= Объединенный иммунологический форум, Нижний Новгород 2013
КОМПЛЕМЕНТ И ДРУГИЕ ФАКТОРЫ ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА
Корреляционные взаимосвязи между параметрами активности комплемента и уровнем ^реактивного белка у пациентов кардиологического профиля
Бельтюков П. П.1,3, Оськина Д. Г.1, Азовцева Е. А.2, Бельтюкова М. Е.3
' НИИ гигиены, профпатологии и экологии человека ФМБА России,2 Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И. П. Павлова,3 Федеральный центр сердца, крови и эндокринологии имени В. А. Алмазова, Санкт-Петербург, Россия
Изменения активности комплемента при воспалительных реакциях, сопровождающих инфаркт миокарда и оперативные вмешательства на сердце, как правило, проявляются снижением содержания отдельных компонентов комплемента вследствие увеличения его потребления и одновременным снижением уровня функциональной активности комплемента. Вместе с тем известно, что повышение содержание С-реактивного белка (СРБ) способствует повышению активности комплемента. Поэтому оценка активности комплемента на фоне изменений уровня СРБ требует понимания взаимосвязей между функциональными характеристиками активности комплемента и белками острой фазы. Материалы и методы. В работе оценены корреляционные связи между параметрами гемолитической активности комплемента при его активации по альтернативному и классическому путям с использованием в качестве клеток-мишеней эритроцитов кролика и уровнями С3, С4, СРБ и 1дМ. Исследованы 32 образца крови пациентов кардиологического стационара (21 мужчина и 14 женщин в возрасте от 32 до 76 лет). Кинетическим методом определены параметры комплемент-опосредованного гемолиза (Над, V ^ Ттах) при активации комплемента по альтернативному пути (в присутствии ЭГТА-мединалового буфера и ионов Мд2+) и при суммарной активации по классическому и альтернативному путям (в мединаловом буфере, содержащем Са2+ и Мд2+). Уровни С3, С4 и СРБ определены турбидиметрически, содержание 1дМ - иммуноферментным методом.
Результаты и обсуждение. Установлена статистически значимая корреляция между скоростью лизиса (V 5 ив|) при анализе суммарной активности комплемента и уровнем СРБ в крови (г=0,551, р<0,05 при п=16), но только в тех случаях, когда уровень СРБ находился на верхней границе нормы или превышал ее (не более чем в 10-11 раз, т. е. в пределах от 6 до 62,5 мг/л). Как и следовало ожидать, корреляции между V 5 АР для АПК и уровнем СРБ выявлено не было, поскольку эффекты СРБ связаны с влиянием на систему комплемента на уровне С^. Расчетный параметр, равный разности V 5 ив|-^ АР и отражающий активацию комплемента по классическому пути, оказался так же тесно связан с уровнем СРБ (г=0,65, р<0,05 при п=16). Уровни С3 и С4 достаточно тесно связаны с этим же параметром (г=0,613 и 0,736, соответственно, р<0,05) при любых значениях концентраций СРБ (п=32) и в еще большей степени в образцах сывороток крови с высоким уровнем СРБ (г=0,682 для С3 и 0,831 для С4, р<0,05, п=16). В меньшей степени, но статистически значимо (р<0,05) содержание С3 и С4 связано с уровнем V у вв| (г=0,519 для С3 и 0,599 для С4). Важно отметить,
что величина V АР (скорость лизиса при активации по альтернативному пути) и концентрации С3 и С4 не имеют статистически значимой корреляции. При оценке взаимосвязей между уровнем 1дМ и параметрами функциональной активности комплемента оказалось, что от него в большей степени зависит величина V 5ив| вне зависимости от уровня СРБ (г=0,614, р<0,05 при п=32) и V АР, при высоком уровне СРБ (г=0,565, р<0,05 при п=16). Выявленные зависимости укладываются в существующие представления о роли СРБ и его влиянии на систему комплемента. Для учета возможных проявлений влияния СРБ при его патологическом уровне в крови на процессы активации комплемента необходимо иметь четкое представление
0 концентрационно-функциональных взаимосвязях между системой комплемента и белками острой фазы.
Оценка показателей врожденного иммунитета слизистой полости носа у детей
Ганковский А. В., Зайцева И. А.2, Рахманова И. В.1
1 Российский Национальный Исследовательский Медицинский Университет им. Н. И. Пирогова Минздрава России,2 НИИ вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова РАМН, Москва, Россия
В настоящей работе проведено изучение экспрессии генов молекул врожденного иммунитета в слизистой оболочке полости носа у здоровых детей
в возрасте от 2-х до 7-ми лет и детей с гипертрофией аденоидных вегетаций с острыми средними отитами в анамнезе. Был применен аналитический подход в оценке врожденного иммунитета слизистой полости носа, включающий определение экспрессии генов: рецепторов М2, М4 и М9, распознающих
широкий спектр патогенов бактериальной и вирусной природы; эффектор-ных молекул, включая, противомикробные пептиды (а-дефенсин - ИЫР1, в-дефенсины слизистой Н1^1 и Н1^2) и цитокины. Целью настоящей работы является исследование факторов врожденного иммунитета при гипертрофии аденоидных вегетаций. Материалы и методы. В контрольную группу было включено 33 здоровых ребенка, а в основную с гипертрофией аденоидных вегетаций - 45 детей. У пациентов всех групп получали соскоб со слизистой полости носа и определяли экспрессию генов и дефенсинов. Из клеток слизистой оболочки полости носа была выделена РНК с помощью набора «РИБО-сорб» (ИЛС, РФ), далее проведена реакция обратной транскрипции (набор ОТ-1, Синтол, РФ) и ПЦР-РВ («Набор реагентов с SYBR Сгееп1», Синтол, РФ) на амплификаторе ^о^епе 0 (0!АСЕЫ, Германия). Результаты. На основании наших исследований было показано, что в слизистой оболочке полости носа здоровых детей экспрессируются гены распознающих рецепторов врожденного иммунитета М2, М4, М9 и дефенсинов, осуществляющих прямое противобактериальное и противовирусное действие.
