КОМБИНИРОВАННЫЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ
УДК [57+61]::539.1.047:57.017.732:599.323.4
ВЛИЯНИЕ ВВЕДЕНИЯ АНАБОЛИКА ФЕНОБОЛИНА НА КРОВЬ, РЕПРОДУКТИВНУЮ СИСТЕМУ И УРОВЕНЬ СОДЕРЖАНИЯ ГОРМОНОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ У КРЫС-САМЦОВ, ОБЛУЧЕННЫХ
ФРАКЦИОНИРОВАННО
© 2011 г. Г. Г. Верещако, Г. А. Горох*, О. Л. Федосенко, Н. В. Гунькова,
Д. Л. Якушев,
Институт радиобиологии НАНБеларуси, Гомель, Беларусь
Изучали влияние анаболического препарата (феноболин) в дозе 2.5 мг/кг на некоторые показатели крови, репродуктивной системы, уровень содержания тиреоидных гормонов, кортикостерона и тестостерона в сыворотке крови крыс-самцов, подвергнутых фракционированному облучению в суммарной дозе 2.0 Гр (4 раза по 0.5 Гр с интервалом между фракциями 3 нед). Установлено существенное снижение количества лейкоцитов и лимфоцитов в крови после фракционированного облучения без введения и на фоне введения феноболина. Анаболический препарат вызывал выраженное падение относительной массы семенников и, особенно, эпидидимисов, а также резкое снижение числа зрелых половых клеток, выделенных из эпидидимисов. Сочетанное действие феноболина и фракционированного облучения (2.0 Гр) приводило к значительному уменьшению (в 3—5 раз) количества зрелых половых клеток в эпидидимисе. Феноболин в ряде случаев оказывал влияние на уровень содержания тестостерона в сыворотке крови интактных и облученных животных.
Анаболические препараты, феноболин, фракционированное облучение, крысы-самцы, кровь, лейкоциты, лимфоциты, семенник, эпидидимис, сперматогенные клетки, сперматозоиды, гормоны.
Е. Ф. Конопля
Стероидные препараты андрогенного и анаболического действия в последние десятилетия получили широкое распространение в клинической практике, в том числе, в лучевой терапии [1] и, особенно, в спорте [2—4]. Они используются для восстановления организма после физических нагрузок путем наращивания мышечной массы, что позволяет существенно увеличивать физическую работоспособность. Механизм их действия на клеточном уровне связан со стимуляцией синтеза нуклеиновых кислот и белка, повышением проницаемости клеточных мембран, а также активизацией синтеза макроэргов [2, 5, 6]. Анаболические стероиды способны ингибировать остеолиз и фиксировать кальций в костях, нормализовать обмен кальция и фосфора [3, 4]. Для достижения необходимого эффекта анаболические стероидные препараты обычно используются многократно и в повышенных дозах. Однако следует иметь в виду, что избыточное применение стероидных препаратов вызывает ряд нежелательных эффектов, в том числе токсическое действие на печень, снижение половой функции, гипертрофию тканей и т.д. [2, 3].
* Адресат для корреспонденции: Беларусь, 246007 Гомель, ул. Федюнинского, 4; ГНУ "ИРБ НАН Беларуси"; тел./факс: (0232) 57-07-06; e-mail: gyryn@tut.by.
Феноболин (17р-Окси-19-нор-4-андростен-3-он-17р-фенилпропионат) — известный стероидный препарат, обладающий значительным анаболическим действием. Считается, что его андро-генное действие менее выражено по сравнению с природными мужскими половыми стероидными гормонами. Представляло интерес выяснить возможное модифицирующее влияние препарата в условиях облучения на важнейшие системы организма, особенно на кроветворную и репродуктивную, учитывая также, что радиочувствительность ткани сперматогенного эпителия к хроническому и фракционированному облучению является более высокой, чем к острому [7—9] и особенно значимые эффекты проявляются в репродуктивной системе, начиная с дозы 2.0 Гр [10, 11]. Следует также отметить, что действие фракционированного облучения на организм с большим интервалом времени между фракциями до сих пор остается малоизученным.
