=Объединенный иммунологический форум, Нижний Новгород 2013^^
ИММУНОТЕРАПИЯ И ИММУНОДИАГНОСТИКА
Флавоноиды подавляют пролиферацию лимфоцитов в реакции контактной чувствительности
Албегова Д.З.1, Павлова С.И.2,3, Кягова А.А.1,Логинова О.В.1, Дмитриева Н.Б.12, Дибирова ПОЛ2, Козлов И.Г.1,2 ' ГБОУ ВПО Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н. И. Пирогова Минздрава России,2 ФГУ ФНКЦ Детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Д. Рогачева, Москва; 3 ФГБОУ ВПО Чувашский государственный университет им. И. Н. Ульянова, Чебоксары, Россия
Реакция контактной чувствительности мышей (КЧ) к 2,4-динитрофторбензолу (ДНФБ) является классической моделью T-клеточного иммунного ответа in vivo. Флавоноиды - это соединения растительного происхождения полифенольной структуры. В основе их химической структуры лежит система из конденсированных бензольного и гетероциклического колец с боковым фенильным заместителем (фенилбензопироны). Результаты многочисленных исследований демонстрируют, что эти вещества обладают широким диапазоном активностей, проявляя противовоспалительные, иммунотропные, антиканцерогенные и другие эффекты. Изучение механизмов действия флавоноидов на молекулярном уровне показывает, что некоторые их классы (изофлавоны, халконы) способны эффективно ингибировать фосфорилирование, а как следствие и активацию, ключевых молекул сигнальных путей в животных клетках. Раннее в нашей лаборатории получены данные о том, что ДНФБ-специфичные лимфоциты находятся на пике своей пролиферативной активности через 96 часов после сенсибилизации. Таким образом, оптимальным временем для оценки их пролиферативной активности является интервал 24-96 часов с момента сенсибилизации. Целью данной работы стало изучение влияния соединения флавоноида на клеточность и пролифера-тивный ответ в реакции контактной чувствительности к ДНФБ у мышей. Мышей линии CBA сенсибилизировали накожно 0,3 % ДНФБ в ацетоне. Часть мышей служила контролем, а другим вводили исследуемый агент внутривенно в дозе 10 мг/кг. Через 24-96 часов после сенсибилизации выделяли паховые лимфоузлы, подсчитывали абсолютное количество клеток. Дополнительно оценивали пролиферацию лимфоцитов in vitro в3Н-тимидиновом тесте, при внесении соединения флавоноида в концентрации 20 мкг/мл. Радиоактивную метку вносили за 16-24 часа до сбора клеток, после чего оценивали включе-ние3Н-тимидина в ДНК. На всех сроках наблюдения было выявлено снижение клеточности и пролиферативной активности лимфоцитов. Таким образом, введение препарата флавоноида угнетает пролиферацию лимфоцитов регионарных лимфоузлов у ДНФБ-сенсибилизированных мышей и может быть эффективным средством для лечения контактного дерматита.
Возможность использования хитозана для транспорта микробиологических РНК
Аликин Ю. С., Алексеева М. В., Масычева В. И. Институт медицинской биотехнологии ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор», Бердск Новосибирской обл., Россия
Исследованиями последних десятилетий в области биологически активных веществ (БАВ) выявлена чрезвычайно важная роль рибонуклеиновых кислот
в регуляции резистентности организма животных, повышения неспецифической устойчивости его к неблагоприятным воздействиям внешней среды, коррекции иммунодефицитных состояний. Препараты на основе рибонуклеиновых кислот микробиологического происхождения способны выступать в роли противовирусных средств, стимуляторов неспецифической резистентности, развития и гемопоэза, иммуномодуляторов, иммуноадъювантов, антимутагенов и эффективных радиопротекторов. Важную роль в направленности действия препаратов на основе РНК играет структура этих соединений: двуспиральные РНК (дсРНК) обладают выраженными интерферониндуци-рующими и противовирусными свойствами, в то время как однонитевым РНК (онРНК) присущи свойства иммуномодуляторов, адъювантов, стимуляторов неспецифической резистентности, роста и т. д. С целью повышения эффективности таких средств проводится поиск молекул, которые могли бы выступать в качестве транспортных средств. Одним из возможных кандидатов для этого может быть использован - хитозан, деацетилированный природный полисахарид хитин из панциря краба. К достоинству этого средства относится многообразные виды биологических эффектов. В последние годы активно исследуются вопросы использования хитозана в качестве транспортного средства, в том числе для ДНК. Представлялось целесообразным провести оценку возможности образования комплексных препаратов на основе высоко- и низкомолекулярного хитозана и РНК киллерных дрожжей. В эксперименте использовали: субстанцию противовирусного препарата Ридостин, содержащую дсРНК и онРНК, и образцы растворимого хитозана с молекулярной массой 39 и и 350 кДа производства ЗАО «Биопрогресс». Оценку связывания РНК и образцов хитозана проводили методом электрофореза в 0,8 % агарозе. Как показали результаты электрофоретического анализа, наблюдаются различия в связывании субстанции Ридостина с низкомолекулярным (НМХ, 39 кДа) и высокомолекулярным (ВМХ, 350 кДа) хитозаном. Образцы препарата, содержащие субстанцию Ридостина и НМХ в соотношениях 1:35; 1:70,8; 1:106,2; 1:136 (соответственно) оставались в карманах геля, что, по-видимому, может свидетельствовать об образовании комплексов. В противоположность этому, подобной картины не наблюдалось при электрофорезе образцов на основе ВМХ и субстанции ридостина в тех же весовых соотношениях. Представленные результаты нуждаются в дальнейших исследованиях. Вместе с тем, проведенное исследование позволяет предположить, что в качестве транспортных средств для РНК с целью повышения их эффективности и устойчивости при создании лекарственных средств более пригодным является низкомолекулярный хитозан.
