Часть 1
Механизмы иммунной регуляции
беременности
Дендритные клетки как потенциальные мишени гормональной регуляции при беременности
Е.Р. Черных, Н.В. Селедцова, О.Ю. Леплина, М.А. Тихонова, Т.В. Тыринова, А.А. Останин, Н.М. Пасман НИИ клинической иммунологии СО РАМН, Новосибирский государственный университет, Новосибирск
Известно, что успешное течение беременности связано с формированием иммунологической толерантности к аллоантигенам плода. Однако механизмы индукции толерантности остаются мало изученными. Исследования в области трансплантационной иммунологии показали, что важную роль в индукции толерантности играют дендритные клетки (ДК). Толерогенные/ супрессорные свойства ДК связывают с незрелостью ДК. Кроме того, имеются веские основания предполагать, что функциональная активность ДК в определенной степени подвержена гормональной регуляции. Ранее нами было показано, что угроза прерывания беременности у женщин с повышенным уровнем дегидроэпиандростерна сульфата (ДГЭАС) вследствие надпочечниковой гиперандрогении (ГА) характеризуются нарушением супрессорной перестройки, и что у небеременных женщин ДГЭАС способен стимулировать созревание ДК и потенцировать их Thl-стимуляторную активность. Чтобы выяснить, насколько нарушения иммуносупрессорной перестройки при ГА связаны с изменением функций ДК под действием ДГЭАС, мы сравнили фенотипические особенности и Т(11/Ш-стимуляторную активность ДК у небеременных женщин, а также беременных с физиологической и осложненной ГА беременностью, а также исследовали влияние ДГЭАС на ДК женщин с физиологической беременностью. Методы: ДК генерировали путем культивирования прилипающей фракции мононукле-арных клеток в присутствие GM-CSF и интерферона-а. Фенотип ДК оценивали методом проточной цитометрии. ТП/Ш-стимуляторную активность ДК исследовали по их способности активировать Т-клетки к продукции Th1(IFN-Y)/Th2(IL-4) цитокинов в смешанной культуре лимфоцитов методом проточной цитометрии и иммуноферментного анализа. Результаты. Фенотипический анализ показал, что ДК женщин с физиологической беременностью отличались от ДК небеременных женщин менее зрелым фенотипом, в частности меньшим содержанием CD83+ и С025+ клеток. ДК беременных с НГ напротив не отличались от таковых у небеременных женщин и соответственно характеризовались более высоким содержанием CD83+ и CD25+ клеток, чем у женщин с физиологической беременностью. ДК небеременных женщин индуцировали Т-клетки к продукции IFN-y, но не усиливали продукцию IL-4. При физиологической беременности ДК не обладали Thl-стимулирующей активностью, но индуцировали Т12-ответ. В отличие от женщин с неосложненной гестацией ДК беременных с ГА обладали как Th1-, так и Ш-стимуляторной активностью. Культивирование ДК беременных с ДГЭАС сопровождалось признаками созревания ДК и индукцией Thl-стимуляторной активности. Таким образом, физиологическое течение беременности ассоциировано с доминированием толерогенной (Ш-стимуляторной) активности ДК. У беременных с надпочечниковой ГА наблюдается усиление Thl-стимуляторной активности ДК, что может быть обусловлено прямым влиянием гормона на созревание и функциональную активность ДК.
Взаимосвязь уровня CD62L нейтрофилов и уровня TGFß2 с процессом подготовки организма к родам
Н.К. Дорофеева, Л.В. Посисеева
ФГУ «ИвНИИ Ми Д им. В.Н.Городкова» Минздравсоцразвития России, Иваново
Благоприятный исход родов во многом зависит от «зрелости» шейки матки, которая достигается в результате деструктивных изменений ее соединительнотканного каркаса. Ранее была показана роль нейтрофилов на локальном уровне в ремоделировании тканей шейки матки в конце гестации. Выход нейтрофилов из сосудистого русла в ткань обеспечивается специфическими рецепторами на поверхности клетки, в частности CD62L молекула-
ми, определяющими адгезию нейтрофилов к эндотелию. Функциональная активность нейтрофилов регулируется TGFp. Однако данные о взаимосвязи системной продукции TGFp с уровнем функционального состояния периферических нейтрофилов в конце гестации практически отсутствуют. В связи с этим, целью работы было установить закономерности изменения уровня экспрессии CD62L молекул периферическими нейтрофилами и сывороточного содержания TGFP2 у беременных женщин в 38-40 недель гестации в зависимости от степени «зрелости» шейки матки для уточнения иммунных механизмов, определяющих подготовку организма к родам. Было обследовано 78 первобеременных женщин 38-40 недель гестации: 1-я группа - 31 женщина с «незрелой» шейкой матки, 2-я - 26 женщин с «недостаточно зрелой» и 3-я - 21 женщина со «зрелой». Материалом служила периферическая венозная кровь. Методом проточной цитометрии определялось относительное содержание CD62L+ нейтрофилов. Сывороточный уровень TGFP2 определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа на микропланшетном ридере Multiscan EX с помощью коммерческой тест-системы (Bender MedSystems). Анализ проводился в соответствии с протоколом фирмы-производителя. Анализ полученных данных показал, что относительное количество CD62L+ нейтрофилов в периферической крови женщин с «незрелой» шейкой матки было минимальным. В группе с «недостаточно зрелой» шейкой матки исследуемый показатель был достоверно выше, чем в группе с «незрелой» шейкой матки, но ниже, чем в контрольной группе (p<0,01 в обоих случаях), а в группе женщин со «зрелой» шейкой матки содержание периферических нейтрофилов, экспрессирующих на своей поверхности молекулы CD62L было максимальным. Содержание TGFP2 в сыворотке периферической крови снижалось в процессе подготовки организма к родам. Так, наибольшие значения уровня TGFP2 отмечались в группе с «незрелой» шейкой матки, а минимальное- в группе со «зрелой» шейкой матки (p>0,05). Таким образом, проведенное нами исследование свидетельствует о том, что уровень экспрессии адгезионных молекул на поверхности периферических нейтрофилов коррелирует со степенью зрелости тканей шейки матки в процессе ее созревания. Снижение сывороточного содержания TGFP2 в процессе подготовки организма к родам, по-видимому, связано с возрастанием функциональной активности циркулирующего пула периферических нейтрофилов, что необходимо для тканевой реорганизации в шейки матки и развязыванию родовой деятельности.
