НЕЙРОХИМИЯ, 2011, том 28, № 1, с. 55-59
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ^^^^^^^^^^^^ РАБОТЫ
УДК 615.21+615.256.51
ЭФФЕКТЫ СЕЛЕКТИВНЫХ ИНГИБИТОРОВ ОБРАТНОГО ЗАХВАТА СЕРОТОНИНА НА ТРЕВОЖНОЕ ПОВЕДЕНИЕ И АКТИВНОСТЬ ГИПОФИЗАРНО-АДРЕНАЛОВОЙ СИСТЕМЫ У ПРЕНАТАЛЬНО СТРЕССИРОВАННЫХ САМЦОВ КРЫС © 2011 г. С. Г. Пивина, Ю. О. Федотова, В. К. Акулова, Н. Э. Ордян*
Лаборатория нейроэндокринологии, Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН, Санкт-Петербург
Изучались эффекты селективных ингибиторов обратного захвата серотонина — флуоксетина и па-роксетина, введенных хронически в дозе 5.0 мг/кг, перорально с 1-го по 14-й день постнатального периода жизни на тревожное поведение и гормональную стрессорную реактивность взрослых пре-натально стрессированных самцов крыс. Выявлено, что пренатальный стресс понижал уровень тревожности у взрослых самцов крыс. Хроническое введение пароксетина не изменяло тревожное поведение пренатально стрессированных самцов, а введение флуоксетина приводило к анксиогенно-му эффекту, тем самым, нивелируя воздействие пренатального стресса на тревожное поведение самцов крыс. Пренатальный стресс оказал существенное влияние на динамику стрессорного ответа гипофизарно-адреналовой системы самцов, что выражалось в нарушении регуляции системы по механизму обратной связи в условиях стрессорной активации. Хроническое введение пароксетина или флуоксетина полностью корректировало динамику стрессорного уровня кортикостерона в крови пренатально стрессированных самцов.
Ключевые слова: флуоксетин, пароксетин, тревожность, кортикостерон, поведение, гормональный анализ, пренатальный стресс, самцы крыс.
ВВЕДЕНИЕ
В последние годы обращают на себя внимание исследования, направленные на определение роли пренатального стрессорного воздействия во время беременности в последующем развитии в постна-тальный период когнитивно-аффективных расстройств [1, 2]. Стресс, который матери переживали во время беременности, вызывает у экспериментальных животных психоэмоциональные отклонения [2, 3]. У подопытных крысят после пренаталь-ного стрессирования матерей выявлены иммунные и неврологические расстройства [4], а также изменение нейроэндокринной регуляции репродукции и стресс-реактивности [3]. Пренатальный стресс матерей приводит к психоэмоциональным расстройствам у потомства, особенности и степень выраженности которых зависят от пола и сроков воздействия [1, 4, 5]. В доступной нам литературе обнаружены данные об изменении функционального состояния серотонинергической системы у потомства крыс, переживших пренатальный стресс, что является возможным механизмом предрасположенности к вызванным стрессами нарушениям эмоционально-мотивационной сферы [6]. Однако в настоящее время полностью отсутствуют данные
*Адресат для корреспонденции: 199034 Санкт-Петербург, наб. Макарова, 6, факс (812) 328 05 01, тел. (812) 328-07-01, e-mail: neo@infran.ru
как в отечественной литературе, так и в зарубежной о каких-либо подходах к фармакологической коррекции и профилактики последствий материнского стресса у особей женского пола. Кроме того, в данной ситуации, по-видимому, весьма важно учитывать определенные критические периоды постна-тального развития у пренатально стрессированных особей, когда только возможно эффективно осуществлять направленные фармакологические воздействия.
В связи с этим цель данного исследования состояла в оценке отсроченных эффектов селективных ингибиторов обратного захвата серотонина с разным механизмом действия, введенных непосредственно в течение первых двух недель постнаталь-ного развития, на поведенческий статус пренаталь-но стрессированных половозрелых самцов крыс, рожденных самками, подвергшимися пренатально-му стрессу.
Наряду с этим известно, что стресс во время беременности приводит также к сенситизации различных нейроэндокринных систем, таких как ги-поталамо-гипофизарно-гонадная и гипоталамо-гипофизарно-адреналовая с изменением функциональной активности и чувствительности к регуля-торным сигналам во всех звеньях этих систем [4, 7, 8]. В литературе имеются многочисленные указания на изменение стрессореактивности гипофизар-
но-адреналовой системы (ГАС) у крыс, рожденных от матерей, которые во время беременности подвергались действию стресса [7, 8]. Ранее нами было показано, что наиболее объективную оценку стрес-сорной активности ГАС можно получить только при исследовании динамики выброса кортикостерона надпочечниками в ответ на действие стресса [5, 9]. Поэтому нами было проведено исследование уровня кортикостерона в крови в ответ на стрессорное воздействие в различные временные интервалы у пренатально стрессированных самцов крыс, получавших неонатально ингибиторы обратного захвата серотонина.
