РОССИЙСКИЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 2010, том 4(13), № 3, с. 261-266
ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ
ЗНАЧЕНИЕ ТРАНСФОРМИРУЮЩЕГО ФАКТОРА РОСТА-р И МАТРИКСНОЙ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗЫ-9 В ПАТОГЕНЕЗЕ АТЕРОСКЛЕРОЗА
© 2010 г. Е.В. Маркелова, Е.П. Турмова, А.А. Силаев, Н.И. Грачев, Е.А. Бычков, И.В. Чикаловец*
ГОУ ВПО Владивостокский государственный медицинский университет Росздрава,
Владивосток, Россия;
*Тихоокеанский институт биоорганической химии ДВО РАН, Владивосток, Россия
Поступила: 17.08.2010. Принята: 25.09.2010
Проведено исследование ТСБр и ММР-9 в сыворотке крови 79 пациентов с атеросклерозом. Из них первую группу составили 43 пациента с ишемической болезнью сердца, стенокардией напряжения и покоя на фоне атеросклероза коронарных артерий. Пациенты 1 группы были распределены на 3 подгруппы в зависимости от наличия и/или времени возникновения инфаркта миокарда в анамнезе перед операцией аортокоронарного шунтирования. Вторая группа состояла из 36 пациентов с облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей, недостаточностью кровообращения III, IV ст., поступивших в стационар на плановое лечение и по экстренным показаниям (острая окклюзия артерий и критическая ишемия конечностей). В результате исследования выявлен низкий уровень ТСБр и тенденция к увеличению ММР-9, как в группе пациентов с ИБС на фоне атеросклероза коронарных артерий, так и в группе пациентов с облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей. В группе пациентов с ишемической болезнью сердца уровень ТСБр был значительно ниже, чем при облитерирующем атеросклерозе сосудов нижних конечностей. При критической ишемии, развившейся при атеросклеротической окклюзии артерий, независимо от локализации поражения (коронарные артерии или артерии нижних конечностей), дефицит продукции ТСБр сопровождался активацией гипер-ергических, провоспалительных реакций, реализующихся, вероятно, за счет пролиферации и повышения функциональной активности лимфоидных клеток. Стандартная терапия, проводимая пациентам с облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей, повышает уровень ТСБр, тем самым, нормализует противовоспалительный контроль и снижает прогрессирование атеросклеротического повреждения.
Ключевые слова: цитокины, трансформирующий фактор роста-р, матриксная металло-протеиназа-9, атеросклероз
ВВЕДЕНИЕ
Атеросклероз — актуальная проблема современности по причине высокой заболеваемости и смертности населения [1]. Поражение артерий мышечного типа при атеросклерозе носит системный характер и представляет собой совокупность изменений всех слоев сосудистой стенки, сопровождающееся локаль-
Адрес: 690002, г. Владивосток, пр. Острякова 2,
кафедра патофизиологии.
E-mail: patphis-vl@mail.ru, eturmova@mail.ru
ным воспалением, отложением патологически модифицированных липидов, дисфункцией эндотелия с вовлечением в патологический процесс иммунокомпетентных клеток и гиперпродукцией различных биологически-активных веществ, в том числе цитокинов [1—5]. Основным источником выработки провоспалительных цитокинов при атеросклерозе являются активированные моно-нуклеары и сосудистый эндотелий [1, 4, 6]. На настоящий момент известно более тридцати семейств интерлейкинов, участвующих в атерогенезе. При этом важное значе-
ние придают трансформирующему фактору роста-р (ТСРР). Этот цитокин синтезируется различными типами клеток, включая тромбоциты, макрофаги, лимфоциты, фибробласты, костные клетки, кератиноциты и др. [6 — 8]. Среди различных функций ТСРР наиболее важной следует считать его участие в регенерации тканей. Известно, что ТСРР активирует хемотаксис воспалительных клеток и синтез экстрацеллюлярного матрикса, стимулирует продукцию фибронектина и коллагена фиб-робластами и повышает внедрение этих белков в экстрацеллюлярный матрикс [8]. Подтверждено влияние ТСРР на клеточную пролиферацию, дифференцировку и экспрессию генов всех основных типов клеток, вовлеченных в ранозаживление или в патогенез различных фиброзных заболеваний [7, 9]. Кроме митогенных, хемотактических и анаболических эффектов на внеклеточный мат-рикс, ТСРР участвует в модуляции клеточных и гуморальных механизмов воспаления и иммунного ответа [8, 10]. Доказано, что ТСРР ин-гибирует пролиферацию Т-лимфоцитов и вызывает супрессию цитотоксических Т-клеток [10].
Матриксная металлопротеиназа-9 (ММР-9) относится к подсемейству желатиназ — про-теолитических ферментов, расщепляющих основные компоненты внеклеточного матрикса. Продуцируется ММР-9 активированными макрофагами, эндотелиальными клетками, гранулоцитами, клетками трансформированных фибробластов и др. Экспрессия ММР-9 повышена в тканях, где идёт процесс ремо-делирования и ангиогенеза, значительна ее роль в патогенезе атеросклеротического поражения сосудов, формировании аневризмы, рестеноза коронарных артерий после проведении ангиопластики и/или стентирования и, в целом, в сохранении гомеостаза межклеточного матрикса [9, 11 — 14]. Однако дискута-бельным вопросом остается вариабельность изменений уровня ТСРР и ММР-9 в зависимости от уровня и тяжести атеросклеротическо-го поражения артерий [6, 8, 10].
