точных факторов врожденного и адаптивного иммунитета. Эти данные позволяют предположить возможность применения дополнительных средств иммунокоррекции у пациентов с первичной агаммаглобулинемией.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Rezaei N., Aghamohammadi A., Notarangelo L. D. Primary immunodeficiency diseases: Definition, Diagnosis, and Management. London, Springer, 2008, 358 p.
2. Modell V., Gee B., Lewis D. B., Orange J. S., Rolf-man C. M., et al. Immunol Res. 2011, 51, 61-70.
3. Кондратенко, И. В. Первичные иммунодефици-ты. М.: Изд-во Медпрактика-М, 2005, 232 с.
4. Gardulf A., Borte M., Ochs H. D., Nicolay U. Clin Immunol. 2008, 1, 81-8.
5. Chapel H., Cunningham-Rundles C. Br J Haematol. 2009, 6, 709-27.
6. Сизякина Л. П., Андреева И. И. Цитокины и воспаление 2013, 12, 4, 76-80.
7. Сизякина Л. П., Андреева И. И. Иммунология 2014, 35, 2, 89-91.
EFFECTOR FUNCTIONS OF THE CELLULAR COMPONENT OF THE IMMUNE SYSTEM IN DIFFERENT TYPES OF PRIMARY AGAMMAGLOBULINEMIA
Sizyakina L., Andreeva I.
Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Lane Nakhichevan, 29
The article presents the results of quantitative and functional parameters of the cells of the adaptive and innate immune response of patients with XLA and CVID in the dynamics of replacement therapy. Revealed that regular IVIG does not change direction of differentiation and functional hyperactivation of T cells, as well as reduced indicators of NK. These data can be the basis for inclusion of additional funds in the immune complex therapeutic interventions patients with different types of primary agammaglobulinemia.
Key words: agammaglobulinemia, substitution, T lymphocytes, NK
ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ МИЛИАЦИНА НА РАЗВИТИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ САЛЬМОНЕЛЛЕЗНОЙ
ИНФЕКЦИИ
Смолягин А. И.1, Фролов Б. А.1, Чайникова И.Н.2, Панфилова Т. В.1, Филиппова Ю.В.1, Железнова А. Д.1
'ГБОУ ВПО «<Оренбургская государственная медицинская академия» Минздрава РФ;
2Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН,
Оренбург, Россия
В работе установлена способность милиацина снижать летальность, ограничивать эндотоксинемию при экспериментальной сальмонеллезной инфекции у мышей (СВАхС57В1б) F1. Результаты показали, что в основе защитного действия милиацина лежит: снижение выраженности эндотоксинемии, активация ^-1-зависимого иммунного ответа, стимуляция продукции ГЬ-10, ограничение синтеза !И7 и его мембранопротекторная активность.
Ключевые слова: милиацин, экспериментальная сальмонеллезная инфекция, цитокины, эндотоксинемия
В последние годы к числу иммунокорректо- обладающие широким спектром биологиче-ров были отнесены тритерпеноиды - вещества, ского действия. Продемонстрированная в ряде
работ способность тритерпеноидов к стимуляции гуморального и клеточного иммунного ответа [1, 2, 3] характеризует их как перспективные средства иммунотерапии. Вместе с тем эти исследования практически не коснулись оценки эффективности тритерпеноидов при их использовании для профилактики дисфункций иммунной системы при различных вариантах инфекции. В этой связи представляет интерес изучение применения милиацина на одной из широко распространенных моделей инфекционного процесса - экспериментальной саль-монеллезной инфекции.
Целью работы являлось определение влияния милиацина на развитие экспериментальной сальмонеллезной инфекции и выяснение некоторых механизмов данного воздействия.
Исследования выполнены на 640 мышах-самцах (СВАхС57В1б^ массой 22-25 г, поставленных из питомника «Столбовая» РАМН. Заражение животных выполняли внутрибрю-шинным введением штамма Salmonella ente-ritidis госпитального происхождения в дозе 2х106 бактерий на мышь. Пентациклический тритерпеноид милиацин: 3-Р-метокси-А18-олеанен вводили трехкратно внутрибрюшин-но с интервалами в 3 дня между введениями в разовой дозе 2 мг/кг. Заражение животных проводили через 24 часа после последнего введения тритерпеноида. Всего использовано 4 группы животных: I - интактные; II - зараженные; III - зараженные после предварительного трехкратного введения растворителя для милиацина: твин 21 в конечной концентрации 1,6х10-7 моль/кг; IV - зараженные после предварительного введения милиацина. Оценку влияния милиацина осуществляли по летальности животных, микробной обсемененности органов, массе и количеству кариоцитов в тимусе и селезенке, содержанию миелокариоцитов в бедренной кости, титру антител в реакции непрямой гемагглютинации [4]. У мышей также проводилась оценка способности спленоцитов к митогениндуцированной (КонА, 5мкг/мл) продукции цитокинов (IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IL-17, IL-18, y-IFN) с определением их содержания в супернатантах двухсуточных культур клеток методом ИФА («Bender MedSystems»). Эндотоксин в плазме крови мышей определяли хромогенным LAL-тестом с использованием наборов Hbt LAL («Hycult biotech»). Маркером окислительного стресса служили продукты окисления, реагирующие с тиобарбитуровой
кислотой: ТБК-реагирующие продукты (ТБК-АГАТ «Агат-Мед»). Статистическую обработку полученных данных проводили методами вариационной статистики из пакета прикладных программ Microsoft Excel и Statistica 10. Различия считались статистически достоверными при р<0,05.
