РОССИЙСКИЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 2015, том 9(18), № 1, с. 125-129
КРАТКОЕ СООБЩЕНИЕ
КЛИНИЧЕСКАЯ И МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ГЕРПЕС-ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ У ОБЛУЧЕННЫХ КОНТИНГЕНТОВ
© 2015 г. Г.Х. Викудов1'34, И.В. Орадовская2
ФГБУ "ФНИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи" МЗ России, г. Москва, Россия;
2ФГБУГНЦИнститут иммунологии ФМБА России, г. Москва, Россия;
39 ЛДЦ Министерства обороны России, г. Москва; Россия;
4НИЦпо профилактике и лечению вирусных инфекций, г. Москва, Россия
Поступила: 12.10.2014. Принята: 15.01.2015
Клиническое и иммуноэпидемиологическое исследование было проведено среди облученных и не облученных групп (п = 7111). Частота простого герпеса среди обследованных гетерогенных групп составила: 43,37% среди ликвидаторов, 32,61% среди подразделений особого риска, 19,70% среди персонала предприятий АЭС, 31,12% среди общей популяции населения, 23,81% среди переселенцев с загрязненных радионуклидами территорий. Наибольшая частота герпес-вирусных инфекций была выявлена среди ликвидаторов, которые участвовали в аварийно-спасательных работах в 1986 году, в 3-й зоне радиационной опасности, подвергавшиеся воздействию внешних доз у-облучения в диапазоне > 0 — <5 и >15 — 20 бэр и в настоящее время проживают в мегаполисе. Персистирующая БВУ-инфекция с большей частотой была выявлена среди ликвидаторов и подразделений особого риска, что в последующем может быть ассоциировано с развитием злокачественных новообразований чаще, чем среди необлученного населения и популяции в целом. Результаты определения чувствительности лейкоцитов к иммуномодуляторам, ин-терферонам и индукторам интерферонов наряду с иммунным статусом и ШЫ-статусом являются ориентирами для выбора дальнейшей персонифицированной терапии пациентов с герпес-вирусными инфекциями. Наиболее удачное сочетание влияния на систему интерферонов получено при назначении ацикловира в сочетании с циклофероном и полиоксидонием.
Ключевые слова: герпес-вирусные инфекции (ГВИ), ПЦР-диагностика, облучение, иммунный статус
ВВЕДЕНИЕ
С одной стороны, в структуре всех инфекционных заболеваний распространенные ГВИ человека по частоте и причинам смертности занимают второе место после гриппа, ОРВИ и их осложнений [1, 2]. С другой стороны, контроль за поступлением радиоактивных веществ в организм человека и их содержанием, контакт с ионизирующим облучением по медицинским показаниям, при профессиональной деятельности и при аварийно-
Адрес: 123098, Москва, ул. Гамалеи, д. 16, ФГБУ "ФНИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи" МЗ России, Викулову Георгию Христовичу. E-mail: gchvstar@gmail.com
спасательных работах, особенно в диапазоне «малых доз» техногенного происхождения, были и остаются наиболее значимыми в проблеме радиационной защиты как персонала атомных производств, военнослужащих, так и гражданского населения [3], не менее 8% населения развитых стран постоянно подвергается облучению в процессе профессиональной деятельности [4]. Сочетанное воздействие на организм человека ГВИ и радиационного фактора обуславливают комплекс повреждающих эффектов, в том числе с развитием иммунной дисфункции, преждевременного старения и более частых злокачественных заболеваний среди облученных контингентов, что предопределило значимость многолетних исследований, разработку иммунологическо-
го мониторинга, скрининга и углубленного обследования групп риска [3, 5, 6, 7].
Цель исследования — молекулярно-био-логическая диагностика герпес-вирусных инфекций, частоты клинических проявлений дисфункции иммунной системы, иммуноопо-средованных и хронических соматических заболеваний и изменений в ИС в зависимости от наличия ГВИ и последующее эффективное этиотропное и патогенетическое лечение, а также профилактика ГВИ и повышение качества жизни часто болеющих пациентов в отдаленном после облучения периоде.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
1) проспективный скрининг и иммуноэпи-демиологический мониторинг, сплошной безотборочный метод формирования выборок по унифицированной методике, утвержденной Проблемной комиссией по эпидемиологии иммунодефицитов (ИДС) и оценке ИС, разработанный ранее [5], и адаптированный для настоящего исследования [7], 2) метод случайной рандомизации и формирования групп риска по иммунной дисфункции, на основании специально разработанной диагностической карты с учетом МКБ-10, 3) кли-нико-иммунологический метод, c оценкой и интерпретацией показателей иммунного и интерферонового статуса, 4) молекулярно-биологический метод обнаружения ДНК вирусов — ПЦР соскобов и мазков с элементов вирусной сыпи, детекция в крови, слюне и мазков с миндалин, 5) оценка чувствительности клеток к праймируюшему действию на систему IFN противовирусных и иммуномо-дулирующих препаратов.
РЕЗУЛЬТАТЫ
В данной статье представлен фрагмент большой многолетней оригинальной работы за период с 2004 по 2014 гг. Иммуноэпидемио-логический скрининг, формирование групп риска по иммунной дисфункции проведен у 7111 человек в наблюдаемых нами группах лиц. Анализ частоты хронической рецидивирующей инфекции Herpes simplex (ХРГВИ) среди участников ликвидации последствий аварии на ЧАЭС (ликвидаторы, УЛПА) проведен в трех основных регионах наблюдения: в Москве и МО (n = 611), Северо-западном регионе ЛО (n = 211), Красноярском крае
(n = 277). Персонал предприятий атомно-энергетического комплекса (ПАЭК) составили лица, работающие на ГХК, расположенного на территории Красноярского края (n = 1515), предприятий, расположенных на Среднем Урале (n = 2731) и в Томской области (n = 266). Также обследованы группы лиц, переселенных с территорий, зараженных радионуклидами (переселенцы, n = 21), военнослужащие из числа подразделений особого риска («ПОР») (n = 230). Необлученное население (n = 1249, включая 70 человек из Москвы и МО) в качестве группы сравнения обследовано в тех же регионах, где облученные контингенты. Общее число обследованных лиц, имевших контакт с ионизирующим излучением (ИИ), составило 5862 человека.
