НЕЙРОХИМИЯ, 2012, том 29, № 4, с. 335-339
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ РАБОТЫ
УДК 615.21+615.256.51
УЧАСТИЕ 5-НТ1А- И 5-НТ2А/2С-ПОДТИПОВ СЕРОТОНИНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ В ТРЕВОЖНОМ ПОВЕДЕНИИ ПРЕНАТАЛЬНО СТРЕССИРОВАННЫХ ОВАРИОЭКТОМИРОВАННЫХ КРЫС © 2012 г. Ю. О. Федотова*, С. Г. Пивина, Н. Э. Ордян
Лаборатория нейроэндокринологии Института физиологии им. И.П. Павлова РАН, Санкт-Петербург
Проведен сравнительный анализ действия антагониста 5-НТ1А рецепторов — МАМ-190 (0.1 мг/кг, внутрибрюшинно) и антагониста 5-НТ2А/2С рецепторов — кетансерина (0.1 мг/кг, внутрибрюшин-но), введенных хронически в течение 14 дней, на уровень тревожности пренатально стрессирован-ных самок крыс при экспериментальном дефиците эстрогенов, созданным овариоэктомией. Хроническое введение кетансерина овариоэктомированным пренатально стрессированным самкам оказывало анксиолитический эффект, а также корректировало нарушенные уровни фоллитропина, лютропина и эстрадиола. Введение МАМ-190 овариоэктомированным пренатально стрессирован-ным крысам повышало уровень тревожности и в еще большей степени ухудшало соотношение между уровнем тропных и периферических половых гормонов.
Ключевые слова: N^-190, кетансерин, серотониновыерецепторы, тревожность, гормональный статус, овариоэктомия, пренатальный стресс.
ВВЕДЕНИЕ
Тревога и субсиндромальные тревожные расстройства встречаются у 50—75% населения и являются наиболее распространенными формами нарушения психической адаптации [1]. Доказано, что серотонинергическая система головного мозга играет ведущую роль в патогенезе целого ряда аффективных расстройств [2, 6]. С другой стороны, выявлено тесное взаимодействие между овариальной гормональной и серотонинергиче-ской нейромедиаторной системами в механизмах обучения и памяти, полового поведения, сна, аффективных расстройств, депрессии и шизофрении [3, 16]. В настоящее время широко обсуждается вопрос о роли пренатального стресса в качестве одного из наиболее существенных факторов в развитии нарушений эмоциональных форм поведения и нейроэндокринных нарушений, особенно у особей женского пола. Наряду с этим доказано, что у крыс, рожденных от матерей, перенесших стресс во время беременности, наблюдаются значительные изменения в функциональном состоянии серотонинергической системы головного мозга [10, 11].
В предыдущих исследованиях авторами статьи было установлено, что хроническое введение антагониста 5-НТ2А/2С рецепторов — кетансерина (0.1 мг/кг, подкожно) овариоэктомированным
* Адресат для корреспонденции: 199034, Санкт-Петербург, наб. Макарова, 6, (812) 328 07 01, e-mail: julia.fedotova@ mail.ru.
самкам крыс оказывало анксиолитический эффект, тогда как хроническое введение антагониста 5-НТ1а рецепторов МАМ-190 (0.1 мг/кг, внутрибрюшинно) не изменяло характер тревожнопо-добного поведения у ОЭ самок в тесте приподнятый "крестообразный" лабиринт [9, 15]. Дальнейшие исследования позволили установить, что позитивный эффект кетансерина на показатели тревожного поведения овариоэктомирован-ных самок сопровождается нормализацией нарушений в уровне тропных и периферических половых гормонов, обусловленных дефицитом эстрогенов [12].
Учитывая вышеизложенное, можно предполагать, что эффекты психотропных препаратов могут различаться у нестрессированных и прена-тально стрессированных самок крыс, вследствие чего, может быть необходима иная схема проведения экспериментальной фармакотерапии. Таким образом, основываясь на данных о роли пре-натального стресса в механизмах аффективных расстройств и данных, полученных ранее о действии антагониста 5-НТ2А/2С- и 5-НТ1А рецепторов у самок крыс в условиях дефицита эстрогенов, было разработано данное исследование.
Цель настоящей работы — сравнительный анализ эффектов антагониста 5-НТ1А- и 5-НТ2А/2С рецепторов на тревожноподобное поведение и гормональный статус половозрелых самок крыс при экспериментальном дефиците эстрогенов, мате-
336
ФЕДОТОВА и др.
ри которых подверглись пренатальному стрессу в период беременности.
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В работе было использовано потомство от 12 первородящих самок крыс линии Вистар. Все животные содержались в одинаковых условиях в виварии в условиях 24-часового фоторежима (12 ч — день:12 ч — ночь, включение света в 7 : 00), контролируемой температуры (22°С ± 2°С) и влажности (65% ± 10%) воздуха при свободном доступе к воде и стандартному корму (гранулированный комбикорм). Все исследования проводились в утренние часы (10.00—13.00). Эксперименты осуществляли в соответствии с требованиями "европейской конвенции по защите позвоночных, используемых для экспериментальных и иных научных целей" (Страсбург, 1986). В случайном порядке для выполнения поведенческой методики крыс разделяли на группы по 10 особей в каждой.
