научная статья по теме АНТИТЕЛА К ХИМИЧЕСКИМ КАНЦЕРОГЕНАМ И СТЕРОИДНЫМ ГОРМОНАМ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ЛЕГКОГО Биология

Текст научной статьи на тему «АНТИТЕЛА К ХИМИЧЕСКИМ КАНЦЕРОГЕНАМ И СТЕРОИДНЫМ ГОРМОНАМ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ЛЕГКОГО»

РОССИЙСКИЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 2014, том 8(17), № 2, с. 219-227

ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ

АНТИТЕЛА К ХИМИЧЕСКИМ КАНЦЕРОГЕНАМ И СТЕРОИДНЫМ ГОРМОНАМ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ЛЕГКОГО

© 2014 г. А.Н. Глушков*, Е.Г. Поленок*, Н.Е. Вержбицкая**, В.А. Титов***, И.А. Вафин****, С.Е. Рагожина****

*ФГБУН Институт экологии человека СО РАН, Кемерово, Россия;

**ГБУЗ КО Кемеровское патологоанатомическое бюро, Кемерово, Россия;

***ГБУЗ КО Кемеровский областной онкологический диспансер, Кемерово, Россия;

****Гкуз ко Кемеровский областной центр крови, Кемерово, Россия

Поступила: 12.09.2013. Принята: 12.05.2014

У больных немелкоклеточным раком легкого (РЛ) в сыворотке крови обнаружены высокие уровни антител к бензо[а]пирену (АТ-БП) и эстрадиолу (АТ-ЭС) по сравнению со здоровыми мужчинами. Уровни 1дА АТ к прогестерону (АТ-ПГ) не изменяются, а 1дС АТ-ПГ значительно ниже при РЛ, чем в группе сравнения. Между уровнями исследуемых АТ имеют место прямые корреляционные связи, более выраженные у больных РЛ. Значения соотношений АТ-БП/ЭС; -БП/ПГ; -ЭС/ПГ у больных РЛ превышают контрольные показатели.

По совокупной оценке информативности и экономичности для практического определения риска возникновения РЛ (в том числе у курящих мужчин) наиболее оптимальным является метод одновременного иммуноанализа 1дС к БП, ЭС и ПГ. Прогностическая значимость (совокупность чувствительности и специфичности метода) соотношений 1дС-БП/ ПГ и 1дА-БП/ПГ у курящих мужчин составляет соответственно АиС = 0,95 и АиС = 0,88. При повышенных значениях этих соотношений (> 2,0 и > 1,5 соответственно) риски возникновения РЛ достигают 11,4 и 6,1. При низких значениях (< 2,0 и < 1,5) риски РЛ снижаются до 0,1 и 0,2. При меньшем показателе прогностической значимости (АиС = 0,85) ОЯ возрастает до 11,5, если 1дС-ЭС/ПГ > 1,5, и снижается до 0,1, если 1дС-ЭС/ПГ < 1,5.

Ключевые слова: рак легкого, антитела, бензо[а]пирен, эстрадиол, прогестерон

ВВЕДЕНИЕ

Общеизвестна роль полициклических ароматических углеводородов, в частности, бензо[а]пирена (БП), в возникновении рака легких (РЛ) у человека [1]. Под действием ферментов биотрансформации они превращаются в электрофильные метаболиты, которые образуют ковалентные аддукты с макромолекулами организма, ДНК и белками [2, 3]. Низкомолекулярные соединения в составе аддуктов становятся гаптенами и таким образом приобретают способность индуцировать синтез специфических антител (АТ). АТ к БП и к его аддуктам с ДНК обнаружены у здоровых людей и больных злокачественными

Адрес: Адрес: 650065, г. Кемерово, пр. Ленинградский, д. 10, Глушкову Андрею Николаевичу. E-mail: ihe@list.ru

опухолями [4 — 8], в том числе у больных РЛ [9, 10].

В свою очередь стероидные гормоны принимают участие в патогенезе онкологических заболеваний [11]. В легочной ткани и в клетках РЛ обнаружены рецепторы эстрогенов, прогестерона (ПГ) и андрогенов [12, 13]. Имеются основания полагать, что эстрогены стимулируют, а ПГ ингибирует пролиферацию клеток РЛ [14, 15]. Однако до сих пор неизвестно, образуются ли АТ к стероидным гормонам при злокачественных опухолях и какую роль они играют в канцерогенезе.

