РАДИАЦИОННАЯ БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ, 2007, том 47, № 1, с. 10-16
^ ОБЩАЯ
РАДИОБИОЛОГИЯ
УДК 599.5391.047
ПОСТРАДИАЦИОННЫЕ ЛЕТУЧИЕ ВЫДЕЛЕНИЯ И РАЗВИТИЕ ИММУНОСУПРЕССИВНОГО ЭФФЕКТА У ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ С РАЗЛИЧНЫМ ГЕНОТИПОМ
© 2007 г. В. Г. Исаева, Б. П. Суринов*
Медицинский радиологический научный центр РАМН, Обнинск
Появление в моче мышей линий СВА и С57В1/6 в ранние сроки после воздействия ионизирующей радиации в сублетальной дозе (4 Гр) летучих компонентов с иммуносупрессивными свойствами сочетается с нарушением способности к иммунному ответу на тимусзависимый антиген. Иммуносу-прессивная активность летучих выделений облученных мышей СВА и С57В1/6 не зависит от генотипа исследуемых линий, однако у мышей С57В1/6 она проявляется раньше, чем у СВА. Иммуносу-прессия у интактных реципиентов, обусловленная экспозицией их с пострадиационными летучими компонентами мочи, сохраняется в виде непродолжительного угнетения гуморального иммунитета, наиболее выраженного на протяжении 2-3-их сут.
Мыши, генотип, иммуногенез, летучие пострадиационные выделения, вторичные опосредованные нарушения, динамика.
Как известно, у млекопитающих имеются оль-факторные (обонятельные) механизмы, использующие хемосигнализацию не только для обмена информацией между особями, но и, как считают [1-3], для активизации защитных сил реципиентов. Роль хемосигналов рассматривается, как правило, для физиологических условий. Между тем все больше появляется фактов, свидетельствующих о наличии особых хемосигналов при патологии.
По нашим данным, при пострадиационных, постстрессорных и других состояниях в моче лабораторных животных появляются летучие компоненты (ЛК) с иммуносупрессивными свойствами, которые понижают гуморальный иммунный ответ интактных мышей на тимусзависимый антиген, обладают аттрактивными, привлекающими интактных особей свойствами [4-6], вызывают изменения в клеточном составе крови у крыс [7]. Иммунореактивность у мышей снижается не только после экспозиции с ЛК облученных син-генных, но и аллогенных животных (мыши с различным генотипом) [8] и даже ксеногенных (крысы) особей [7, 9]. Во всех случаях оценивалась им-муносупрессивная активность ЛК в отдельные ранние сроки после радиационного воздействия. Изменение рассматриваемого свойства мочи облученных мышей на более широком протяжении пострадиационного периода и развитие иммуно-
*Адресат для корреспонденции: 249039 Обнинск, Калужская обл., ул. Королева, 4, ГУ МРНЦ РАМН; e-mail: surinov@mrrc.obninsk.ru.
супрессивного эффекта у интактных особей-реципиентов ранее не анализировали.
В данной работе представлены результаты исследования динамики выделения иммуносупрес-сивных ЛК у мышей линий СВА и С57В1/6 после облучения в дозе 4 Гр и динамики развития имму-носупрессии у сингенных реципиентов после экспозиции с пострадиационными ЛК. Именно эффектам радиации в данной сублетальной дозе было посвящено большинство предыдущих наших исследований. Необходимость сравнения этих линий мышей вызвана тем, что они существенно отличаются по радиочувствительности и ольфак-торной реактивности.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА
