параноидной шизофрении наблюдается увеличение концентрации провоспалительных цитокинов (IL1 в, IL8, TNFa, IFNa), иммунного интерлейкина 2 и снижение противовоспалительного интерлейкина 4. Выявлено, что у больных с первым приступом шизофрении происходит усиление процессов липо-пероксидации и снижение активности глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы. В статье обсуждены некоторые патофизиологические механизмы изменений содержания в крови цитокинов и параметров системы "Перекисное окисление липидов—антиоксиданты".
Ключевые слова: шизофрения, первый эпизод, цитокины, перекисное окислениелипидов, антиоксидант-ная защита.
Б01: 10.7868/81027813313030114
Интерес к изучению биологических аспектов шизофрении обусловлен исключительным полиморфизмом ее клинической картины и значительной распространенностью данного заболевания в структуре психических расстройств. При этом манифестные формы шизофрении являются наиболее удачной моделью для проведения биологических исследований при шизофрении, поскольку выявляемые до начала психотропной терапии нарушения биологических систем на самом деле отражают патофизиологическую сущность заболевания, а не являются следствием терапевтического вмешательства [1].
В последние десятилетия в биологической психиатрии интенсивно развиваются направления, как по определению роли окислительного стресса, так и изменений иммунорегуляторных систем организма в патогенезе психических заболеваний. Анализ литературных данных позволяет характеризовать шизофрению как заболевание, сопровождающееся активацией клеточного и гуморального иммунитета [2, 3, 4, 5], и развитием дисбаланса в системе "перекисное окисление липидов - антиоксиданты" ("ПОЛ-АО") [6, 7, 8].
Цель исследования заключалась в изучении изменений некоторых цитокинов сыворотки кро-
* Адресат для корреспонденции: 672090, Чита, ул. Горького, 39а, тел./факс 8(3022)35-53-00, e-mail: govorin-nik@yandex.ru.
ви и параметров системы "перекисное окисление липидов—антиоксиданты" у больных с первым приступом шизофрении.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В исследование были включены 66 больных (мужчин 51.5%, женщин 48.5%) с диагнозом "параноидная шизофрения, период наблюдения менее года". Диагноз был выставлен по критериям МКБ-10 (шифр F 20.09). У всех пациентов наблюдалось острое психотическое расстройство (суммарная оценка психического состояния по шкале PANSS была не менее 80 баллов). Средний возраст больных составил 24.4 ± 0.5 лет. Из исследования исключались больные шизофренией с сопутствующими органическими заболеваниями ЦНС, острыми и обострением хронических соматических заболеваний, беременные и лактирую-щие женщины. Контрольную группу составили 20 психически и соматически здоровых людей, сопоставимых по возрасту, полу, социальной принадлежности с исследуемыми больными.
При проведении исследования соблюдались этические принципы, предъявляемые Хельсинкской декларацией всемирной медицинской ассоциации (World Médical Association Déclaration of Helsinki 1964, 2000 ред.).
260
ОЗОРНИНА и др.
У всех обследуемых изучали содержание уровня цитокинов (ILip, IL2, IL4, IL8, TNFa, IFNa), показатели активности перекисного окисления липидов, состояние антиоксидантной защиты в сыворотке и эритроцитах.
При определении уровня цитокинов использовался иммуноферментный анализатор "Expert 96" и метод твердофазного иммуноферментного анализа. Исследование цитокинов — интерлейкина-1Р (IL1P), интерлейкина-2 (IL2), интерлейкина-4 (IL4), интерлейкина-8 (IL8), фактора некроза опухолей-a (TNFa), a-интерферона (IFNa) сыворотки крови проводили тест-системами фирмы Вектор-Бест (г. Новосибирск).
Для изучения уровня промежуточных интер-медиатов свободнорадикального окисления липидов использовали тест с тиобарбитуровой кислотой [9], уровень оснований Шиффа определяли по интенсивности флуоресценции в хлороформных экстрактах эритроцитов [10]. Общую антиокислительную активность (ОАА) сыворотки крови изучали методом М.Ш. Промыслова и со-авт. (1990) [11] в незначительной модификации. Принцип метода заключался в том, что сернокислое железо (Fe2+) индуцировало продукцию свободных радикалов, тем самым активируя перекис-ное окисление субстрата (у-линоленовая кислота). Полученный показатель характеризовал количество субстрата, подвергшегося пере-кисному окислению и количество веществ, защитившихся от такового воздействия.