Ранее предположили, что специфические иммунные реакции на низкомолекулярные ксено- и эндобиотики взаимосвязаны и в норме между ними имеет место определенный баланс. Нарушение такого баланса может стимулировать канцерогенез и тератогенез [16, 17]. Описаны особенности образования

АТ к БП, эстрадиолу (ЭС) и ПГ при врожденных пороках развития плода у женщин [18].

Цель настоящей работы — изучить особенности образования АТ к БП, ЭС и ПГ у больных РЛ.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

В обследовании приняли участие 299 мужчин. Из них — 128 мужчин с диагнозом не-мелкоклеточный РЛ, которые поступили на лечение в Областной клинический онкологический диспансер г. Кемерово. Диагноз РЛ в каждом случае был подтвержден морфологически, рентгенологически и эндоскопически. У основной части больных (72%) был диагностирован плоскоклеточный рак, 13% и 9% составили аденокарцинома и крупноклеточный рак, и 6% — другие формы РЛ. Среди них было 115 курящих мужчин (90%) и 13 (10%) некурящих.

В группу сравнения вошли условно здоровые мужчины (171 человек) с Кемеровского центра крови, не болеющие РЛ и другими заболеваниями дыхательных путей. Среди них было 76 (44%) курящих и 95 (56%) некурящих. Все обследуемые мужчины были старше 40 лет.

Забор периферической крови осуществлялся согласно этическим стандартам в соответствии с Хельсинской декларацией 2000 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава РФ № 266 от 19.06.2003 г. Все лица, участвовавшие в исследовании, дали информированное письменное согласие на участие в нем.

Исследование АТ к БП, ЭС и ПГ проводили с помощью модифицированного нами неконкурентного иммуноферментного анализа [5]. Конъюгаты БП-бычий сывороточный альбумин (БП-БСА) были синтезированы по оригинальной методике [19]. Конъюгат ЭС-БСА был синтезирован присоединением БСА к эстрадиолхинонам, полученным окислением ЭС солью Фреми. Коньюгат ПГ-БСА был получен путем конъюгации гемиглутарата 21-гид-роксипрогестерона и БСА карбодиимидным способом. Уровни АТ к гаптенам выражали в относительных единицах и вычисляли по формуле:

АТ с конъюгатом гаптен-БСА, ODBCA — связывание с БСА.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием ППП STATISTICA 6.0 (StatSoft, Inc., USA). Ненормальный характер распределения показателей определили с помощью критерия Ша-пиро-Уилка и в дальнейшем статистически значимые различия между группами выявляли с помощью непараметрического критерия X2 с поправкой Йетса на непрерывность вариации и U-критерия Манна-Уитни при уровне значимости p < 0,05. Риск возникновения РЛ оценивали с помощью величины OR с доверительным интервалом (CI) при 95% уровне значимости. Для оценки пороговых значений уровней АТ был проведен ROC-анализ [20] и рассчитаны величины AUC, характеризующие прогностическую значимость показателей.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В табл. 1 приведены медианы уровней АТ классов А и G, специфичных к БП, ЭС и ПГ у здоровых мужчин и больных РЛ. Установлено, что уровни IgA-БП, IgA-ЭС, IgG-БП и IgG-ЭС статистически значимо выше у больных РЛ, чем в группе сравнения. Уровни IgA-ПГ у больных РЛ незначительно превышают контрольный показатель, а уровни IgG-ПГ значимо ниже, чем у здоровых доноров.

С помощью ROC-анализа определили критические точки — границы между нормой и патологией по выявленным значениям уровней АТ в обследованных группах. Рассчитали величину AUC для каждого маркера и риски возникновения РЛ (OR) при определенных уровнях АТ, превышающих или недостигаю-

Таблица 1. Уровни антител (АТ) к бензо[а]пирену (БП), эстрадиолу (ЭС) и прогестерону (ПГ) у здоровых мужчин и больных раком легкого (РЛ)