Работа выполнена на половозрелых мышах-самцах линий СВА и С57В1/6 массой тела 22-24 г, содержавшихся в условиях вивария в пластиковых боксах по 6 особей на обычном пищевом рационе. До начала эксперимента животных выдерживали в течение 10 сут. Состав особей в группах не изменяли на протяжении всего эксперимента. Облучение проводили тотально в дозе 4 Гр у-из-лучающей 60Со-установке "Гамма-Целл-220" ("Atomic Energy Canada Limited", Канада) с мощностью дозы 0.5 сГр/с. В разные сроки пострадиационного периода на дно бокса укладывали лист фильтровальной бумаги, доступ к которой ограничивался вторым сетчатым дном, приподнятым над основным на 0.5 см. Такую подстилку, содержащую впитавшуюся в течение суток мочу облу-
Таблица 1. Иммунносупрессивная активность (М ± т) летучих компонентов (ЛК) мочи мышей СВА в разные сроки после облучения (4 Гр)
Животные -доноры ЛК Время после облучения, сут Селезенка Тимус
масса, мг общее число клеток, 1 х 106 число АОК, 1 х 103 масса, мг общее число клеток, 1 х 106
Интактные 1 108 ± 2.8 123 ± 12.6 178 ± 12.9 28.0 ± 1.0 53.0 ± 3.9
(100 ± 2.6) (100 ± 10.3) (100 ± 7.2) (100 ± 3.6) (100 ± 7.3)
Облученные 102 ± 7.6 100 ± 9.5 151 ± 10.5 27.0 ± 1.8 39.3 ± 1.8*
(94.6 ± 7) (81.0 ± 7.7) (84.8 ± 5.7) (96.4 ± 6.4) (74.2 ± 3.4)
Интактные 2 111 ± 6.4 125 ± 14.8 173 ± 21.0 29.0 ± 2.6 39.0 ± 1.3
(100 ± 5.8) (100 ± 11.9) (100 ± 12.0) (100 ± 9.0) (100 ± 3.3)
Облученные 108 ± 4.7 122 ± 17.5 122 ± 8.5* 25.8 ± 2.8 32.5 ± 7.1
(97.3 ± 4.3) (97.6 ± 14.0) (70.6 ± 4.9) (89.1 ± 9.7) (83.0 ± 18.0)
Интактные 3 110 ± 6.5 103 ± 6.7 187 ± 11.2 33.1 ± 2.6 35.5 ± 1.5
(100 ± 5.9) (100 ± 6.5) (100 ± 6.0) (100 ± 7.8) (100 ± 4.2)
Облученные 109 ± 3.4 100 ± 12.2 126 ± 13.7* 24.3 ± 3.0 36.1 ± 7.3
(99.0 ± 3.0) (97.0 ± 11.8) (67.7 ± 7.3) (73.6 ± 9.0) (101 ± 20.6)
Интактные 7 118 ± 2.0 162 ± 9.2 148 ± 13.6 35.8 ± 4.0 45.2 ± 3.8
(100 ± 1.7) (100 ± 5.7) (100 ± 9.0) (100 ± 11.0) (100 ± 8.4)
Облученные 119 ± 2.3 133 ± 5.4* 111 ± 6.0* 38 ± 5.4 38 ± 2.2
(101 ± 2.0) (82.0 ± 3.3) (75.0 ± 4.0) (106 ± 15.0) (84 ± 4.9)
Интактные 14 110 ± 5.3 130 ± 9.0 143 ± 22.0 39.2 ± 2.1 53.2 ± 4.3
(100 ± 4.8) (100 ± 7.0) (100 ± 15.0) (100 ± 5.4) (100 ± 8.1)
Облученные 145 ± 11.2* 170 ± 19.3 135 ± 20.0 19.2 ± 2.0* 31.6 ± 4.5*
(132 ± 10.2) (131 ± 14.8) (94.4 ± 14.0) (51.0 ± 5.1) (59.4 ± 8.5)
Интактные 21 138 ± 8.3 130 ± 7.1 260 ± 34.0 27.8 ± 3.7 44.0 ± 6.3
(100 ± 6.0) (100 ± 5.5) (100 ± 13.0) (100 ± 13.3) (100 ± 14.3)
Облученные 117 ± 8.2 120 ± 10.5) 191 ± 41.2 39.0 ± 5.2 38.4 ± 4.2
(84.8 ± 5.9) (92.0 ± 8.0) (73.5 ± 15.8) (140 ± 18.7) (87.3 ± 9.5)
Примечание. Здесь и в табл. 2-5 указаны сроки иммунизации мышей; в скобках - % к контролю. * Достоверные отличия (р < 0.05) от контроля.
ченных (опыт) либо интактных (контроль) животных-доноров, помещали в бокс к интактным мышам-реципиентам также под сетчатое дно. В контроле животных экспонировали с ЛК мочи интактных особей. Через сутки после экспонирования с летучими выделениями животных иммунизировали эритроцитами барана в дозе 1 х X 108 клеток/мышь. Для изучения динамики развития иммуносупрессии иммунизацию проводили в разные сроки после экспонирования. Через 4 сут мышей декапитировали под эфирным наркозом. Определяли общепринятыми методами массу тимуса и селезенки и число в них клеток, а также содержание антителообразующих клеток (АОК) в селезенке по методу Каннингема.
