научный журнал по химии Биохимия ISSN: 0320-9725

БОЗИЕВ Х.М., БРОВКО Ф.А., ЛАМАН А.Г., САВИНОВ Г.В., ШЕПЕЛЯКОВСКАЯ А.О. — 2014 г.

Описан метод поиска лигандов соединений, обладающих адъювантным эффектом. Данный метод включает в себя выделение полисом с использованием иммобилизованного пептида-миметика N -ацетилглюкоза-минил- N- ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглютамина (ГМДП) - RN-пептида. После проведения аффинной хроматографии и отмывки комплексы RN-пептида с целевыми последовательностями разрушались гуанидингидрохлоридом. Полученную мРНК использовали для синтеза кДНК и последующего клонирования в экспрессирующий вектор. Эффективность метода была доказана в ходе последующих исследований. С использованием биотинилированного RN-пептида были отобраны клоны, взаимодействующие с пептидом. Выяснилось, что все клоны кодируют последовательность, идентичную белку YB-1. Были получены рекомбинантные антитела к белку YB-1, отобранные из библиотеки scFv человека в формате фагового дисплея. С помощью данных антител была определена константа связывания RN-пептида с белком YB-1. Был проведен конкурентный анализ, который показал, что RN-пептид и ГМДП конкурируют за один и тот же участок белка YB-1.

КУЛАКОВСКАЯ Т.В., ТРИЛИСЕНКО Л.В. — 2014 г.

Показано, что клетки дрожжей S. cerevisiae со сниженным содержанием полифосфатов (полиР) характеризовались нарушением роста в среде с 0,5%-ной глюкозой. У родительского штамма с уровнем полиР, сниженным в результате фосфорного голодания, была увеличена длина лаг-фазы. У штаммов, характеризующихся генетически детерминированным низким содержанием полиР за счет увеличенного гидролиза этих полимеров (CRN/pMB1_PPN1 Sc - сверхпродуцент экзополифосфатазы PPN1) или за счет сниженного их синтеза (мутант BY4741 vma2A с нарушенной энергизацией вакуолярной мембраны), была уменьшена скорость роста в экспоненциальной фазе. Рост клеток с высоким содержанием полиР сопровождался их расходованием. В клетках штаммов со сниженным содержанием полиР, CRN/pMB1_PPN1 Sc и BY4741 vma2A, расходование полиР было незначительным. Полученные данные свидетельствуют в пользу использования полиР как дополнительного источника энергии для поддержания высокой скорости роста.

КИСЕЛЕВ Г.Г., МУРОНЕЦ В.И., СТРОЙЛОВА Ю.Ю., ШМАЛЬГАУЗЕН Е.В. — 2014 г.

Освещены современные представления об аномальном сворачивании прионного белка и роли шаперонов в этом процессе. Основное внимание уделено прионам млекопитающих. Особый способ агрегации этих прионов приводит к развитию амилоидных прионных заболеваний человека и животных. Несмотря на значительную популярность темы прионов у исследователей на протяжении нескольких последних десятилетий этиология, структура и функции нормального и аномального прионного белка до сих скрывают немало тайн. Большой интерес вызывают вопросы, связанные с взаимодействием прионных белков с системой шаперонов, которое направлено на облегчение и поддержание нативной структуры белков в клетке, а также на разрушение агрегатов. В случае прионов, в первую очередь, важно установить, способны ли шапероны оказывать влияние на разные этапы формирования патологических агрегатов прионов - от промежуточных олигомеров до зрелых амилоидных фибрилл, а также на трансформацию прионного белка в обогащенную P-структурами амилоидную форму. Противоречивость и неоднозначность накопленных по этой теме наблюдений обусловлена тем, что в ряде исследований не учитываются тип и функциональное состояние шаперонов. В обзоре подробно обсуждены работы авторов статьи, в которых были продемонстрированы принципиальные отличия в действии эукариотических и прокариотических шаперонов на амилоидную трансформацию прионного белка, а также зависимость обнаруженных эффектов от функционального состояния шаперонов.