Цель нашего исследования — оценить уровень ТСРР и ММР-9 при коронарном атеросклерозе и облитерирующем атеросклерозе артерий нижних конечностей (ОАНК).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Проведено наблюдение и обследование за 79 пациентами с диагнозом атеросклероз,
установленным с помощью клинического, лабораторного и инструментального (ангиография, ЭКГ, ЭХО-КГ) методов исследования. Все обследуемые пациенты были разделены на группы. Первую группу составили 43 пациента с ишемической болезнью сердца (ИБС), стенокардией напряжения и покоя на фоне атеросклероза коронарных артерий. При этом по Нью-Йоркской классификации кардиологов, III —IV функциональный класс стенокардии напряжения имело большинство пациентов (II ф.к. стенокардии регистрировался у 13,75%, III ф.к-у 77,5%, IV ф.к. — у 6,25% больных).
Обследование проводилось за сутки до проведения операции аортокоронарного шунтирования (АКШ) в Кардиохирургическом центре Приморской Краевой Клинической больницы № 1 г. Владивостока. Пациенты были разделены на 3 подгруппы: 1-ая — 15 человек (34,88%) — пациенты с ИБС, наличием инфаркта миокарда (ИМ) в анамнезе менее чем за 3 месяца до операции (ИБС, ранняя постинфарктная стенокардия); 2-ая — 20 человек (46,51%) — с ИБС, постинфарктным кардиосклерозом (ИМ в анамнезе с длительностью более 3 месяцев перед проведением АКШ) и 3 — пациенты с ИБС, стабильной стенокардией напряжения (II-ШФК) и стенокардией покоя без ИМ в анамнезе перед АКШ, и отсутствием постинфарктного кардиосклероза — 8 человек (18,61%).
Вторую группу обследованных составляли 36 пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей (ОАНК), недостаточностью кровообращения III, IV ст. Набор материала производился в отделении сосудистой хирургии Городской клинической больницы № 2 г. Владивостока. Пациенты данной группы были разделены на 2 подгруппы: первая — 17 человек с ОАНК, поступившие на плановое консервативное лечение, 2 подгруппа — больные с ОАНК, поступившие в отделение по экстренным показаниям (острая окклюзия артерий, критическая ишемия конечностей), 19 человек. Забор крови проводили при поступлении в стационар и в динамике на 10-е сутки после поступления. В стационаре пациенты получали базисную терапию дезагрегантами, антикоагулянтами, сосудистыми препаратами, физиолечение (лазеротерапию), симптоматическую терапию, а также лечебную физкультуру.
Контрольную группу составили 50 практически здоровых доноров, не являющихся род-
ственниками добровольцев основных групп, соответствующие основным группам по возрасту, полу, этнической принадлежности и не имеющие клинических и лабораторных признаков поражения сердечно-сосудистой системы.
Критерии исключения: тяжелые сопутствующие заболевания (сахарный диабет, гепатит и другие тяжелые заболевания); лица, неспособные понять цели и задачи исследования; отказ пациента от участия в исследовании.
Определение содержания TGFß и ММР-9 проводилось в сыворотке крови методом сэндвич-варианта ИФА с использованием реактивов «R&D Diagnostics Inc.», USA. Уровень TGFß выражали в пг/мл, уровень ММР-9 — в нг/мл. Математическая обработка полученных показателей проводилась параметрическими и непараметрическими методами с использованием критериев: Стьюдента, Уил-коксона и коэффициента линейной корреляции на персональном компьютере с использованием программы «Biostat».
РЕЗУЛЬТАТЫ
При оценке показателей у пациентов с ИБС на фоне атеросклероза выявлено значительное снижение TGFß, (р < 0,01) и тенденция увеличения ММР-9, по сравнению с показателями здоровых доноров (р > 0,05) (рис. 1).
При исследовании уровня TGFß у больных ОАНК также обнаружено достоверное его снижение по сравнению с показателями здоровых доноров (р < 0,01). При этом в общей группе пациентов с ОАНК значения TGFß были выше, чем в группе пациентов с ИБС на фоне атеросклероза коронарных артерий (р < 0,05). Не выявлено достоверных различий уровня ММР-9 у больных ОАНК от показателей пациентов с ИБС и контрольной группы, зарегистрирована лишь тенденция к повышению металлопротеиназы-9 в данной подгруппе (рис. 2).
При распределении пациентов с ИБС на фоне атеросклероза коронарных артерий на подгруппы выявлен низкий уровень TGFß и высокий уровень ММР-9 в подгруппе пациентов с атеросклерозом, ИБС стабильной стенокардией напряжения II — III ФК, без наличия ИМ в анамнезе перед АКШ (табл.).
Установлена тенденция повышения ММР-9 в данной подгруппе пациентов. Выявлена сильная корреляционная связь между TGFß
400 300 200 100 0
У///Л////Л
ШшШ
-1- ШШ//?
шШ,
ТСБ р (пг/мл)
В Пациенты с ИБС □ Пациенты с ОАНК И Контрольная группа
Рис. 1. Показатели ТСрр у пациентов с атеросклерозом. Оценка показателей ТСрр у пациентов с ИБС на фоне атеросклероза, у больных ОАНК и здоровых доноров. Выявлено значительное содержание ТСрр у пациентов с ИБС на фоне атеросклероза и у больных ОАНК по сравнению с показателями здоровых доноров (р < 0,01). При этом в общей группе пациентов с ОАНК значения ТСрр были выше, чем в г
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.