Беременность у мышей ассоциирована с появлением необычной популяции Сй40+арТ-лимфоцитов в периферических органах иммунной системы
Н.С. Глебездина, Е.М. Куклина
Учреждение Российской академии наук Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН, Пермь
В наших недавних исследованиях была показана возможность экстратими-ческой реаранжировки генов Т-клеточного рецептора у беременных мышей. В связи с этим возник вопрос о механизмах индукции этой реаранжировки. В частности, мы предполагаем, что нетипичная для Т-лимфоцитов мембранная молекула CD40 - фактор, который дает сигнал к реаранжировке генов Т-клеточного рецептора на периферии, по аналогии с ее функцией в В-лимфоцитах. Цель: исследование экспрессии молекулы CD40 арТ-лимфоцитами периферических лимфоидных органов при беременности, а также возможного вклада данной молекулы в индукцию реаранжировки генов Т-клеточного рецептора на периферии. Методы исследования: работа была проведена на беременных самках мышей Swiss, у которых исследовались лимфоциты периферических лимфоидных органов: селезенки и лимфатических узлов (дренирующих матку - парааортальных, и не дренирующих - паховых и подмышечных), а также на Т-лимфоцитах периферической крови беременных женщин. Экспрессия мембранной молекулы CD40 на периферических арТ-лимфоцитах оценивалось проточной цитометрией. Наличие процессов реаранжировки определялось по экспрессии в клетках рекомбиназы RAG-1 (Recombination Activating Gene) - также проточной цито-
метрией. Результаты: у мышей Swiss, начиная со второй половины беременности (10-11 день) в парааортальных лимфоузлах регистрируется нетипичная популяция С040+арТ-лимфоцитов. Как правило, зрелые Т-лимфоциты лишены молекулы CD40, напротив, они экспрессируют рецептор для CD40, поскольку С040-индуцированный сигнал необходим для адекватной активации лимфоцита в ответ на антиген. В меньшей степени С040+арТ-лимфоциты выявлялись в селезенке (1,5-2 %), и фактически отсутствовали в периферической крови (0,1-0,3 %), а также в паховых и подмышечных лимфатических узлах (0,3-0,7 %). У небеременных мышей С040+арТ-лимфоциты в значимых количествах не определялись ни в одном из упомянутых органов. На Т-лимфоцитах периферической крови беременных женщин экспрессии CD40 также не определено. Анализ экспрессии рекомбиназы RAG-1 в С040-/С040+арТ-лимфоцитах не выявил четкой связи между присутствием на мембране С040 и активацией процессов реаранжировки в клетке. Таким образом, установлено, что беременность у мышей ассоциирована с экспрессией молекулы СЭ40 на мембране арТ-лимфоцитов периферических лимфоидных органов, однако роль данной молекулы в индукции процессов экстратимической реаранжировки генов антигенного рецептора остается под вопросом. Работа поддержана грантом РФФИ № 08-04-01441-а.
Эритрофагоцитоз в раннем постнатальном онтогенезе у крыс в норме и после перенесенного пренатального стресса
Е.К. Голубева, С.Б. Назаров
ГОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия Росздрава», Иваново
Постоянство концентрации циркулирующих эритроцитов достигается благодаря координации процессов их образования и разрушения. При наличии в организме двух принципиально различных механизмов эритродиереза (внутрисосудистого и внутриклеточного) основная масса красных клеток крови подвергается внутриклеточному гемолизу. Ведущая роль в элиминации эритроцитов принадлежит тканевым макрофагам. Интенсивность эритрофагоцитоза зависит от антигенных взаимоотношений между эритроцитами и макрофагами. Состояние, значение и физиологические механизмы эритродиереза в раннем возрасте остаются неясными. Известно, что воздействие экстремальных факторов на организм матери во время беременности влияет на развитие потомства в целом и отдельных его систем. Тем не менее, влияние пренатального стресса на указанные харак
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.