=Объединенный иммунологический форум, Нижний Новгород 2013
ИММУНОЛОГИЯ РАННЕГО И ПОЗДНЕГО ОНТОГЕНЕЗА (иммунология матери, плода и новорожденного; особенности иммунитета в постнатальном онтогенезе у детей; иммунология внутриутробных инфекций; иммунология старения)
Изучение иммунологических показателей в патогенезе и оценка влияния препарата Габриглобин на резервные возможности иммунокомпетентных клеток у больных хронической аутоиммунной крапивницей (ХАК)
Ащина Л. А.1, Коженкова С. В.1, Алешкин В. А.2, Лютов А. Г.2, Новикова Л. И.2
' Пензенский институт усовершенствования врачей Минздрава России, Пенза,2 Московский научно-исследовательский институт эпидемиологи и микробиологии им. Г. Н. Габричевского, Москва, Россия
В настоящее время изучение патогенеза и параметров иммунной системы у больных хронической рецидивирующей крапивницы (ХРК) является очень актуальным. ХАК составляет от 30 до 50 % в структуре ХРК. На сегодняшний день имеются успешные попытки применения препарата Габриглобин для лечения пациентов с ХАК. Данный препарат представляет собой внутривенный иммуноглобулин, однако его влияние на иммунокомпетентные клетки (ИКК) больных ХАК до сих пор не изучено. В связи с вышесказанным, целью работы явилось изучение основных иммунологических параметров в оценке патогенеза заболевания, а также влияния препарата Габриглобин на продукцию ключевых цитокинов ИКК у больных ХАК.
В исследование вошел 51 пациент ХАК (в возрасте 47+11 лет), из них 24 пациента получали лечение препаратом Габриглобин. Контрольную группу составили 30 здоровых лиц, сопоставимых по возрасту. У всех пациентов были исследованы следующие иммунологические показатели: уровень антител к нативной ДНК, концентрация иммуноглобулинов (Ig) A, M, G, общего Ig E, уровень циркулирующих иммунных комплексов, субпопуляций лимфоцитов CD4+, CD8+. Уровень цитокинов ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-17, ИЛ-18, IFN-у определяли в сыворотке крови и супернатанте спонтанной и стимулированной продукции ИКК методом ИФА. Для оценки влияния препарата Габриглобин на продукцию цитокинов ИКК у больных ХАК применялся метод ех vivo с диагностически значимыми концентрациями данного препарата, которые подбирались на здоровых донорах по методике Исаченко Е. Г. (2006).
В ходе проведенного исследования было установлено, что у больных ХАК наблюдались достоверные изменения следующих иммунологических показателей: повышение уровня антител к нативной ДНК, Ig G, общего Ig E, CD4+ популяции Т-лимфоцитов и снижение уровня CD8+ Т-лимфоцитов. Также наблюдалась повышенная спонтанная и ФГА-индуцированная продукция ИКК ИЛ-17 и IFN-y, что согласуется с данными о способности IFN-y и ИЛ-17 запускать аутоиммунный процесс. Однако после лечения препаратом Габриглобин достоверно снизились только показатели IFN-y и ИЛ-17, что объясняется способностью препарата Габриглобин к выведению аутоантител при ХАК. Оценка влияния препарата Габриглобин методом ex vivo на выработку ИКК цитокинов ИЛ-10, ИЛ-17, ИЛ-18, IFN-y показала достоверно значимое повышение уровня ИЛ-17 в группе больных ХАК и его снижение после проведения лечения данным препаратом. Таким образом, полученные результаты дают основание утверждать, что аутоиммунный механизм является ведущим в патогенезе ХАК.
Врожденный и приобретенный иммунитет у женщин с гестационным диабетом и их новорожденных детей
Бахметьев Б. А., Варушкина О. В., Гончарова Т. Г., Смолина Л. А., Старкова Е. А.
Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН, Пермь, Россия
По разным данным 10 процентов беременных женщин в мире страдают гестационным диабетом (ГД), который опасен как для беременных, так и для их новорожденных детей. Цель работы - изучение параметров врожденного и приобретенного иммунитета у женщин с ГД и их новорожденных детей. Объектом исследования является периферическая венозная кровь матерей с перед (при поступлении) и после родов (3-4 день после родов), молозиво (3-4 день после родов) и пуповинная кровь новорожденных. Обследовано
7 пар мама-новороженный с диагнозом ГД, 7 пар условно здоровых рожениц, подвергнутых кесареву сечению и 10 пар, в которых ребенок родился естественным путем. Были проанализированы следующие параметры: лейкоцитарный состав (световая микроскопия); содержание в крови и молозиве различных субпопуляций лимфоцитов (проточная цитометрия); фагоцитарная активность нейтрофилов и моноцитов (проточная цитометрия); спонтанная и зимозан-индуцированная люминол-зависимая хемилюменисценция (ЛЗХЛ); концентрация гормонов (инсулин, лептин, инсулинподобный фактор роста-1, соматотропный гормон, кортизол, эстрадиол, прогестерон, тестостерон, дегидроэпиандестерон), иммуноглобулинов и цитокинов (11.-10, 11.-8, ^-а, ^-у, 11.-17, 11.-18, ТЖ-а, 11.-4, 11.-10, ТСР01, ТСРр2, С-СБР и СМ-СБР); спонтанная и митоген-индуцированная продукция цитокинов в культуре лейкоцитов. Исследование проведено при финансовой поддержке РФФИ (грант № 11-04-96055-р_урал_а) и благотворительного фонда «Нева». Установлено, что, по сравнению с мамами, родившими естественным путем или подвергнутым кесареву сечению, при диабете в венозной крови рожениц снижено число нейтрофилов. Данное снижение затрагивало только сегментоядерные формы. Одновременно изменялась и функциональная активность клеток врожденного иммунитета. Как в спонтанном, так и зимозан-индуцированном варианте реакции ЛЗХЛ, лейкоциты женщин с ГД демонстрировали более слабую активность, чем клетки рожениц контрольных групп. Фенотипический состав лимфоцитов крови при диабете также существенно отличался от контрольных значений. Снижалось относительное число CD19+- и CD4+-клеток и росла численность CD8+-клеток, что сопровождалось двукратным уменьшением CD4/CD8. Впервые установлено, что изменение численности этих клеток при ГД ассоциировано с модификацией гормонального и цитокинового статуса. Так, обнаружены значимые корреляции между уровнем инсулина в крови и числом CD19+ (г = 0,93), абсолютным числом CD8+ (г = 0,89), фагоцитарной активностью нейтрофилов (г =-0,79) и моноцитов (г = -0,78) и временем развития максимального уровня спонтанной ЛЗХЛ (г = -0,77). В молозиве женщин с диабетом выявлено увеличение относительного числа CD3+Y6TCR+ и снижение числа регуляторных Т-клеток ^4^25+Р0ХР3+). В пуповинной крови новорожденных при ГД были выявлены изменения аналогичные
материнским, но менее выраженные. Наряду со снижением численности нейтрофилов и функциональной активности клеток в ЛЗХЛ, концентрация лимфоцитов у новорожденных при ГД увеличивалась. Существенных различий по фенотипическому составу лимфоцитов при сравнении с пуповинной кровью новорожденных от условно здоровых матерей не зафиксировано. Однако при гестационном диабете в пуповинной крови новорожденных не удалось обнаружить субпопуляцию NKT-клеток. Таким образом, учитывая возможность переноса функционально активных клеток матери новорожденному результаты исследований изменений в иммунной системе матери, новорожденного и грудного молока при ГД свидетельствуют о потенциальной опасности развития у вскармливаемого грудью новорожденного не только метаболических, но и аутоиммунных расстройств.
Прогностическая значимость определения экспрессии CD14+CD16+ у новорожденных с респираторными нарушениями
Дударева М.В.
Научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии, Ростов-на-Дону, Россия
Среди респираторных нарушений наиболее частой причиной перинатальной заболеваемости и смертности являются респираторный дистресс-синдром и мекониальная аспирация. При этом смертность в перинатальном периоде при этих состояниях составляет более 18 %, а важнейшим фактором, осложняющим их течение, является развитие бактериальной инфекции. Не вызывает сомнения ведущая роль иммунной системы в развитии, клиническом течении и исходах гнойно-воспалительных заболеваний у этих детей. В связи с этим, остается актуальным поиск объективных высокочувствительных и специфичных маркеров для ранней диагностики сепсиса у новорожденных. Целью настоящего исследования явилось изучение экспрессии CD14+CD16+ у новорожденных с респираторными нарушениями. Материалы и методы. Для решения поставленной задачи на базе реанимационного отделения было обследовано 225 новорожденных с респираторными нарушениями, группу сравнения составили 38 условно-здоровых новорожденных.
Исследования проводили на 3-х цветном проточном цитометре "Beckman Coulter" (США) с использованием реагентов фирмы "Beckman Coulter". Полученные нами данные свидетельствуют о том, что здоровые новорожденные имели значительно более низкий процент CD14+CD16+ моноцитов, чем у новорожденных с респираторными нарушениями (5,51±0,15 % против 9,72±0,52 %) (р<0,05).
Существенное увеличение экспрессии CD14+CD16+ моноцитов наблюдалось у новорожденных с респираторными нарушениями, осложненных сепсисом (22,25±3,57 %) (р<0,05). У этих детей отмечено достоверное снижение IL-1P и IL-4 при одновременном повышении плазменного уровня IL-6, IL-8. Благодаря ранней диагностике и своевременной модификации антибактериальной и интенсивной терапии лишь у 2 пациентов этой группы зарегистрирован летальный исход. При патологоанатомическом исследовании у всех погибших детей выявили признаки неонатального сепсиса. Найдено, что уровень ИЛ-1Р в крови у новорожденных, умерших с основным диагнозом "септическая инфекция'; в исходе заболевания резко снижался до минимальных цифр, граничащих с чувствительностью тест-системы. Было определено повышение экспрессии на моноцитах CD16+ рецепторов до 33,4±3,1 % (р<0,05). Таким образом, резкое снижение концентрации ИЛ-1 р и существенное повышение экспрессии на моноцитах CD16+ рецепторов в крови детей в критическом состоянии может расцениваться как неблагоприятный прогностический признак.
Очевидно, что мониторинговое определение относительного содержания CD16+ на моноцитах позволяет с высокой степенью вероятности диагностировать развитие неонатального сепсиса у новорожденных детей с респираторными нарушениями на доклинической стадии.
Полученные результаты позволяют оптимизировать интенсивную терапию в плане проведения обоснованной иммунокоррекции.
М
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.