Исходя из этого, в задачу настоящего исследования входил анализ действия многократного (4 раза) введения феноболина в дозе 2.5 мг/кг (2.5 мг/кг х 4) на состояние крови, репродуктивной системы и уровень гормонов в сыворотке крови крыс-самцов, подвергнутых фракционированному облучению в суммарной дозе 2.0 Гр (0.5 Гр х 4).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА
Опыты выполнены на белых крысах-самцах стадного разведения, возраст которых на начало эксперимента составлял 2 мес (неполовозрелые животные), содержавшихся в стандартных пищевых условиях вивария.
Все животные были разбиты на четыре группы.
1. Контрольные животные.
2. Животные, которым 4-кратно с интервалом в 3 нед между инъекциями внутримышечно вводили феноболин в дозе 2.5 мг/кг. Феноболин обладает пролонгированным действием, и в практике он обычно используется многократно, поэтому его введение в указанном режиме оптимально для достижения необходимого эффекта.
3. Животных, которых подвергали фракционированному облучению в суммарной дозе 2.0 Гр (0.5 Гр х 4 с интервалом между фракциями в 3 нед) на установке "ИГУР" (источник у-излучения 137сб, мощность дозы 92 сГр/мин).
4. Сочетанное действие феноболина и облучения при вышеуказанных условиях.
Таким образом, период времени с момента первого введения препарата и до заключительного облучения животных составлял 70 сут. На 3-, 10-, 30-, 90-е сут после последнего сеанса фракционированного радиационного воздействия, а в группе крыс, которым только вводили фенобо-лин соответственно на 10-, 17-, 37- и 97-е сут от начала опытов, животных декапитировали для получения материала для исследований. Контролем служили интактные животные аналогичного возраста и пола.
В каждый из указанных сроков животных взвешивали, затем после декапитации собирали кровь, извлекали семенники с придатками, массу которых оценивали также взвешиванием. В крови определяли количество лейкоцитов, грануло-цитов, лимфоцитов, моноцитов, эритроцитов, содержание гемоглобина на гемоанализаторе "СеШае МЕК-63-18 J/K" (Япония). В сыворотке крови с помощью наборов для иммунофермент-ного анализа определяли содержание тироксина, трийодтиронина, методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) тестостерона и кортикостерона. Рассчитывали относительную массу семенников и эпидидимисов. Один из семенников от каждой крысы, освобожденный от туники и кровеносных сосудов, использовали для получения суспензии сперматогенных клеток в 5%-ной уксусной кислоте с генцианвиолетом, в которой подсчитывали количество сперматоген-ных клеток, в том числе сперматогоний, сперма-тоцитов, сперматид, сперматозоидов и общее количество клеток всех типов в камере Горяева [12]. Зрелые половые клетки выделяли из эпидидими-сов, число которых определяли по [13]. Получен-
ные данные обрабатывали статистически общепринятыми методами с вычислением степени достоверности с использованием стандартного ¿-критерия Стьюдента при уровне значимости р <0.05.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Анализ гематологических показателей показывает, что количество лейкоцитов на 10-е сут после введения феноболина несколько повышается (111.5%), а в остальные сроки понижается, однако эти изменения не носят достоверного характера (табл. 1). Такая же тенденция просматривается и в отношении числа лимфоцитов крови. Что касается количества других клеток лейкоцитарного ряда (моноциты и гранулоциты), а также показателей красной крови (эритроциты и гемоглобин), то их отклонение от контроля несущественно, за исключением достоверного снижения содержания гемоглобина на 10-е сут и числа гранулоцитов на 17-е сут.