ДХАНАНДЖАЯ Б.Л., СУДАРШАН С. — 2014 г.

Появление новых устойчивых к антибиотикам штаммов патогенных микроорганизмов представляет потенциальную угрозу для здоровья общества. Поскольку многие антибиотики оказывают побочное воздействие, то существует необходимость в поиске новых соединений с другими механизмами антибактериального действия, производимых различными видами организмов. В представленной работе мы оценили возможное противомикробное действие щелочного белка - VRV-PL-V (фосфолипаза А 2 фракции V из яда гадюки Рассела Daboia russellii pulchella). Было установлено, что VRV-PL-V оказывала бактерицидное действие на все исследованные нами линии патогенных для человека микроорганизмов. Наиболее эффективно она воздействовала на грамположительные бактерии, подобные Staphylococcus aureus и Bacillus subtilis, и в меньшей степени - на грамотрицательные: Escherichia coli, Vibrio cholerae, Klebsiella pneumoniae и Salmonella paratyphi. Минимальная ингибирующая концентрация (MIC) для VRV-PL-V составляла 13-24 мкг/мл. Мы сравнили антибактериальное действие VRV-PL-V с воздействием гентамицина, хлорамфеникола и стрептомицина. Была установлена строгая корреляция между фосфолипазной активностью и гемолитическим и антибактериальным действием VRV-PL-V. Обнаружено, что VRV-PL-V была способна оказывать заметное антибактериальное действие даже в присутствии p-бромфенацилбромида (p-БФБ), ингибитора активности фосфолипаз A 2. Это позволило предположить, что каталитический и бактерицидный домены фермента разделены или перекрываются лишь частично. Таким образом, полученные нами результаты свидетельствуют о том, что, несмотря на строгую корреляцию между каталитической и противомикробной активностью, VRV-PL-V способна воздействовать на микроорганизмы еще каким-то образом, например, имитируя действие бактерицидного белка BPI, повышающего проницаемость мембран.

ГАНЧАРОВА О.С., ГРИГОРЯН Э.Н., НОВИКОВА Ю.П., ФИЛИППОВ П.П., ЭЙХЛЕР О.В. — 2014 г.

Сетчатка глаза человека постоянно подвергается повреждению из-за воздействия света различной интенсивности, особенно при этом страдают ее фоторецепторные клетки и пигментный эпителий. Для индуцирования повреждения сетчатки под действием света традиционно применяют модель LIRD (light-induced retinal degeneration) на крысах-альбиносах, глаза которых освещают видимым светом высокой интенсивности. Эта модель позволяет изучать протекающие в сетчатке патологические процессы и проводить поиск ретинопротекторов, защищающих ее структуры от светоповреждения. Кроме того этиология и механизмы повреждения сетчатки в условиях модели LIRD имеют много общего с механизмами развития зависимых от возраста заболеваний сетчатки, в частности связанной со старением макулодистрофии сетчатки (age-related macular degeneration, AMD). На модели LIRD изучено профилактическое и лечебное действие глазных капель визомитин, содержащих митохондриально-адресованный антиоксидант SkQ1, на поврежденную ярким светом сетчатку крыс-альбиносов. В первой серии экспериментов крысы, получавшие визомитин в течение двух недель до облучения, демонстрировали значительно менее выраженные атрофические и дегенеративные изменения сетчатки, чем животные, получавшие такие же капли, но без SkQ1. Во второй серии экспериментов облученным крысам в течение двух недель закапывали визомитин или такие же капли, но без SkQ1. При этом оказалось, что поврежденная сетчатка под действием SkQ1 восстанавливается эффективнее, чем у контрольных животных. Сделан вывод, что SkQ1-содержащие капли визомитин оказывают как профилактическое, так и лечебное действие на сетчатку в условиях облучения ярким светом и могут быть рекомендованы как фотопротекторное средство и, вероятно, как средство, улучшающее состояние сетчатки при старческой макулодистрофии.