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В работе было использовано потомство от 12 первородящих самок крыс линии Спрег-Доули (Колтуши, Россия), которых содержали в стандартных условиях вивария с неограниченным доступом к воде и пище. Моделирование пренатального стресса осуществляли следующим образом: беременных самок (n = 9) с 15 по 18 день гестации подвергали ежедневному иммобилизационному стрессу в узких пластиковых пеналах размером 20 х 7 х 6 см в условиях повышенной освещенности [9]. Контрольных беременных самок (n = 3) оставляли ин-тактными. Полученное от интактных беременных самок нестрессированное потомство в количестве 11 особей представляло собой контрольную группу самцов крыс, получавших физиологический раствор (группа 1). Все пренатально стрессированное потомство мужского пола было разделено на следующие группы по 11—12 особей в каждой: 2-я группа — пренатально стрессированные самцы, получавшие физиологический раствор; 3-я группа — пренатально стрессированные самцы, получавшие пароксе-тина гидрохлорид (СмитКляйн Бичем Фармасью-тикалз, Франция) в дозе 5.0 мг/кг; 4-я группа — пре-натально стрессированные самцы, получавшие флуоксетина гидрохлорид (Sigma, USA) в дозе 5.0 мг/кг. Введение препаратов и физиологического раствора осуществляли с 1-го по 14-й день постна-тального периода жизни, перорально.
Поведенческие тесты были выполнены по достижению крысятами мужского пола возраста 3 месяцев. Все животные за неделю до экспериментов подвергались ежедневному взятию в руки с целью адаптации к экспериментатору. Уровень тревожности оценивали в тесте "приподнятый крестообразный лабиринт" [10]. Характер поведенческих реакций, таких как общая двигательная активность (горизонтальная и вертикальная) и продолжительность груминга, регистрировали в тесте "открытое поле" [11].
Исследование динамики стрессорного ответа ГАС проводили на половозрелых самцах [5]. В качестве стрессора использовали 20-минутную иммобилизацию в узких пластиковых пеналах. Уровень
кортикостерона определяли в плазме крови, взятой из хвостовой вены, до начала стрессирования (ба-зальный уровень) и далее через 20 и 180 мин. Схема опыта была построена таким образом, что у одного животного кровь отбирали только 2 раза. Кровь после забора центрифугировали и сохраняли при —20°С. Содержание кортикостерона в плазме крови определяли радиоиммунологическим методом с использованием антисывороток компании Sigma (USA) и [1,2,6,7-3Н]-кортикостерона с удельной активностью 76.5 Кю/ммоль (NEMTM Life Science Products, Boston, USA).
Все исследования проводились согласно этическим принципам, изложенным в Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей.
Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием двухфакторного дисперсионного анализа one-way ANOVA test с последующим Dunnett's post-hoc test с помощью пакета программ SPSS 9.0. Различия между значениями приp < 0.05 считали статистически значимыми.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В тесте "приподнятый крестообразный лабиринт" у пренатально стрессированных крыс отмечалось достоверное повышение времени пребывания в "открытых" рукавах и количества заходов в эти рукава (р < 0.05, рис. 1а, 1б) по сравнению с контролем (группа 1). Введение пароксетина у крыс приводило к достоверному увеличению времени пребывания в "открытых" рукавах только по сравнению с группой 1 (р < 0.05, рис. 1а). С другой стороны, введение флуоксетина пренатально стресси-рованным самцам достоверно понижало время нахождения в "открытых" рукавах и число заходов в эти рукава по сравнению с контролем (группа 1) и группой пренатально стрессированных крыс (группа 2).
В тесте "открытое поле" пренатальный стресс у взрослых самцов крыс достоверно повышал горизонтальную двигательную активность и не оказывал какого-либо влияния на вертикальную двигательную активность и продолжительность груминга по сравнению с контролем (р < 0.05, рис. 2а, 2б, 2в). Введение пароксетина или флуоксетина понижало горизонтальную двигательную активность у прена-тально стрессированных самцов в тесте "открытое поле" по сравнению с группой 2 (р < 0.05, рис. 2а). Наряду с этим, отмечалось достоверное увеличение продолжительности груминга у пренатально стрессированных самцов крыс, получавших флу-оксетин, по сравнению с контрольной группой крыс (группа 1) и группой пренатально стрессированных самцов (группа 2) (р < 0.05, рис. 2в).
*# -ь-
*# -Ï-
60
50
40
30
20
10
0 6
5
4
3 2 1
0
Рис. 1. Влияние флуоксетина и пароксетина на тревожное поведение взрослых пренатально стрессированных самцов крыс. Диаграмма 1а Ось Х — Группы животных
Ось Y — Время нахождения животного в открытых рукавах (сек) Диаграмма 1б Ось Х — Группы животных
Ось Y — Количество заходов животного в открытые рукава (раз)
Светлые столбики — контрольные самцы, получавшие растворитель (контроль 1), темные столбики — пренатально стрессированные самцы, получавшие растворитель (контроль 2), столбики с косой штриховкой — пренатально стрессированные самцы, получавшие пароксетин, светло-серые столбики — прена-тально стрессированные самцы, получавшие флуок-сетин.
Примечание: * — р < 0.05, достоверное отличие от контрольных самцов (контроль 1); # — р < 0.05, достоверное отличие от пренатально стрессированных самцов (контроль 2). Данные представлены в виде M± m, количество животных в гр
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.