У здоровых детей прослеживалась общая характеристика экспрессии генов цитокинов в слизистой оболочке носа. Необходимо отметить, что у обследованных детей наблюдалась высокая экспрессия гена противоспалительного цитокина ИЛ-10 (в 100 % случаев) и низкийуровень экспрессии гена ИЛ-18 и ФНОа. В группе детей с гипертрофией аденоидных вегетаций с острыми средними отитами выявлен дисбаланс в механизмах защиты слизистой оболочки
Объединенный иммунологический форум, Нижний Новгород 2013
157
полости носа. Резкое увеличение экспрессии генов рецептаров, распознающих бактериальные патогены (М2, 1Ш), сочетается со сниженной экспрессией генов эффекторных молекул противомикробных пептидов (в-дефенсинов). Выявленные изменения в распознающих и эффекторных молекулах врожденного иммунитета могут быть причиной, приводящей к снижению защиты слизистых оболочек ЛОР-органов и, как следствие, к развитию частых острых респираторно-вирусных инфекций, аденоидитов, средних отитов, и других заболеваний у пациентов данной группы.
Роль мембран в образовании нейтрофильных внеклеточных ловушек
Долгушин И.И., Савочкина А. Ю., Смирнова Т. Г., Савельева А.А., Маякова В. Б., Самусева И. В., Маркова В. А. Челябинская государственная медицинская академия Минздрава России, Челябинск, Россия
Актуальность. В 2004 году ученые Института инфекционной биологии имени Макса Планка открыли и расшифровали еще один используемый нейтрофила-ми механизм уничтожения патогенов - формирование внеклеточных ловушек. Формирование нейтрофильных внеклеточных ловушек (НВЛ) - это процесс активный, который характеризуется рядом морфологических изменений, происходящих в нейтрофиле. При формировании нейтрофильных ловушек ядерная мембрана растворяется и эу- и гетерохроматин гомогенизируются. Мембраны бактерицидных гранул распадаются, и ядерный материал вступает в непосредственный контакт с компонентами этих гранул. На завершающем этапе клеточная мембрана разрывается, и ловушки высвобождаются одновременно с гибелью клетки.
В связи с вышеизложенным, цель исследования - оценить участие мембран клетки в процессе образования НВЛ. В качестве мембраностабилизирующих препаратов был выбран преднизолон, который является стабилизатором клеточных мембран и мембран органелл.
Материалы и методы. Нейтрофилы выделяли из периферической крови на двойном градиенте фиколла-верографина, активировали взвесью ЛПС и добавляли преднизолон в концентрации, соответствующей средней терапевтической дозе для организма человека. Было использовано несколько контролей: первый контроль - нейтрофилы, инкубированные в присутствии физиологического раствора; второй контроль - нейтрофилы, активированные ЛПС. Все пробирки инкубировали в одинаковых условиях - при 37 °С в течение 30 минут. Материал наносили на предметное стекло, высушивали, фиксировали 96 % этиловым спиртом и мазок окрашивали 0,04 % раствором акридинового оранжевого, результат оценивали в люминесцентном микроскопе. Производили подсчет нейтрофилов с сегментированным ядром, клеток с недифференцированным ядром и нейтрофильных внеклеточных ловушек с процентным соотношением этих структур.
Результаты и обсуждение. При инкубации чистой фракции нейтрофилов в присутствии преднизолона, существенных изменений в образовании НВЛ не происходит. Однако, необходимо отметить, что ЛПС активирует процесс формирования НВЛ, но инкубация нейтрофилов одновременно с ЛПС и пред-низолоном, приводит к снижению НВЛ. Таким образом, мембраностабилизи-рующее действие преднизолона на нейтрофил делает его невосприимчивым к внешним сигналам, а процесс формирования НВЛ может реализовываться только активными нейтрофильными гранулоцитами.
Содержание сероводорода и оксида азота в крови у здоровых фертильных женщин
Назарова А.О.1, Ситникова О. Г.2, Клычева М.М.2, Козырина А. А.2, Жолобов Ю. Н.2, Назаров С. Б.2 ' Ивановская государственная медицинская академия Минздрава России,2 Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В. Н. Городкова Минздрава России, Иваново, Россия
В настоящее время известно, что оксид азота (N0) и сероводород (И25) постоянно образуются в организме человека и животных. Основная роль этих газов связана
с регуляцией просвета сосудов, улучшением микроциркуляции за счет расслабления гладких мышц сосудов. По данным литературы N0 стимулирует систему клет
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.