КЕЛЬ А.Е., МОШКОВСКИЙ С.А., НИКОЛАЕВ Е.Н., СЫЧЕВА А.М. — 2014 г.

На пространственное распределение молекул транскрипционного фактора, которые проникают в ядро эукариотической клетки, влияют два физических процесса: связывание с геномной ДНК и диффузия в ядерном объеме. Путем сравнения констант скорости связывания ДНК и белка и скорости диффузии белка можно определить, какой из указанных процессов является лимитирующим. Если процесс ограничивается диффузией, молекулы транскрипционного фактора захватываются ДНК до их распределения по объему ядра. В другом случае, когда лимитирующей является скорость реакции, эти молекулы располагаются по ядру равномерно и только затем найдут свои участки связывания. На примере хорошо изученного димерно-го фактора NF-kB мы рассчитали его диффузионную константу с использованием уравнения Дебая-Смо-луховского. Значение этой константы составляет «10 -15 см 3 • с -1. Оно оказалось очень близким к константе скорости связывания NF-kB с ДНК, известной из предшествующих работ. Так, по-видимому, в пространственном распределении NF-kB по ядру и диффузия, и связывание ДНК играют равную роль. Приведенная теоретическая оценка подчеркивает значимость трехмерной структуры генома в регуляции генной экспрессии. По всей вероятности, управление генной экспрессией транскрипционными факторами существенно зависит от локальной концентрации открытого хроматина.

АНИСИМОВ А.П., АРБАТСКИЙ Н.П., ДРУЦКАЯ М.С., КНИРЕЛЬ Ю.А., КОНДАКОВА А.Н., КОРНЕЕВ К.В., КРУГЛОВ А.А., КУПРАШ Д.В., НЕДОСПАСОВ С.А., НОВОТОЦКАЯ-ВЛАСОВА К.А., РИВКИНА Е.М. — 2014 г.

Изучена корреляция химической структуры липида А у различных грамотрицательных бактерий с биологической активностью липополисахарида (ЛПС) - агониста рецептора врожденного иммунитета, Toll-подобного рецептора 4 (TLR4). Очищенные ЛПС были количественно охарактеризованы in vitro на культуре первичных макрофагов костного мозга мыши по способности активировать продукцию фактора некроза опухолей (TNF). ЛПС чумного микроба Yersinia pestis дикого типа сравнивали с ЛПС мутантных штаммов по генам ацилтрансфераз (lpxM, lpxP), ответственных за присоединение к липиду А вторичных ацильных групп (12 : 0 и 16 : 1). Установлено соответствие строения липида А двойного мутанта Y. pestis klpxM/klpxP структуре, ожидаемой на основании функций соответствующих ацилтрансфераз. Впервые химически охарактеризован липид А двух представителей древних психротрофных бактерий рода Psychrobacter и исследована биологическая активность их ЛПС, содержащих в составе липида А жирные кислоты с более короткими ацильными цепями (С10-С12), чем в липиде А из ЛПС Y. pestis или E. coli (С12-С16). Выявлена корреляция между способностью ЛПС активировать продукцию TNF в культуре макрофагов и числом ацильных остатков и длиной цепи ацильных групп в липиде А.

БОРИСОВА-МУБАРАКШИНА М.М., ВЕТОШКИНА Д.В., ИВАНОВ Б.Н., НАЙДОВ И.А., РУДЕНКО Н.Н., ФЕДОРЧУК Т.П., ШИРШИКОВА Г.Н. — 2014 г.

