НЕЙРОХИМИЯ, 2011, том 28, № 3, с. 232-235
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ РАБОТЫ
УДК 618.29-07:618.5-085.2/.3
ВЛИЯНИЕ ПРОИЗВОДНОГО ИНДОЛМОРФОЛИНА ПРИ ИНДУКЦИИ РОДОВ НА АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ В МОЗГЕ ПЛОДОВ КРОЛИКА
© 2011 г. М. М. Габаева, Л. А. Назарова*, Е. В. Базиян, А. А. Яковлева, Т. И. Опарина, В. М. Прокопенко, В. Л. Пастушенков, Н. Н. Константинова, Н. Г. Павлова
Научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта СЗО РАМН, Санкт-Петербург
В статье изучено влияние производного индолморфолина (Трисана) при индукции родов на активность ферментов антиоксидантной защиты в мозге у плодов, развивавшихся при нормальном (ин-тактные) и нарушенном (подопытные) плацентарном кровообращении. Показано, что Трисан проявляет антигипоксические и умеренные антиоксидантные свойства, снижая интранатальный окислительный стресс в ЦНС интактных и подопытных плодов.
Ключевые слова: гипоксия плода, мозг, плацентарная недостаточность, антиоксидантная система.
ВВЕДЕНИЕ
Известно, что в акушерской практике интрана-тальная гипоксия плода является второй по частоте причиной оперативного родоразрешения. При этом у плодов, развивавшихся при беременности в условиях хронической плацентарной недостаточности (ХПН), уже к началу родов снижена толерантность к гипоксии по сравнению с плодами, развивавшимися в условиях нормального плацентарного кровообращения.
При физиологических родах плод не испытывает гипоксии за счет депонирования между маточными сокращениями оксигенированной крови в венозном синусе и развития на фоне умеренной ги-поксемии адаптивно-приспособительных реакций [1]. При аномалиях родовых сил (дискоординиро-ванная или чрезмерная родовая деятельность), а также исходной хронической плацентарной недостаточности нарушение функционального состояния плода, сопровождающегося выраженной ги-поксемией/гипоксией, наблюдается с высокой частотой. При этом известно, что перинатальная гипоксия в 30% случаев является причиной повреждений ЦНС у детей раннего возраста [2, 3].
Однако спектр препаратов, предназначенных для лечения интранатальной гипоксии, в акушерской практике значительно ограничен. Очевидно, что внедрение новых патогенетически обоснованных подходов к терапии интранатальной гипоксии плода обеспечит рациональную коррекцию нарушений функционального состояния плода в родах и уменьшит частоту оперативного родоразрешения.
*Адресат для корреспонденции: 195298 Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3; e-mail: ngp05@yandex.ru.
Цель исследования состояла в изучении при индукции родов влияния производного индолморфо-лина (Трисана) на активность ферментов антиоксидантной защиты в мозге плодов кролика, развивавшихся при нормальном и нарушенном плацентарном кровообращении.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объектом экспериментального исследования явились 41 беременная самка кролика породы "Шиншилла". На 18-й день беременности в условиях асептики под эфирным масочным наркозом производили лапаротомию. В одном из рогов матки создавали плацентарную недостаточность путем перевязки около 1/3 преплацентарных маточных сосудистых ветвей у каждого второго из плодовме-стилищ (подопытные плоды). В другом роге оставались интактные плоды. На 30 день проводили индукцию сокращений матки внутривенным введением 1МЕ окситоцина. Через 10 минут после введения окситоцина на фоне развития индуцированных маточных сокращений контрольной группе самок (п = 23) вводили 2.0 мл физиологического раствора, а опытной группе (п = 18) — 5 мг Трисана в аналогичном физиологическому раствору объеме. Через 45 минут животных выводили из опыта путем воздушной эмболии. Извлекали плоды и их мозг.
В тканях мозга плодов контрольной и опытной групп самок определяли: активность глутатионпе-роксидазы (ГП) — по способности фермента окислять восстановленный глутатион в присутствии гидроперекиси третичного бутила [4]; активность глутатион-8-трансферазы (Г-8-1г) — по скорости ферментативного образования GS-2,4-динитро-бензола в реакции восстановленного глутатиона с
Показатели свободнорадикального окисления в мозгу плодов контрольной и опытной группы самок
Биохимические показатели Контрольная группа Опытная группа
ИНТАКТНЫЕ ПОДОПЫТНЫЕ ИНТАКТНЫЕ ПОДОПЫТНЫЕ
Светосумма (88) (отн. ед/мг белка) 41.2 ± 1.94 39.72 ± 1.78 32.35 ± 0.92 хх 33.22 ± 0.95АА
п = 32 п = 24 п = 28 п = 19
Общая антиоксидантная актив- 0.45 ± 0.01 0.42 ± 0.01* 0.45 ± 0.01 0.42 ± 0.0Ш
ность (отн. ед) п = 32 п = 24 п = 28 п = 19
Антирадикальная активность 256.05 ± 10.10 282.89 ± 8.17** 319.00 ± 9.73 хх 322.96 ± 10.11 ДА
(мкМ/мгб) п = 33 п = 23 п = 28 п = 19
Активность глутатионпероксида- 705.33 ± 63.04 736.31 ± 84.32 330.99 ±37.97 хх 315.65 ± 47.86 ДД
зы (мкМGSH/мин мгб) п = 32 п = 24 п = 26 п = 19
Активность глутатион-8-трансфера- 82.27 ± 2.84 82.14 ± 3.09 83.48 ± 3.07 88.34 ± 7.99
зы (мкМ GS-2,4ДНБ/мин мгб) п = 32 п = 26 п = 9 п = 7
Активность супероксид дисмутазы 22.18 ± 1.58 16.73 ± 0.85** 15.96 ± 0.57 хх 16.98 ± 0.51
(УЕ/мг белка) п = 33 п = 23 п = 28 п = 19
Примечание. *р < 0.05, **р < 0.01 дано по сравнению с интактными плодами контрольной группы; ■ р < 0.05 дано по сравнению с интактными плодами опытной группы; хх р < 0.01 дано по сравнению с интактными плодами контрольной группы; ДД р < 0.01дано по сравнению с подопытными плодами контрольной группы.