Заражение животных вызывало развитие инфекции, сопровождающейся гибелью 37,5% мышей (группа II), предварительное введение растворителя (группа III) не оказало существенного влияния на летальность, а введение милиацина (группа IV) снижало гибель мышей до 25,0%. На всех сроках после заражения показатель микробной обсемененно-сти (КОЕ/г) для селезенки у мышей опытной группы (IV) был достоверно ниже по сравнению с таковым, у только зараженных животных (группа II). Инфекция (группа II) приводит к существенному падению (на 73,4±2,3% по отношению к интактным мышам - группа I) содержания миелокариоцитов в костном мозге уже на 5 сутки после заражения. Аналогичная направленность изменений отмечена также у животных III и IV групп. Однако если у мышей III группы интенсивность этого падения (на 68,1±3,3%) соответствовала II группе, то у мышей IV группы она была значительно менее выражена (на 47,5±5,1%). Наряду с опустошением красного костного мозга сальмонеллезная инфекция приводила к гипоплазии тимуса во всех исследуемых группах мышей. Выраженность этой гипоплазии, оцениваемой по массе органа, среди животных различных групп существенно не отличалась, хотя в IV группе на всех сроках инфекции она была несколько менее выражена. Аналогичная зависимость отмечалась и при определении содержания тимоцитов. У зараженных мышей II и III групп отмечался прирост массы селезенки, который на 5 и 10 сутки после заражения составлял соответственно 151,0±25,8%, 249,5±28,0% и 127,5±41,3%, 252,7±49,0%, тогда как у животных IV группы прирост массы органа в указанные сроки был менее выражен, составляя 71,4±10,2% и 176,1±12,1%. Сходная динамика обнаруживалась и для показателя содержания спленоцитов. Определение титров антител показало, что применение милиацина не только не способствовало увеличению их содержания в сыворотке крови зараженных животных, но сопровождалось даже их некоторым снижением.
У мышей II группы по сравнению с I группой выявлено значительное увеличение спонтанной продукции IL-6, y-IFN, IL-12 и IL-18. Предварительное введение растворителя перед заражением (III группа) значимо не отражалось на спонтанной продукции указанных ци-токинов. Введение милиацина (группа IV) увеличивало нестимулированную секрецию IL-12 и y-IFN по сравнению с аналогичными показателями у зараженных мышей. Вместе с тем ми-лиацин оказывал стимулирующее воздействие на спонтанную продукцию и противовоспалительного цитокина - IL-10 по отношению к зараженным животным. Исследование стимулированной продукции цитокинов выявило многократное повышение уровня y-IFN, IL-17, IL-12, IL-10 у мышей II и III групп относительно тех же показателей у интактных животных.
Милиацин оказывал дифференцированное влияние на индуцированную продукцию цито-кинов: стимулирующий эффект для IL-10, IL-12 и супрессирующий - в отношении IL-4, IL-6, IL-17 у мышей IV группы по сравнению с зараженными животными.
Установлено, что сальмонеллезная инфекция обусловливает значимое возрастание содержания эндотоксина в плазме крови зараженных мышей. Использование растворителя, предшествовавшее заражению, не оказало влияния на выраженность эндотоксинемии. Предварительное введение милиацина, напротив, обеспечивало существенное снижение эндотоксинемии по отношению к другим группам зараженных животных. Исследование перекисного окисления липидов выявило увеличение содержания ТБК-реагирующих продуктов у мышей всех трех опытных групп на 5-е сутки. При этом в эти сроки максимальное увеличение отмечалось у мышей II и III групп. На 10-е сутки содержание ТБК-реагирующих продуктов было также достоверно увеличено у зараженных мышей и снижено в группе с милиацином по сравнению с контролем. К 21-м суткам милиацин снижал содержание ТБК-реагирующих продуктов более выражено, чем у мышей II и III групп.
Таким образом, милиацин ослабляет тяжесть течения сальмонеллезной инфекции, что подтверждается снижением гибели животных, уменьшением микробной обсеменен-ности их внутренних органов, ограничением гипоплазии костного мозга и тимуса, а также реакции селезенки на инфекционный про-
цесс в виде увеличения ее массы и количества спленоцитов. Защитное действие милиацина не связано с гуморальным иммунным ответом. В связи с этим можно полагать, что эффекты тритерпеноида опосредуются стимуляцией им механизмов клеточного иммунитета, антиоксидантной и мембранопротекторной активностью [5, 6]. Снижение выраженности эндотоксинемии у инфицированных животных под влиянием милиацина может отражать один из значимых механизмов его защитного действия. Наиболее очевидным объяснением такого эффекта тритерпеноида является снижение бактериальной нагрузки в виде уменьшения микробной обсеменен-ности внутренних органов у животных IV группы по отношению к животным III и II групп сравнения. Вместе с тем очевидно, что выраженность эндотоксинемии обусловлена не только поступлением эндотоксина в системную циркуляцию, н
Для дальнейшего прочтения статьи необходимо приобрести полный текст. Статьи высылаются в формате PDF на указанную при оплате почту. Время доставки составляет менее 10 минут. Стоимость одной статьи — 150 рублей.