При увеличении освещенности растений арабидопсиса возрастает степень восстановления пула пластохи-нона в фотосинтетической электрон-транспортной цепи и уменьшается эффективный квантовый выход фотосинтетического электронного транспорта. Через 5 дней роста растений при повышенной освещенности эти характеристики в данных условиях высокой освещенности возвращаются к значениям, наблюдавшимся при низкой освещенности. В течение этого же времени уменьшается размер светособира-ющей антенны фотосистемы 2, что коррелирует с уменьшением количества белков, входящих в состав ее внешних пигмент-белковых комплексов. Найдено, что уменьшение количества белков происходит вследствие уменьшения интенсивности транскрипции их генов.

БАЖИН А.В., ГОЛОВАСТОВА М.О., ФИЛИППОВ П.П. — 2014 г.

Ряд фоторецепторных белков, в норме специфичных для сетчатки глаза, аберрантно экспрессируется в некоторых злокачественных опухолях. Это - рековерин, зрительный родопсин, трансдуцин, cGMP-фосфодиэстераза 6 (ФДЭ 6), cGMP-зависимые катионные каналы, гуанилилциклаза 1, родопсинкиназа и аррестин. По аналогии с раково-тестикулярными антигенами указанные фоторецепторные белки выделены в группу раково-сетчаточных антигенов. В случае рековерина показано, что в его аберрантную экспрессию вовлечено аберрантное деметилирование промотерной области гена этого белка. На вопрос о функциональности аберрантной экспрессии раково-сетчаточных антигенов для опухолевых клеток положительный ответ получен для трансдуцина и ФДЭ 6, поскольку найдено, что в клетках кожной меланомы функционирует каскад Wnt5a → Frizzled-2 → трансдуцин → ФДЭ 6. Обсуждаются события, сопровождающие передачу сигнала в этом каскаде, в том числе с участием ионов кальция и cGMP-зависимой протеинкиназы (протеинкиназы G).

ГОНЧАРОВА Н.Ю., РУБЦОВ А.Ш., СТОРИ К.Б., ХУ Л.Я. — 2014 г.

Исследованы кинетические свойства глюкокиназы (ГЛК) из печени активных и находящихся в зимней спячке (гибернирующих) сусликов Spermophilus undulatus. Переход сусликов в спячку сопровождается резким уменьшением уровня глюкозы (Glc) в крови (с 14 до 2,9 мМ) и значительным (в 7 раз) снижением активности ГЛК в цитозольной фракции печени. Получены препараты ГЛК из печени активного и гиберни-рующего сусликов, практически лишенные примеси других молекулярных форм гексокиназы. При температуре 25° в присутствии стабилизаторов (ионы К+ и ДТТ) зависимость активности ГЛК от концентрации Glc для фермента печени летнего суслика имеет вид выраженной сигмоиды (коэффициент Хилла, h = 1,7; S 05 = 6,23 мМ). Такая же зависимость активности от концентрации Glc характерна для ГЛК печени крысы. Однако при снижении температуры до 2° (имитация условий гибернации) эта зависимость становится почти гиперболической (h = 1,16), а сродство ГЛК к субстрату снижается (S 05 = 23 мМ). У суслика, находящегося в спячке, зависимость активности ГЛК от концентрации Glc при температуре 25° близка к таковой активного животного (h = 1,60; S 05 = 9,0 мМ); при 2° сигмоидальность кривой менее выражена, а сродство к Glc резко снижается (h = 1,20; S 05 = 45 мМ). Расчеты, учитывающие кинетические параметры фермента и сезонные изменения концентрации Glc в крови, показывают, что активность ГЛК в печени сусликов при гибернации снижается примерно в 5500 раз.

КОРНИЛОВА Е.С. — 2014 г.