1-хлор-2,4-динитробензолом [5]. Интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) и общую антиоксидантную активность (ОАА) определяли методом хемолюминометрии. Уровень интенсивности ПОЛ определяли по величине светосуммы (88) за 30 секунд и измеряли в относительных единицах, которые соответствуют милливольтам. Величина ОАА коррелировала с величиной тангенса угла наклона кривой на стадии максимального убывания вспышки и измерялась в относительных единицах соответствующих милливольтам в секунду [6]; антирадикальную активность (АРА) и активность супероксиддисмутазы (СОД) спектрофото-метрическим методом [7—9].
Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием методов параметрической статистики (¿-критерий Стьюдента) и двухфакторного дисперсионного анализа.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Для сопоставления характера биохимических реакций, развившихся в мозге у подопытных и ин-тактных плодов контрольной и опытной группы животных, провели сравнение активности ферментов антиоксидантной защиты в мозге этих плодов.
В предыдущих наших исследованиях [10] было показано, что при введении самкам кролика с целью индукции родов окситоцина брадикардия развивалась как у интактных, так и у подопытных плодов. Однако у интактных плодов, в дальнейшем, наблюдалась тахисистолия, характеризующая адап-
тивную реакцию на развивающуюся умеренную ги-поксемию/гипоксию. В то же время у подопытных плодов в условиях хронически нарушенного плацентарного кровообращения брадикардия была стойкой, свидетельствующая о глубокой гипоксии.
Результаты биохимического исследования мозга интактных и подопытных плодов, контрольной группы самок в настоящем исследовании подтвердили данные функционального обследования плодов.
В таблице представлена суммарная активность ферментов антиоксидантной защиты в мозге ин-тактных и подопытных плодов контрольной и опытной группы самок. Как видно из таблицы комплексный показатель свободно радикального окисления (светосумма) в мозге интактных плодов контрольной группы самок не различался по сравнению с таковым подопытных плодов. Отсутствие подобных различий свидетельствует о том, что в мозге у интактных плодов развивался умеренный окислительный стресс, компенсация которого, видимо, осуществлялась за счет активации на 24% супероксиддисмутазы (р < 0.01). Подобную биохимическую реакцию наблюдали и другие авторы в условиях окислительного стресса. Она была направлена на поддержание гомеостаза на физиологическом уровне путем активации ферментативного звена антиоксидантной системы — повышения активности суперокиддисмутазы и глутатионпероксидазы [11, 12].
Отсутствие однонаправленных реакций в мозге подопытных плодов контрольных самок свидетель-
234
ГАБАЕВА и др.
ствует о срыве адаптивных биохимических реакций на фоне чрезмерного окислительного стресса.
Как видно из таблицы, общая антиоксидантная активность в мозге подопытных плодов контрольной группы самок была на 6% (р < 0.05) ниже, а антирадикальная активность (АРА) на 10% (р < 0.01) выше по сравнению с таковыми интактных плодов. Известно что, при гипоксии происходит активация свободнорадикального окисления (СРО) [13, 14]. Так новорожденные, внутриутробное развитие которых протекало в условиях хронической плацентарной недостаточности, подвержены высокому риску реализации токсического действия активных форм кислорода и продуктов их метаболизма [15]. Некоторые исследователи указывают на угнетение антиокислительной активности в мозге у перенесших гипоксию новорожденных к концу первой недели жизни, особенно выраженное после эпизода острой гипоксии [16]. Подобная реакция особенно выражена после перенесенной в родах острой гипоксии.
Активность глутатионпероксидазы как и активность глутатион^-трансферазы в мозге интактных и подопытных плодов контрольной группы самок не различались (таблица)
Таким образом, в мозге у подопытных плодов контрольной группы самок наблюдался умеренный окислительный стресс, попытка компенсации которого осуществлялась за счет активации антирадикальной активности.
После введения самкам Трисана (опытная группа) светосумма в мозге интактных и подопытных плодов также как и плодов контрольной группы самок была равнозначной. Однако, этот показатель был ниже как у интактных плодов на 21% (р < 0.01), так и у подопытных плодов на 16.4% (р < 0.01) в опытной группе самок по сравнению с таковыми плодов контрольной группы. Данные изменения скорее всего связаны с тем, что в отсутствии кислорода, Трисан выполнял роль альтернативного акцептора электронов, проявляя функцию низкомолекулярного антиогипоксанта. Это подтверждается отсутствием различий по активности супероксид-дисмутазы в мозге интактных и подопытных плодов в этой группе с
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.