АТ-Х = (OD

Х-БСА

ODБCА)/OD

где Х = БП, ЭС, ПГ; OD

Х-БСА

БСА

связывание

АТ Группа сравнения (N = 171) Больные РЛ (N = 128) Р

Me±m Me±m

IgA БП IgA ЭС 1,9±0,2 1,8±0,2 3,7±0,5 2,8±0,4 0,000001 0,000003

IgA ПГ 1,9±0,3 2,2±0,3 0,43

IgG БП 3,6±0,5 5,95±0,9 0,0001

IgG ЭС 4,7±0,3 6,1±0,6 0,01

IgG ПГ 4,0±0,4 2,9±0,5 0,01

Таблица 2. Частота встречаемости высоких (>) и низких (<) уровней антител (АТ) к бензо[а]пирену (БП), эстрадиолу (ЭС) и прогестерону (ПГ) у здоровых мужчин и больных раком легкого (РЛ)

Уровни АТ Группа сравнения ^ = 171) п / % Больные РЛ ^ = 128) п / % X2, р ОЯ (95% С1) АиС

1. 1дА-БП > 3 48/28 79/62 32,5 4,1 (2,5-6,9) 0,88

< 3 123/72 49/38 0,0005 0,2 (0,1-0,4)

2. 1дА-ЭС > 3 35/20 55/43 16,6 2,9 (1,7-5,0) 0,81

< 3 136/80 73/57 0,0006 0,3 (0,2-0,6)

3. 1дС-БП > 4 81/47 87/68 11,8 2,4 (1,4-3,9) 0,65

< 4 90/53 41/32 0,001 0,4 (0,3-0,7)

4. 1дС-ЭС > 6 63/37 66/52 5,9 1,8 (1,1-2,9) 0,62

< 6 108/63 62/48 0,02 0,5 (0,3-0,9)

5. 1дС-ПГ > 4 85/50 47/37 4,5 0,6 (0,4-0,9) 0,45

< 4 86/50 81/63 0,03 1,7 (1,03-2,8)

щих этих критических точек (табл. 2). Повышенные уровни 1дА-БП (>3), 1дА-ЭС (>3), 1дС-БП (>4), 1дС-ЭС (>6) значимо чаще обнаружены у мужчин с РЛ. При этом значения АиС составляли 0,62 — 0,88. Это говорит о том, что эти показатели являются хорошими классификаторами, а О Я возрастает до 1,8 — 4,1. У больных РЛ значимо чаще обнаружены пониженные уровни 1дС-ПГ (<4) со значением АиС 0,45 и ОЯ = 1,7.

Полученные результаты ставят под сомнение широко распространенное мнение о тотальной иммуносупрессии при онкологических заболеваниях, коль скоро у больных РЛ чаще и в больших количествах образуются АТ против низкомолекулярных экзо- и эндогенных соединений. Однако относительно невысокие значения АиС и ОЯ, выявленные на первом этапе настоящей работы, не достаточны для того, чтобы рекомендовать иммуно-анализ каждого из исследуемых АТ по отдель-

= 0,28 р = 0,0002 гс2 = 0,6 р = 0,000001

Л = 0,08*+1,98 у2 = 0,19л +2,99

0,0 5Д) 10,0 15,0 20,0 25,0 30,0 35,0 40,0 ДО-БП

Рис. 1. Взаимосвязи уровней антител классов А и С к бензо[а]пирену (1дА-БП, 1дС-БП) у здоровых мужчин (о 1) и больных раком легкого (^2)

ности для определения риска возникновения РЛ.

Исходя из предположения о том, что в норме иммунные реакции на низкомолекулярные ксено- и эндобиотики определенным образом сбалансированы, а при канцерогенезе этот баланс может быть нарушен, на втором этапе работы мы провели корреляционный анализ между уровнями исследуемых АТ разных классов и специфичностей у здоровых мужчин и больных РЛ. На рис. 1 представлен в качестве примера результат такого анализа между уровнями 1дА-БП и 1дС-БП. Видно, что у здоровых мужчин между уровнями указанных АТ имеет место прямая линейная взаимосвязь слабой силы (г = 0,28), но статистически значимая (р = 0,0002). У больных РЛ выявлена аналогичная прямая линейная статистически значимая (р = 0,000001), но более выраженная (г = 0,6) взаимосвязь.

В табл. 3 приведены рассчитанные уравнения линейной регрессии между уровнями 1дА (у) и 1дС (х) АТ к БП,ЭС и ПГ в сравниваемых группах. Коэффициент «а» в этих уравнениях показывает, насколько повышается уровень 1дА к каждому из перечисленных гаптенов при повышении уровня соответствующего 1дС от исходного значения «Ь». Видно, что между у

Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.

Показать целиком

Пoхожие научные работыпо теме «Биология»