Рецептор-опосредованный клатрин-зависимый эндоцитоз - наиболее специфичный путь попадания в клетку макромолекул и макромолекулярных комплексов, в общем случае именуемых лигандами. Связываясь со своими трансмембранными рецепторами, лиганды попадают в эндоцитозные пузырьки, после слияния которых формируются так называемые ранние эндосомы. Интернализованные в них лиганд-рецепторные комплексы подвергаются сортировке в зависимости от своей природы: метаболические рецепторы рециклируют обратно на плазматическую мембрану, тогда как сигнальные рецепторы и их лиганды (например, рецепторы тирозинкиназы или рецепторы, сопряженные с тирозинкиназами) направляются во внутренние пузырьки мультивезикулярных поздних эндосом и затем деградируют после взаимодействия последних с лизосомами. В ходе этих процессов происходит перемещение эндосом с периферии клетки в околоядерную область, а также многочисленные процессы слияния, инвагинирования, тубуляции и разделения мембран. В обзоре рассматриваются современные представления о механизмах сортировки лиганд-рецепторных комплексов, взаимодействии эндосом с микротрубочками и актином и роль этих взаимодействий в процессах созревания эндосом.

СЕВЕРИН Ф.Ф., СКУЛАЧЕВ В.П., СКУЛАЧЕВ М.В. — 2014 г.

Излагается концепция, в которой старение организма рассматривается как дополнительная факультативная функция, способствующая эволюции, но контрпродуктивная для индивида. Предполагается, что старение может тормозиться или даже прекращаться в целях более полной мобилизации сил для выживания индивида. Такого рода решение принимается, возможно, на основе анализа организмом сигналов специальных рецепторов, отслеживающих ряд параметров внутренней и внешней среды. Один из таких параметров - количество пищи, доступной для использования. Ограничение питания воспринимается организмом как сигнал наступающего голода, в ответ на который организм тормозит свои контрпродуктивные программы и, в частности, старение. Предполагается, что уровень белка, поступающего в организм с пищей, оценивается по концентрации в крови одной из незаменимых аминокислот (метионина), углеводов - глюкозы, жиров - свободной жирной кислоты. В условиях достатка пищи перечисленные рецепторы подают сигнал, разрешающий старение. При недостатке пищи такой сигнал отменяется, и тем самым старение тормозится, т.е. замедляется возрастное ослабление физиологических функций и увеличивается продолжительность жизни (хорошо известный геропротекторный эффект частичного ограничения питания). На C. elegans подобным образом действует также понижение температуры среды. Это геропротекторное действие снимается нокаутом одного из холодовых рецепторов, причем замена рецептора C. elegans на аналогичный рецептор человека восстанавливает способность пониженной температуры продлевать жизнь нематоды. На мышах выявлена цепочка событий, связывающих рецептор с механизмом старения. Таким оказался один из рецепторов боли в нейронах, нервные окончания которых оплетают Р-клетки поджелудочной железы. Активация этих рецепторов, происходящая с возрастом, тормозит работу генов синтеза инсулина в Р-клетках. Нарушение секреции инсулина приводит к окислительному стрессу, хроническим воспалениям и диабету второго типа, который может рассматриваться как один из видов старческого феноптоза. Также рассмотрены некоторые психологические факторы регуляции программы старения.

ДЫМШИЦ Г.Ш., КОЛОСОВА Н.Г., ФЕДОСЕЕВА Л.А., ШЕВЕЛЕВ О.Б. — 2014 г.

Наиболее популярная стратегия нормирования данных обратной транскрипции и ПЦР (ОТ-ПЦР) включает их представление в сравнении с экспрессией генов домашнего хозяйства. Однако соответствие выбранных генов сравнения требованиям стабильности их экспрессии в условиях эксперимента не всегда соблюдается. Как альтернативу мы использовали рибонуклеиновые фаговые частицы в качестве экзогенного внутреннего контроля и показали, что этот способ нормирования обеспечивает простой и надежный метод количественной оценки в экспериментах ОТ-ПЦР. Применяя основанное на фаговых частицах нормирование, мы проанализировали уровень мРНК трех популярных генов домашнего хозяйства, кодирующих Р-ак-тин (Actb), глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу (Gapdh) и рибосомный белок L30 (Rpl30), и показали сильную вариабельность их экспрессии на ранних этапах развития мозга крысы, что свидетельствует о непригодности этих генов как контроля при изучении экспрессии генов в развивающемся мозге крысы ни по отдельности, ни в сочетании друг с другом. Используя основанный на фаговых частицах контроль, мы показали как межлинейные различия, так и связанные с возрастом изменения в экспрессии генов биосинтеза и деградации протеогликанов в развивающемся мозге преждевременно стареющих крыс линии OXYS и контрольной линии Вистар.