Моделирование пренатального стресса осуществляли следующим образом. Беременных самок (п = 12) с 15-го по 19-й день гестации подвергали ежедневному иммобилизационному стрессу в течение 1 ч в узких пластиковых пеналах размером 20 х 7 х 6 см в условиях повышенной освещенности, которую создавали лампой 60 Вт, расположенной на высоте 30 см. Полученное от самок потомство содержали совместно с матерью до 30-дневного возраста и далее по 6 особей в клетке. Такой тип стрессорного воздействия на беременных самок крыс вызывает у их потомков женского пола выраженные нарушения в психоэмоциональной сфере (повышенную тревожность и депрессивность поведения) и способности к обучению, сопровождающиеся значительными изменениями активности гормональных систем [8].
По достижению самками, которые родились от матерей, подвергшихся пренатальному стрессу, 3-месячного половозрелого возраста осуществляли удаление яичников (овариоэктомию). Удаление яичников проводили согласно общепринятой методике [7]. Через 2 нед после операционного периода выполняли поведенческие и биохимические тесты. Анксиолитическое действие препаратов оценивали по поведению животных в тесте приподнятый крестообразный лабиринт [5]. Крыс помещали на центральную площадку, затем в течение 5 мин регистрировали количество заходов в закрытые рукава лабиринта, выходов в открытые рукава, время пребывания в закрытых и открытых рукавах. Влияние на двигательную активность и ориентировочно-исследовательское поведение изучали в тесте "открытое поле" [4]. Регистрировали в течение 3 мин количество перемещений с квадрата на квадрат (горизонтальная активность), вставаний на задние лапки (вертикальная активность), обследований
отверстий (норковый рефлекс), количество актов умывания и вылизывания (груминг) и актов дефекации.
Пренатально стрессированное потомство женского пола было распределено по следующим группам по 10 особей в каждой: 1-я группа — ин-тактные пренатально стрессированные (ПС) самки, получавшие физиологический раствор (контроль 1); 2-я группа — овариоэктомированные ПС самки, получавшие физиологический раствор (контроль 2); 3-я группа — овариоэктомированные ПС самки, получавшие 8-OH-DPAT (0.05 мг/кг, подкожно); 4-я группа — овариоэктомированные ПС самки, получавшие NAN-190 (0.1 мг/кг, внутрибрюшинно). Крысы контрольной группы получали эквиобъемное количество физиологического раствора. Введение фармакологических веществ осуществлялось в тех же дозах в течение 14 дней, что и в предыдущих исследованиях у овариоэктомированных самок, которые не подвергались пренатальному стрессу [9, 12, 15].
Уровень половых гормонов (лютеинизирую-щий гормон — Л Г, фолликулостимулирующий гормон — ФСГ, эстрадиол — Э и прогестерон — П) определяли в сыворотке крови с помощью гормональных тест-наборов для иммуноферментного анализа in vitro у человека (ХемаМедика, Россия) с предварительной раститровкой всех наборов и подбором оптимального разведения сывороток крови крыс для каждого набора.
Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием дисперсионного анализа one-way ANOVA test с последующим Dunnett's post-hoc тестом с помощью пакета программ SPSS 9.0. Различия между значениями при p < 0.05 считали статистически значимыми.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В тесте приподнятый "крестообразный" лабиринт хроническое введение кетансерина оварио-эктомированным ПС самкам приводило к анк-сиолитическому эффекту, достоверно повышая время нахождения и количество заходов в "открытые" рукава по сравнению с контрольными животными ([F(7.36) = 11.23,p < 0.05] и [F(5.72) = = 20.34,p < 0.01], соответственно табл. 1). Хроническое введение NAN-190 овариоэктомирован-ным ПС крысам, напротив, оказывало анксио-генное действие, достоверно понижая время нахождения и количество заходов в "открытые" рукава по сравнению с контрольными животными (р < 0.05, табл. 1).
В тесте "открытое поле" было найдено, что хроническое введение обоих серотонинергиче-ских веществ у овариоэктомированных ПС самок приводило к снижению горизонтальной и вертикальной двигательной активности, исследова-
Таблица 1. Влияние кетансерина и МАМ-190 на тревожноподобное поведение у пренатально стрессированных овариоэктомированных самок крыс
Группы животных Время в "открытых рукавах", с Время в "закрытых рукавах", с Количество заходов в "открытые рукава", раз Количество заходов в "закрытые рукава", раз
ПС интактные самки (контроль 1) 42.6 ± 4.2 213.6 ± 22.4 1.8 ± 0.2 3.8 ± 0.2
ПС овариоэктомиро-ван-ные самки (контроль 2) 21.6 ± 4.2* 278.4 ± 5.2* 0.4 ± 0.2* 3.9 ± 0.2*
ПС овариоэктомиро-ванные самки + МАМ-190 1.3 ± 0.2* ** 298.7 ± 6.8* 0.2 ± 0.1* ** 3.8 ± 0.2*
ПС овариоэктомиро-ван-ные самки + кетансерин 38.7 ± 2.6** 261.3 ± 4.6* 1.6 ± 0.2** 3.2 ± 0.6*
Примечание'. ПС — пренатально стрессированные крысы. * — р < 0.05, достоверное отличие от ПС интактных самок (контроль 1), ** — р < 0.05, достоверное отличие от ПС овариоэктомированных самок (контроль 2). Данные представлены в виде М ± т, количество животных в группах — N = 10.
Таблица 2. Влияние МАМ-190 и кетансерина на поведение в тесте "открытое поле" у пренатально стрессирован-ных овариоэктомированных самок крыс
Группы животных Двигательная активность Исследовательская активность Эмоциональность
Перемещение Вставание Груминг Дефекация
ПС интактные самки (контр
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.