Скорость каталазной реакции определяли методом М.А. Королюк и соавт., (1988) [12]. Метод заключался в определении скорости утилизации перекиси водорода в реакционной смеси, в которую вносился биологический материал, содержащий фермент. Определение активности суперок-сиддисмутазы (СОД) было основано на способности фермента подавлять реакцию восстановления нитросинего тетразолия супероксидным анион радикалом, генерированным in vitro в системе ксан-тин:ксантиноксидаза, а активность рассчитывалась в зависимости от процента этого подавления [13]. Измерение скорости глутатионпероксидазой (ГПО) активности заключалась в его способности катализировать реакцию взаимодействия гидроперекиси трет-бутила с восстановленным глутатио-ном, а по изменению содержания последнего в пробах до и после инкубации с модельным субстратом рассчитывалась активность ГПО в мкмоль/(мин л). Измерение скорости глутатион-редуктазой (ГР) активности было основано на каталитическом НАДФ-Н зависимом преобразовании окисленной формы глутатиона в восстановленную. По скорости снижения экстинкции проб при длине волны 340 нм рассчитывали активность ГР в мкмоль/(мин л) [13]. Перекисную резистентность эритроцитов изучали согласно ме-
тодики Г.А. Яровой (1987) и выражали в процентах гемолизированных клеток [14]. Содержание общих липидов определяли, используя стандартные наборы фирмы "La-Chema-Test" (Чехия). Концентрацию общего белка во всех биологических объектах исследовали, используя набор "Human" (Германия), в основу которого положен биуретовый метод регистрации. Для определения указанного параметра в эритроцитах гемоглобин предварительно осаждали хлороформ-этаноло-вой смесью (3 : 5) на льду.
Статистическую обработку полученного материала проводили с использованием пакетов STATISTICA 6.1 для Windows. При сравнении изученных показателей использовались методы непараметрической статистики в связи с ненормальным распределением значений в вариационных рядах. Числовые данные приведены в виде медианы (Ме) и интерквартильного размаха (25-го; 75-го перцентиля). Для сравнения двух независимых выборочных совокупностей применялся критерий Манна—Уитни. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез принималсяр < 0.05.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
У больных с первым психотическим эпизодом шизофрении было выявлено статистически значимое увеличение содержания следующих исследуемых цитокинов по сравнению со здоровыми донорами: IL1p на 218.3% (p < 0.001), IL2 на 310.0%, (p < 0.001), IL8 на 190.5% (p < 0.001), TNFa на 587.6% (p < 0.001), IFNa на 55.6% (p = = 0.025). Уровень IL4 был ниже на 19.6% контрольных показателей (p = 0.044) (табл. 1).
Изучение параметров системы "ПОЛ—АО" показало, что у больных с первым психотическим эпизодом шизофрении наблюдалось увеличение интенсивности процессов липопероксидации (табл. 2). Так, значения оснований Шиффа превосходили величины указанного показателя в группе контроля на 54.2% (р < 0.001), ТБК-актив-ных веществ в сыворотке крови — на 16.7% (р = = 0.002), ТБК-активных веществ в эритроцитах — на 2.9% (р < 0.001). Изменения со стороны факторов антирадикальной защиты выглядели следующим образом (табл. 2): в эритроцитах активность селен-зависимой глутатионпероксидазы была снижена на 37.2% (р < 0.001), а глутатионредукта-зы — на 26.5% (р < 0.001); скорость обезвреживания супероксиданион радикала была увеличена на 15.8% (р = 0.021), а пероксида водорода соответствовала уровню контрольных значений, активность каталазы в сыворотке была увеличена на 4.8% (р = 0.020). Общая антиокислительная активность сыворотки крови и устойчивость эритроцитов к перекисному гемолизу не отличались от контрольных значений (табл. 2).
Таблица 1. Уровень цитокинов сыворотки крови у больных с первым приступом шизофрении (Me (25-й; 75-й))
Параметры Контроль (n = 20) Больные (n = 66)
IL1ß, пг/мл 5.09 (3.17; 6.16) 16.20 (12.43; 22.49)p < 0.001
IL2, пг/мл 10.07 (9.33; 11.68) 41.29 (23.65; 58.29)p < 0.001
IL4, пг/мл 1.99 (1.44; 2.59) 1.60 (1.01; 1.90) p = 0.044
IL8, пг/мл 8.17 (6.99; 9.21) 23.73 (14.11; 32.63)p < 0.001
TNFa, пг/мл 1.94 (1.54; 2.55) 13.34 (10.23; 17.42)p < 0.001
a-IFN, пг/мл 1.33 (1.11; 1.59) 2.07 (1.29; 2.48) p = 0.025
Примечание: п — число обследованных; р — уровень статистической значимости различий по сравнению с контролем (Критерий Манна—Уитни).
Таблица 2. Уровень показателей системы "ПОЛ—АО" крови у больных с первым приступом шизофрении (Ме (25-й; 75-й перцентили))
Параметры
Контроль (n = 20)
Больные (n = 66)
ТБК-активные продукты, мкмоль/мг липидов Активность каталазы, нмоль/с • мг белка ОАА, %
ТБК-активные продукты, мкмоль/мг липидов Основания Шиффа, УЕ на мг липидов ПРЭ (% гемолизированных клеток) Активность каталазы, нмоль/с • мг белка Активность глутатионпероксидазы, мкмоль/с • мг белка Активность глутатионредуктазы, мкмоль/с • мг белка Активность супероксиддисмутазы, % активности
Сыворотка
1.80 2.10 12.90 Эритроциты
68.80
1.55 6.10 12.60 98.70 57.66 35.97
(1.80; 1.90) (2.00; 2.20) (12.60; 13.10)
(68.10; 69.40) (1.30; 1.71)
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.