МАКАРОВА С.С., МОРОЗОВ С.Ю., СОЛОВЬЕВ А.Г. — 2014 г.

Показано, что а-спиральный белок табака Nt-4/1 формирует рибонуклеопротеидные комплексы in vitro. Данные, полученные методом задержки РНП комплексов в агарозном геле, были подтверждены вестерн-нозерн-гибридизацией. С помощью делеционных и точечных мутантов удалось локализовать участок РНК-связывания в положительно заряженной области С-терминального домена белка. Полученные в настоящей работе данные совместно с результатами, описанными ранее, свидетельствуют в пользу участия белка Nt-4/1 в распространении РНК-содержащих патогенов по растению.

ГРАЧЕВ С.В., КАБАНОВ Д.С., ПРОХОРЕНКО И.Р. — 2014 г.

Исследована роль а-субъединицы (CD11b) β 2-интегрина CD11b/CD18 в праймировании полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЛ) человека S- или Re-гликоформами эндотоксина из Escherichia coli к дыхательному взрыву, индуцированному бактериальным пептидом - fMLP. S- и Re-гликоформы эндотоксина из E. coli обнаружили сходную активность в праймировании ПМЛ к дыхательному взрыву, индуцированному fMLP. Собственно антитела к CD11b клона ICRF 44 и изотипический IgG1 практически не влияли на продукцию активных форм кислорода непраймированными ПМЛ в ответ на fMLP. Инкубация ПМЛ с антителами к CD11b также не влияла на fMLP-индуцированную продукцию активных форм кислорода клетками, праймированными эндотоксинами. Выдвинуто предположение об участии разных изоформ Fcy рецепторов в fMLP-индуцированной продукции АФК активированными ПМЛ.

ПЕТРОВ Н.С., ПОПОВ Б.В. — 2014 г.

Канонический сигнальный путь Wnt является ключевым регулятором самоподдержания и выбора клеточной судьбы в различных типах стволовых клеток. Общая популяция Р-катенина включает две его различные формы: сигнальный Р-катенин, который передает сигналы Wnt c клеточной мембраны к генам-мишеням, и мембранный белок, участвующий в формировании межклеточных контактных соединений. Ранее мы разработали модель in vitro эпителиальной дифференцировки мезенхимных стволовых клеток (МСК) при их кокультивировании с эпителиальными клетками линии А-549. Изучена роль Wnt2, секретируемого клетками А-549, в паракринной индукции Р-катенина в кокультивируемых МСК. Используя технику соматического нокдауна, мы получили культуры клеток А-549 с заторможенной экспрессией WNT2. В МСК, кокультивированных с контрольными клетками А-549, повышается уровень общеклеточного и сигнального Р-катенина, трансактивируется репортерная конструкция, содержащая сайты связывания белков семейства Lef/Tcf. Напротив, в МСК, кокультивированных с клетками А-549 с заторможенной экспрессией WNT2, Р-катенин не индуцируется, но повышается уровень общеклеточного белка. Предположено, что Wnt2, секретируемый клетками А-549, индуцирует в кокультивируемых МСК сигнальный путь Wnt/Р-катенин, тогда как сопутствующее повышение уровня общеклеточного Р-катенина связано с действием иного механизма.

ИВАНОВ Б.Н. — 2014 г.

