научная статья по теме АНАЛИЗ АССОЦИАЦИИ ПОЛИМОРФНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНА GRIN2B С ПАРАНОИДНОЙ ШИЗОФРЕНИЕЙ И ЭФФЕКТИВНОСТЬЮ ТЕРАПИИ ТИПИЧНЫМИ НЕЙРОЛЕПТИКАМИ У РУССКИХ И ТАТАР ИЗ РЕСПУБЛИКИ БАШКОРТОСТАН Биология

Текст научной статьи на тему «АНАЛИЗ АССОЦИАЦИИ ПОЛИМОРФНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНА GRIN2B С ПАРАНОИДНОЙ ШИЗОФРЕНИЕЙ И ЭФФЕКТИВНОСТЬЮ ТЕРАПИИ ТИПИЧНЫМИ НЕЙРОЛЕПТИКАМИ У РУССКИХ И ТАТАР ИЗ РЕСПУБЛИКИ БАШКОРТОСТАН»

ГЕНЕТИКА, 2013, том 49, № 9, с. 1106-1113

ГЕНЕТИКА ЧЕЛОВЕКА

УДК 577.21:616.895

АНАЛИЗ АССОЦИАЦИИ ПОЛИМОРФНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНА GRIN2B С ПАРАНОИДНОЙ ШИЗОФРЕНИЕЙ И ЭФФЕКТИВНОСТЬЮ ТЕРАПИИ ТИПИЧНЫМИ НЕЙРОЛЕПТИКАМИ У РУССКИХ И ТАТАР ИЗ РЕСПУБЛИКИ БАШКОРТОСТАН

© 2013 г. А. Э. Гареева1, Д. Ф. Закиров2, Э. К. Хуснутдинова12

Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук, Уфа 450054

e-mail: annagareeva@yandex.ru 2Башкирский государственный университет, кафедра генетики и фундаментальной медицины, Уфа 450076

Поступила в редакцию 11.01.2013 г.

С целью выявления генетических факторов риска развития параноидной шизофрении (ПШ) и генетических маркеров ответа на терапию нейролептиками у больных русских и татар из Республики Башкортостан (РБ) проведен анализ ассоциации данного заболевания с полиморфными вариантами гена GRIN2B. В результате проведенного исследования выявлены: 1) генетические маркеры повышенного риска развития ПШ в разных этнических группах: у татар — генотип GRIN2B*T/*T (p = = 0.003; OR = 2.33) и аллель GRIN2B*T (p = 0.001; OR = 2.36), rs1805247; у русских - генотип GRIN2B*T/*T (p = 0.038; OR = 2.12) и аллель GRIN2B*T (p = 0.028; OR = 2.03), rs1805247; генотип GRIN2B*A/*A (p = 0.042; OR = 2.12), rs1805476; 2) генетические маркеры пониженного риска развития ПШ; 3) генетические маркеры эффективности терапии и риска развития побочных эффектов при приеме нейролептиков (галоперидола) в РБ. Отмечено выраженное межэтническое разнообразие генетических факторов риска развития данного заболевания.

DOI: 10.7868/S001667581308002X

Шизофрения — комплексное полигенно-на-следуемое расстройство психики и головного мозга, манифестирующее в результате обоюдного влияния предрасполагающих факторов наследственности и среды (психогенных, социогенных, экзогенных) и проявляющееся в дезорганизации и диссоциации психических функций и развитии спектра психотических симптомов в виде бреда и галлюцинаций, в специфических нарушениях мышления и постепенном формировании эмоционально-волевого и когнитивного дефицита [1—3].

Несмотря на определенные успехи в изучении этиологии и патогенеза, а также в поиске эффективных средств фармакотерапии, шизофрения по-прежнему занимает лидирующую позицию в списке патологических состояний центральной нервной системы, приводящих к инвалидизации и социальной дезадаптации больных. Многочисленные молекулярно-генетические исследования показали, что развитие психических и нейродеге-неративных заболеваний опосредовано межгенными и ген-средовыми взаимодействиями. Идентификация генов, которые участвуют в развитии нервной системы и формировании психики, а также факторов среды, которые модулируют экспрессию этих генов, является первым шагом в исследовании психических заболеваний. К настоящему времени учеными из разных стран выявлено не-

большое число генов, демонстрирующих более или менее доказанную связь с риском развития шизофрении [4—6]. Однако поиск генов-кандидатов, вовлеченных в этиопатогенез этого заболевания, не завершен. Особый интерес представляют гены нейромедиаторных систем, поскольку была показана их вовлеченность в развитие психических и нейродегенеративных заболеваний [7—9].