Иммунологическая безопасность биологических генно-инженерных препаратов
Алпатова Н. А., Солдатов А. А., Авдеева Ж. И., Медуницын Н. В., Бондарев В. П., Миронов А. Н., Меркулов В. А.
«Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздрава России, Москва, Россия
Проблемы безопасности лекарственных средств, содержащих активное вещество белковой природы, связаны с высоким потенциалом развития
иммуногенных и иммунотоксичных осложнений. Биологические лекарственные средства, получаемые с применением генно-инженерной технологии, в том числе на основе использования рекомбинантной ДНК можно разделить на 3 группы. Первая группа представлена оригинальными биопрепаратами, оценка качества, безопасности и эффективности которых проводится в полном объёме. Вторая группа биопрепаратов получила название "biosimilars" (биоподобные, биоаналогичные), которые "имеют высокое сходство по показателям качества, безопасности и эффективности с оригинальным препаратом, а незначительные различия не имеют клинической значимости". Нормативные требования для регистрации "biosimilars" препаратов основаны на демонстрации сходства с оригинальным препаратом сравнения. Доказательство сходства биоподобного и оригинального препаратов по показателям качества позволяет на доклиническом и клиническом этапах проведение сравнительных исследований по укороченной схеме. Общие принципы демонстрации сходства биоподобных ("biosimilars") препаратов были разработаны в ЕМА стран ЕС и одобрены ВОЗ. В дополнении к ним в ЕМА разработаны требования для проведения доклинических и клинических исследований 9 групп биопрепаратов. К настоящему моменту ЕМА провело лицензирование 14 препаратов, содержащих рекомбинантные соматотропин, филграстим и эпоэтин, из них 12 используются в клинической практике. Применение в течение 7 лет указанных препаратов показало, что разработанные ЕМА принципы для регистрации позволяют гарантировать безопасность и эффективность применения биопрепаратов данной группы. Особую озабоченность в плане иммунологической безопасности, а также эффективности применения представляет третья группа биопрепаратов, которая получила название "non-innovator" ("не оригинальные") препараты. Некоторые страны (Китай, Индия и др.) разрабатывают биопрепараты ("copy", "биодженерики"), которые, по мнению производителей, должны обладать сходством с оригинальными препаратами. При этом требования для оценки качества и безопасности препаратов "non-innovator" приближены к нормативным требованиям, разработанным для "дженериков", и законодательство данных стран позволяет проведение исследований по укороченной схеме и не предусматривает проведение обязательных сравнительных исследований между "non-innovator" и оригинальным препаратом. Однако биопрепараты по молекулярной массе, многомерной структуре белковой молекулы и сложности биотехнологического процесса получения значительно отличаются от препаратов, полученных в результате химического синтеза. Поэтому использование нормативных требований регистрации препаратов "non-innovator" не может гарантировать безопасность и эффективность их применения в клинической практике.
Проявление иммуногенности препаратов моноклональных антител при их клиническом использовании
Алпатова Н. А., Авдеева Ж. И., Солдатов А. А., Медуницын Н. В., Бондарев В. П., Миронов А. Н., Меркулов В. А.
Научный центр экспертизы средств медицинского применения Минздрава России, Москва, Россия
Препараты моноклональных антител (МкАТ) успешно применяются для лечения онкологических, аутоиммунных и других заболеваний. Одной из существенных проблем является проявление их нежелательной иммуногенности, что может быть причиной развития побочных эффектов и снижения клинической эффективности. На частоту и выраженность иммунного ответа на МкАТ влияют факторы, которые связаны с самим препаратом (структура МкАТ, в частности, изменение профиля гликозилирования), присутствием примесей (связанные с процессом производства), особенностями заболевания и состоянием пациента. Использование генно-инженерных технологий, позволило получить препараты МкАТ, имеющие минимальное присутствие аминокислотных последовательностей мышиного происхождения (гуманизированные) или характеризующиеся их полным отсутствием
(рекомбинантные). Данные препараты проявляют менее выраженную антигенную активность, однако только результаты клиническ
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.