Выраженное падение числа лейкоцитов и лимфоцитов в крови крыс-самцов наблюдается после прекращения фракционированного облучения в суммарной дозе 2.0 Гр. Наиболее значительно оно проявляется на 3-и и 10-е сут после радиационного воздействия: количество лейкоцитов падает на 40—50%, а лимфоцитов — на 50—65% от контрольного уровня. В отдаленном периоде количество лейкоцитов частично или полностью восстанавливается, в то время как количество лимфоцитов остается на пониженном уровне вплоть до 90-х сут наблюдения включительно. Изменений показателей красной крови у облученных животных не наблюдалось: определяемые величины их существенно не отличаются от зарегистрированных в контроле. Только на 30-е сут после облучения выявляется достоверное снижение числа эритроцитов в крови (на 8.7%) при сохранении содержания гемоглобина на уровне контроля.
Сочетанное действие феноболина и радиационного воздействия в суммарной дозе 2.0 Гр на изучаемые гематологические показатели в основном повторяет эффекты облучения, т.е. снижение числа лейкоцитов и лимфоцитов, характерное для первых сроков наблюдения. Однако это уменьшение носит менее значимый характер, чем только при облучении, в чем проявляется, вероятно, модифицирующее действие препарата анаболического действия.
В результате исследования относительной массы семенников и эпидидимисов крыс выявлено их выраженное снижение во все сроки после введения феноболина, достигающее максимума на 17-е сут (табл. 2). В этот период падение относительных масс семенников достигает почти 34.8%, а эпидидимисов — 45.2%.
Таблица 1. Изменение гематологических показателей у крыс-самцов после введения феноболина (2.5 мг/кг), фракционированного облучения в суммарной дозе 2.0 Гр и их сочетанном воздействии
Сроки после Изучаемые показатели Серии опытов
облучения К Ф1 У Ф + У
3 сут Лейкоциты, х 109/л 8.9 ± 0.9 9.7 ± 1.0 5.4 ± 0.4* 5.9 ± 0.6
Лимфоциты, х 109/л 5.8 ± 0.8 6.1 ± 0.7 2.9 ± 0.3* 3.2 ± 0.5
Моноциты, х 109/л 0.4 ± 0.03 0.6 ± 0.1 0.5 ± 0.1 1.0 ± 0.2
Гранулоциты, х 109/л 2.6 ± 0.2 2.9 ± 0.7 2.1 ± 0.2 1.7 ± 0.2
Эритроциты, х 1012/л 10.2 ± 0.5 9.0 ± 0.1 8.6 ± 0.3 9.9 ± 0.3
Гемоглобин, г/л 166 ± 7.7 137 ± 2.7* 137 ± 2.9 153 ± 6.5
10 сут Лейкоциты, х 109/л 12.3 ± 1.1 8.5 ± 1.3 6.0 ± 0.6* 7.7 ± 0.5
Лимфоциты, х 109/л 8.1 ± 0.9 5.5 ± 1.0 2.9 ± 0.4* 4.2 ± 0.4
Моноциты, х 109/л 1.1 ± 0.2 1.1 ± 0.2 0.9 ± 0.2 0.9 ± 0.1
Гранулоциты, х 109/л 3.1 ± 0.4 1.8 ± 0.4* 2.3 ± 0.2 2.6 ± 0.2
Эритроциты, х 1012/л 8.6 ± 0.2 9.2 ± 0.1 9.1 ± 0.3 9.0 ± 0.1
Гемоглобин, г/л 137 ± 2.7 141 ± 1.2 140 ± 2.8 140 ± 2.0
30 сут Лейкоциты, х 109/л 13.6 ± 1.0 12.3 ± 1.5 11.4 ± 0.8 11.8 ± 0.9
Лимфоциты, х 109/л 8.4 ± 0.6 7.7 ± 1.3 6.1 ± 0.3* 6.7 ± 0.5
Моноциты, х 109/л 1.0 ± 0.1 1.1 ± 0.1 1.1 ± 0.1 1.6 ± 0.2
Гранулоциты, х 109/л 4.2 ± 0.5 3.5 ± 0.3 4.2 ± 0.5 3.5 ± 0.4
Эритроц
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.