Гипоглутаматергическая гипотеза, постулирующая нарушение глутаматного нейромедиатор-ного пути, является одной из нейрохимических гипотез патогенеза шизофрении и привлекает внимание исследователей в последнее время. В пользу этой гипотезы свидетельствуют низкие уровни рецепторов глутамата при посмертном анализе мозга больных и способность средств, блокирующих глутаматную активность, таких как фенциклидин и кетамин, вызывать шизофрено-подобные симптомы и когнитивные нарушения [10-13].

Проблема повышения эффективности терапии мультифакториальных психических заболеваний является одной из наиболее актуальных в современной клинической психиатрии, поскольку в условиях применения значительного количества самых разнообразных препаратов выявляются выраженные индивидуальные различия терапевтического эффекта.

Таблица 1. Характеристика изученных полиморфных локусов гена GRIN2B

Полиморфизм Локус Локализация в гене Функция Кодон Аминокислотная замена

15G/T rs34315573 Экзон 2 С.З. GCG/GCT Ala5/Ala5

366C/G rs7301328 Экзон 2 С.З. CCC/CCG Pro122/Pro122

1665C/T rs1805482 Экзон 8 С.З. AGC/AGT Ser555/Ser555

4197T/C rs1805247 Экзон 13 С.З. CAT/CAC His1399/His1399

5806A/C rs1805476 Экзон 13 3'-область - -

5988T/C rs1805502 Экзон 13 3'-область - -

Примечание. С.З. — синонимичная замена.

В связи с изложенным выше изучение ассоциации полиморфных вариантов гена ОЫМ2Б, кодирующего МЯ2В-субъединицу глутаматного NMDA-рецептора с ПШ и с ответом на терапию нейролептиками, представляет огромный интерес для исследователей.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Учитывая неоднородность населения нашей республики в этническом отношении, в исследуемые выборки были включены представители двух наиболее распространенных популяций Башкортостана: русских и татар. Обследованный контингент представлен 251 больным с диагнозом параноидной шизофрении Е20.0хх согласно международной классификации болезней МКБ-10 ПШ различной этнической принадлежности: 108 русских (48 женщин и 60 мужчин) и 143 татарина (67 женщин и 76 мужчин), находившимся на лечении в РПБ № 1 г. Уфы. Средний возраст больных составлял 42.93 ± 11.1 лет.

Контрольная группа включала в себя 252 добровольца — 99 русских (42 женщины и 57 мужчин) и 153 татар (68 женщин и 85 мужчин). Средний возраст здоровых доноров составлял 32.47 ± 12.4 лет.

Исследуемые выборки тестированы по специальному протоколу, включающему такие данные, как пол, возраст, этническая принадлежность, возраст начала заболевания, отягощенность наследственного анамнеза по психическим заболеваниям. От каждого больного было получено подписанное информированное согласие. Данное исследование было одобрено локальным биоэтическим комитетом ИБГ УНЦ РАН.

ДНК выделяли из периферической крови методом фенольно-хлороформной экстракции [14].

Амплификацию изученных локусов проводили с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) синтеза ДНК.

Анализ полиморфных маркеров rs1805502, rs1805476, rs1805247, rs1805482, rs7301328, rs34315573 гена GRIN2B (табл. 1) проводили с помощью ПЦР/ПДРФ анализа [13].