В обзоре рассмотрены основные экспериментальные данные о роли, которую играет аскорбиновая кислота в поддержании фотосинтеза и в защите фотосинтетического аппарата от активных форм кислорода и фотоингибирования. Обсуждается функция аскорбиновой кислоты как донора электронов в «реакции Красновского» и ее физиологическая роль, изучение которой было начато А.А. Красновским в 80-х гг. XX века, как такого донора компонентам фотосинтетической электрон-транспортной цепи. Представлены данные о содержании и транспорте аскорбиновой кислоты в клетках растений и в хлоропластах.

АМЕЛЬКИНА Г.А., ГЕНРИХЕ Е.Е., ИЛЛАРИОШКИН С.Н., ИСАЕВ Н.К., СКРЕБИЦКИЙ В.Г., СТЕЛЬМАШУК Е.В., ХАСПЕКОВ Л.Г. — 2014 г.

Дисбаланс ионов цинка (Zn 2+) и меди (Cu 2+) в центральной нервной системе вовлечен в патогенез многих нейродегенеративных заболеваний, таких как мультисистемная атрофия, боковой амиотрофический склероз, болезни Крейтцфельдта-Якоба, Вильсона-Коновалова, Альцгеймера (БА), Паркинсона (БП). Последние две разновидности церебральной патологии являются наиболее распространенными возрастными заболеваниями, в механизмах патогенеза которых нарушения гомеостаза Zn 2+ и Cu 2+ играют важную роль. В данном обзоре предпринята попытка суммировать и систематизировать имеющиеся в настоящее время данные исследований по этой проблеме. Рассмотрены взаимодействия Zn 2+ и Cu 2+ с APP, бета-амилоидом (Абета), белком тау, металлотионеинами, в8К3бета и их роль в генерации свободных радикалов при БА и БП. Проведенный анализ литературы позволяет заключить, что основные патогенетические факторы БА и БП (окислительный стресс, нарушение структуры и агрегация белков, дисфункция митохондрий, энергетический дефицит), которые инициируют каскад реакций, приводящих, в конечном счете, к дисфункции нейронных сетей, опосредуются дисбалансом Zn 2+ и Cu 2+

ГИОЕВА Ф.К. — 2014 г.

Сигнальная и транспортная системы эукариотической клетки тесно связаны: внутриклеточный транспорт по микротрубочкам и микрофиламентам необходим для обеспечения локализации компонентов сигнальных путей, а сигнальные молекулы регулируют активность моторных белков и их взаимодействие с треками и грузом. Однако в последнее время появились данные о том, что активный транспорт включается в сигнальный путь как средство передачи сигнала. Обзор посвящен этому специфическому аспекту взаимодействия двух систем клетки.

ГИЛЕП А.А., СЕРГЕЕВ Г.В., УСАНОВ С.А. — 2014 г.

С целью оценки вклада структурных элементов цитохрома b 5 в процесс взаимодействия с цитохромами Р450 и катализа с участием этого гемопротеида нами проведен сравнительный структурный и функциональный анализ двух основных форм мембраносвязанных цитохромов b 5 млекопитающих - микросомальной и ми-тохондриальной, сконструированы химерные формы гемопротеидов, в которых гидрофильный домен одной формы гемопротеида заменен гидрофильным доменом другой формы, исследовано влияние высоко-очищенных нативных и химерных гемопротеидов на ферментативную активность рекомбинантных цито-хромов Р4503А4 и Р45017А1 (CYP3A4 и CYP17A1). Нами показано, что наличие гидрофобного домена в структуре цитохрома b 5 является необходимым условием его эффективного взаимодействия с редокс-парт-нерами, однако природа гидрофобного домена не оказывает значимого влияния на способность цитохрома b 5 стимулировать активность цитохромов Р450. Функциональные свойства цитохрома b 5 определяются, в значительной степени, структурой гем-связывающего домена.