Частота Herpes simplex среди обследованных гетерогенных групп составила (в первое пятилетие с 2004 по 2009 гг.): у ликвидаторов в Московском регионе — 71,90%, в среднем по регионам — 43,37%, из подразделений особого риска — 32,61%, персонала предприятий АЭК — 19,7%, населения — 31,12%, переселенцев — 23,81%. Определение распространенности герпесвирусных инфекций во втором пятилетии продолжается по настоящее время и проведено у 73 УЛПА и ПОР (7 женщин и 66 мужчин, средний возраст 65 лет). Средняя доза полученного внешнего у-облучения при аварийно-спасательных работах — 20,82 Бэр или 208,2 мЗв, что в несколько раз превышает годовые предельно допустимые дозы облучения при профессиональной деятельности. Среди 70 человек необлученного населения в Московском регионе — 32 женщины и 38 мужчин, средний возраст 46 лет. По данным ПЦР в ремиссию Herpes simplex выявлена высокая частота виремии герпесвирусов в 25,49% случаев среди ликвидаторов (13 : 51), при этом вирус Эпштейна-Барр обнаружен в 17,65% случаев (табл. 1) и в 20,00% случаев виремия выявлена среди населения (2 : 10). В связи с частыми простудными заболеваниями у облученных контингентов для описания структуры ОРВИ проведено исследование слюны и мазков с миндалин с анализом «респираторного вирусного комплекса», включая герпесвирусы в стадии ремиссии Herpes simplex, составляющие вместе с гриппом и исследованными патогенами в структуре ОРВИ >96% всех причин простудных заболеваний. Структура исследуемых вирусных патогенов: вирус гриппа типа А, вирус гриппа типа В, вирус гриппа свиной, метапневмовирус, респи-
Таблица 1. Частота обнаружения репликации вирусов в цельной крови (виремии) по данным ПЦР-диагностики с использованием двух видов праймеров у ликвидаторов и необлученного
населения (Москва, 2013 г.)
Праймеры Категория HSV2 CMV HSV1 EBV VZV P B19 HHV6 HHV8
Венозная кровь
ДНК Технология УЛПА, n = 41 0 0 0 3 : 41 7,31% 0 0 1 : 41 2,43% 1 : 41 2,43%
Население, n = 10 0 0 0 1 : 10 10,0% _* _ * 0 0
Всего 4 : 51 7,84%
Интерлабсервис УЛПА, n = 41 0 0 1 : 41 2,43% 5 : 41 12,19% _* _ * 0 _ *
Население, n = 10 0 0 0 1 : 10 10,0% _* _ * 1 10,0% _ *
Всего 0 0 1 : 51 1,96% 6 : 51 11,76% _* _ * 1 : 51 1,96% _ *
ИТОГО 0 0 1 : 51 1,96% 9 : 51 17,65% 0 0 2 : 51 3,84% 1 : 51 1,96%
Слюна, мазки с миндалин, небных дужек
ДНК Технология УЛПА, n = 12 0 0 1 f 12 8 f 12 0 0 0 0
Население, n = 3 0 0 0 1 f 3 0 0 3 f 3 0
Примечание: Исследование не проводилось.
раторно-синцитиальный вирус, риновирус, аденовирус, бокавирус, вирусы парагриппа 1,2,3,4 типов, коронавирусы CV OC43, CV 229 E, CV HKU1, CV NL63, семейство герпесвиру-сов человека - HSV1, HSV2, VZV, CMV, EBV, HHV-6, HHV-8. В настоящее время исследование продолжается, и на небольшой выборке пациентов показано обнаружение вирусов гриппа типа В среди 12 человек ликвидаторов в 2 случаях и среди 3 человек населения — гриппа А в 2 случаях, свиного гриппа и обнаружение коронавируса (CV NL63) по одному случаю. При анализе слюны и мазков с миндалин в структуре герпес-вирусов выявлено среди 12 человек ликвидаторов в 8 случаях EBV, по одному случаю HSV1, HHV-8, среди 3 человек населения — в 3 случаях HHV-6, один случай HHV-8. Для ПЦР-диагностики в крови использованы праймеры производства ДНК-Технология и Интерлабсервис.
Оценка иммунного статуса включала определение иммунного фенотипа с помощью моноклональных антител методом проточной лазерной цитофлюориметрии с многоцветным анализом, определение вирус-специфичных противогерпетических антител, интер-феронового статуса, чему будут посвящены
отдельные публикации. Мы сосредоточили внимание в данной статье на результатах определения чувствительности к препаратам IFN и его индукторам, что является одним из основных критериев эффективности иммунотерапии ХРГВИ. При изучении IFN-статуса проводилась оценка степени чувствительности лейкоцитов цельной периферической крови пациентов с ХРГВИ in vitro (табл. 2)
Показатели IFN-a и IFN-y у ликвидаторов и населения при ХРГВИ оценивали до- и через 3 мес после назначений ацикловира препаратам: реаферон, ацикловир, циклоферон, ликопид, полиоксидоний; к
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.