Эффективность типичного нейролептика — галоперидола у больных с ПШ оценивалась по шкале позитивных и негативных синдромов (PANSS). Шкала PANSS позволяет проводить стандартизированную оценку различных векторов психопатологической симптоматики шизофрении: а) позитивной POSIT, б) негативной NEGAT, в) общей психопатологической симптоматики PSYCH; определять клинический профиль больного и прослеживать динамику состояния в процессе терапии [2]. Эффективность терапии и развитие побочных эффектов оценивали в 1-й день назначения препарата, а затем на 21-й и 45-й дни.

Экстрапирамидный синдром (ЭПС) является побочным эффектом, наблюдаемым у 20—30% больных шизофренией при длительном приеме типичных нейролептиков [15, 16]. Критерием развития ЭПС, вызванного приемом нейролептиков, послужило наличие балла свыше 3 по шкале SAS.

Для идентификации генетических маркеров риска развития шизофрении в этнических группах русских и татар из Республики Башкортостан был применен метод "случай—контроль".

Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием пакета прикладных программ: MS Office Excel 2003 [Microsoft], Statistica v. 6.0 [17], BIOSTAT При попарном сравнении частот аллелей и генотипов в

Рис. 1. Неравновесие по сцеплению (В') между полиморфными локусами ге1805502, ге1805476, ге1805247, ге1805482, ге7301328, ге34315573 гена ОШК2Ву русских (а) и татар (б).

a

<N ^О t-- (N QO t^

О t^- QO (N "Л

(N ^ rn

«л «л «л «л ^н ^ч

О О О О О го

со со оо оо m

ее е е "a IS

37

б

15

группах больных и контроля использовался двусторонний тест Фишера. Сила ассоциаций оценивалась значениями показателя отношения шансов Odds Ratio (OR). Расчет показателя D, используемого для оценки неравновесия по сцеплению пары полиморфных локусов, осуществляли с помощью программы Haploview v. 4.1 [18], а частоты гаплоти-пов оценивались с помощью EM-алгоритма.

Проведен анализ ассоциации значений по шкалам PANSS и SAS с генотипами (аллелями) больных ПШ русских и татар c использованием однофакторного дисперсионного анализа — AN OVA (пакет прикладных программ "SPSS v. 13.0") для идентификации генетических маркеров индивидуальной чувствительности к нейролептикам.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Нами была изучена ассоциация шести полиморфных локусов гена GRIN2B с риском развития шизофрении у русских и татар из РБ (табл. 1).

Распределение частот генотипов по всем изученным полиморфным вариантам в исследуемой выборке больных с ПШ соответствовало распределению Харди—Вайнберга (табл. 2).

Результаты сравнительного анализа распределения частот генотипов и аллелей полиморфных локусов rs1805502, rs1805476, rs1805247, rs1805482, rs7301328, rs34315573 гена GRIN2Bу больных шизофренией и здоровых индивидов русских и татар из РБ приведены в табл. 2. Было выявлено, что частота генотипа GRIN2B*T/*T (rs1805247) была достоверно выше как у больных татарской этнической принадлежности (p = 0.003; OR = 2.33; 95%CI [1.34-4.04]), так и у русской (p = 0.038; OR = 2.12; 95%CI [1.09-4.11]) по сравнению с соответствующим контролем. Частоты генотипов (rs1805247) GRIN2B*C/*T (p = 0.029; OR = 0.52;

95%С1 [0.29-0.91]) и ОШШВ*С/*С (р = 0.029; OR = 0.08; 95%С1 [0.01-0.66]) у больных ПШ татар были достоверно ниже таковых в группе контроля. Кроме того, было показано статистически значимое повышение частоты аллеля ОШМ2В*Т (гз1805247) у больных татарской (р = 0.001; OR = = 2.36; 95%С1 [1.43-3.92]) и русской этнической принадлежности (р = 0.028; OR = 2.03; 95%С1 [1.11-3.69]).

Анализ ассоциации полиморфного локуса гз1805476 гена ОВ!М2В с риском развития шизофрении показал статистически значимое повышение частоты генотипа ОШМ2В*Л/*Л больных шизофренией, русских по этнической принадлежности (р = 0.042; OR = 2.12; 95%С1 [1.074.21]), по сравнению со здоровыми индивидами (табл. 2).

Проведенный анализ ассоциаций не

Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.

Показать целиком