В каждой из обследованных групп мышей содержалось по 6 особей. Достоверность различий между группами оценивали с помощью критерия Стьюдента.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Результаты проведенного исследования показали, что ЛК мочи мышей линии СВА, выделяемые в течение 1-ых сут после облучения, не влияли на способность к антителогенезу интактных сингенных особей, но снижали общее число клеток в тимусе до 74.2 ± 3.4% по отношению к контролю (табл. 1). Антителогенез в селезенке интактных мышей СВА изменялся только после экспонирования с ЛК, продуцируемыми облучен-
Таблица 2. Иммуниосупрессивная активность (М ± т) летучих компонентов (ЛК) мочи мышей С57В1/6 в разные сроки после облучения (4 Гр)
Животные -доноры ЛК Время после облучения, сут Селезенка Тимус
масса, мг общее число клеток, 1 х 106 число АОК, 1 х 103 масса, мг общее число клеток, 1 х 106
Интактные 1 113 ± 6.6 97.5 ± 8.5 230 ± 14.9 50.7 ± 5.1 76 ± 8.5
(100 ± 5.8) (100 ± 8.8) (100 ± 6.5) (100 ± 10.0) (100 ± 11.0)
Облученные 131 ± 7 86 ± 8.1 150 ± 22* 43.8 ± 3.5 59.3 ± 10.0
(116 ± 6.2) (88 ± 8.3) (65 ± 9.6) (86.4 ± 6.9) (78.0 ± 13.0)
Интактные 2 150 ± 10.0 97.0 ± 6.7 243 ± 21.0 39.0 ± 3.0 60 ± 3.9
(100 ± 7.0) (100 ± 6.9) (100 ± 8.6) (100 ± 8.0) (100 ± 6.5)
Облученные 121 ± 8.3 75.0 ± 5.6* 166 ± 16.6* 38.0 ± 1.7 54.0 ± 5.0
(81.0 ± 5.5) (77.0 ± 5.8) (68.0 ± 6.8) (97.0 ± 4.4) (90.0 ± 8.3)
Интактные 3 126 ± 9.0 103 ± 16.0 165 ± 8.0 59.0 ± 4.4 110 ± 8.7
(100 ± 7.3) (100 ± 15.5) (100 ± 4.8) (100 ± 7.5) (100 ± 7.9)
Облученные 141 ± 4.6 98.0 ± 6.6 159 ± 15.0 34.3 ± 3.4* 30.0 ± 3.0*
(112 ± 3.7) (95.0 ± 6.4) (96.0 ± 9.0) (58.0 ± 5.8) (27.3 ± 2.7)
Интактные 7 129 ± 10.3 128 ± 12.4 164 ± 48.3 31.0 ± 44.0 100 ± 18.0
(100 ± 8.0) (100 ± 9.7) (100 ± 29.0) (100 ± 14.0) (100 ± 18.0)
Облученные 137 ± 15.0 130 ± 15.0 189 ± 18.5 35.0 ± 3.5 84.0 ± 6.7
(106 ± 11.6) (102 ± 11.8 (115 ± 11.3) (13.0 ± 11.3) (82.0 ± 6.6)
Интактные 14 112 ± 15.5 102 ± 12.8 136 ± 15.5 44.0 ± 2.5 134 ± 4.3
(100 ± 13.8) (100 ± 12.6) (100 ± 11.4) (100 ± 5.7) (100 ± 3.7)
Облученные 99 ± 8.0 122 ± 10.2 120 ± 14.0 49 ± 1.1 160 ± 11.6
(88.0 ± 7.0) (120 ± 10.0) (88.0 ± 10.3) (111 ± 2.5) (119 ± 8.7)
Интактные 21 117 ± 9.9 122 ± 18.6 147 ± 24.5 42.8 ± 3.9 102 ± 7.2
(100 ± 8.5) (100 ± 15.0) (100 ± 16.6) (100 ± 9.0) (100 ± 7.0)
Облученные 102 ± 11.6 96.0 ± 8.7 109 ± 9.6 42.8 ± 4.5 120 ± 21.6
(87.0 ± 9.9) (78.7 ± 7.0) (74.0 ± 6.5) (100 ± 10.5) (118 ± 21.1)
ными особями в течение 2-, 3- и 7-ых сут пострадиационного периода. При этом содержание ан-тителообразующих клеток (АОК) снижалось соответственно до 70.6 ± 4.9, 67.7 ± 7.3 и 75.0 ± 4.0%. В другие сроки пострадиационного периода выделяемые ЛК не влияли на способность к антитело-генезу, но снижали у реципиентов общее содержание клеток в селезенке на 7-е сут, а также массу и общее содержание клеток в тимусе (14-е сут) у реципиентов.
В отличие от мышей СВА, ЛК облученных мышей С57В1/6 обладали способностью угнетать антителогенез у интактных сингенных реципиентов уже в 1-е сут после облучения, снижая содержание АОК в селезенке до 65.0 ± 9.6% от уровня контроля (табл. 2). Экспонирование реципиентов с ЛК мочи, выделяемыми в течение 2-х сут пострадиационного периода, приводило не только к снижению выраженности антителогенеза до 68.0 ± 6.8%, но и к понижению общего числа кле-
ток в селезенке до 77.0 ± 5.8%. Выделяемые в мочу мышей С57В1/6 в течение 3-их сут после облучения снижали массу органа и общее число клеток в тимусе интактных особей соответственно д
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.