научный журнал по биологии Российский иммунологический журнал ISSN: 1028-7221

2009

КУЗЬМЕНКО Н.Б., КУРНИКОВА М.А., ПРОДЕУС А.П., ШАГИН Д.А., ШАГИНА И.А., ЩЕРБИНА А.Ю. — 2009 г.

«Нулевые» аллели генов, кодирующих С4 компонент системы комплемента (C4Q0, включая С4АQ0 и С4ВQ0), предрасполагают к развитию системной красной волчанки (СКВ) в некоторых этнических группах. Целью данного исследования явилось изучение роли «нулевых» аллелей гена С4 компонента комплемента в патогенезе СКВ у детей российской популяции. В ходе данной работы было обследовано 36 детей, больных СКВ, и 50 детей без клинических признаков аутоиммунной патологии. Кроме того, вторую контрольную группу составили 26 здоровых взрослых. «Нулевые» аллели генов С4А/В были определены при помощи метода, основанного на мультиплексной ПЦР. 28-kb делеция гена C4A определялась методом «long distance» ПЦР. Наличие двунуклеотидной вставки в 29 экзоне С4 генов определялось методом аллель-специфичного ПЦР и затем подтверждалось при помощи прямого секвенирования 29 экзона. Гомозиготные дефициты генов С4А и С4В обнаруживались с одинаковой частотой среди пациентов и в группе контроля детского возраста. Нами не было найдено достоверных различий в частоте встречаемости большой делеции гена С4А в обеих группах (11% среди пациентов и 18% в контроле). Частота встречаемости двунуклеотидной вставки в 29 экзоне гена С4А была ниже, чем заявлено в опубликованных ранее исследованиях. Дефекты гена С4 среди здоровых взрослых встречаются реже, чем в контрольной группе детей. Наши данные отличаются от результатов опубликованных ранее европейских исследований, возможно, по причине этнических особенностей детей, проживающих на территории России. По результатам, полученным в данной работе, нельзя говорить о специфической роли дефектов ни гена С4А, ни гена С4В при системной красной волчанке в детской популяции россиян.

АРТАМОНОВ С.А., ДОЛГУШИН И.И., КОЛЕСНИКОВ О.Л., КОЛЕСНИКОВА А.А., КОЛОБОВ А.А., СЕЛЯНИНА Г.А., СИМБИРЦЕВ А.С. — 2009 г.

Бестим представляет собой синтетический дипетид – γ-D-Glu-L-Trp – гамма D-глутамил- L-триптофан натриевая соль. Препарат разработан в ГНЦ ГосНИИ ОЧБ, г. Санкт-Петербург и разрешен МЗ РФ к клиническому использованию при лечении больных с вторичными иммунодефицитными. Приведены данные о способности бесима снижать активность Th2- и усиливть Тh1- иммунный ответ за счет снижения продукции IL-4 и стимуляции выработки IFNγ. Бестим также снижает секрецию IL-8 и увеличивает выработку IL-10. Применение Бестима сопровождается позитивными сдвигами иммунологических параметров и клинической симптоматики при хронической урогенитальной хламидийной инфекции, язвенной болезни, вторичном сифилисе кожи и слизистых оболочек, хроническом рецидивирующем кандидозном вульвовагините. Назначение Бестима также повышает эффективность вакцинации против гепатита В у больных с вторичным иммунодефицитом.

ВОЛЬСКИЙ Н.Н., КОЗЛОВ В.А., КОЛЕСНИКОВА О.П., КУДАЕВА О.Т., ТКАЧЕВ В.О. — 2009 г.

В экспериментах in vivo и in vitro изучено влияние дегидроэпиандростерона сульфата (DHEA-S) и мурамилдипептида (MDP), обладающих оппозитными эффектами на Th1/ Th2-баланс, на активность NO-синтазы и аргиназы в макрофагах мышей (C57Bl6xDBA/2) F1. Установлено, что DHEA-S изменяет метаболическое состояние макрофагов в сторону преобладания NO-синтазной активности, способствуя, тем самым, активации клеток по классическому механизму. MDP, напротив, увеличивает активность аргиназы in vivo, что свидетельствует об альтернативной активации макрофагов. Эффекты дегидроэпиандростерона и мурамилдипептида могут быть тесно связаны с их оппозитным влиянием на Th1/ Th2-девиацию иммунного ответа.

ВАХИТОВ В.А., РАЗУМНАЯ Ф.Г., САДОВНИКОВ С.В., САЛИМГАРЕЕВА М.Х., СЕРЕДЕНИН С.Б., СИБИРЯК С.В. — 2009 г.

Изучено влияние селективного анксиолитика и нейропротектора афобазола (5-этокси- 2-[2-(морфолино)-этилтио]) бензимидазола дигидрохлорида) на индуцированную антиCD3 МКА и PHA пролиферацию лимфоцитов здоровых доноров в системе in vitro. В 72-часовых культурах мононуклеаров афобазол в концентрации 0,1 – 100 мкг/мл подавлял митогенный ответ лимфоцитов, индуцированный антиCD3 МКА, а в концентрации 10 мкг/мл и 100 мкг/мл митогенный ответ лимфоцитов, индуцированный PHA-P. Афобазол (10 мкг/мл) подавлял также индуцированный PHA митогенный ответ изолированной от моноцитов фракции лимфоцитов. Ингибиторный эффект препарата сопровождался снижением числа митотически активных клеток и интенсивности активационного апоптоза. При внесении в культуру через 48 часов после добавления митогенов и последующей 24-часовой инкубации афобазол (0,1 и 10 мкг/мл) в равной мере подавлял митогенный ответ клеток как при стимуляции антиCD3 МКА, так и PHА, что сопровождалось как снижением интенсивности митогенеза, так и незначительным усилением апоптоза.

АХМАТОВА Н.К., ГРУБЕР И.М., КУЗЬМЕНКО О.М., КУНЯГИНА О.В., ЛЕБЕДИНСКАЯ Е.А. — 2009 г.

Изучено влияние стафилококковой вакцины (СВ) на продукцию цитокинов у мышей при индуцированной иммуносупрессии. Мышам 4-х кратно вводили циклофосфан (100 мг/кг). Через 24 часа внутрибрюшинно вводили 200 мкг СВ. СВ на фоне ЦФ значительно повышала уровень ИЛ-5 по сравнению с ЦФ и контролем. На шестые сутки вакцина усиливала продукцию ИФН c, а в сыворотках крови мышей предотвращала чрезмерный выброс ФНО a и сдерживала резкое падение ИЛ-6. Полученные данные свидетельствуют о корригирующем влиянии Стафиловак на индуцированную иммуносупрессию.

БЫКОВСКАЯ Е.Ю., КАПРАНОВА Н.П., НЕСТЕРОВА И.В., РОМЕНСКАЯ В.А., ШВЫДЧЕНКО И.Н. — 2009 г.

Целью настоящего исследования явилось изучение влияния N-ацетилглюкозаминил- β1-4-N-ацетилмурамоил-аланин-D-изоглутамина (ГМДП) на продукцию интерлейкина-8 (ИЛ-8) периферическими нейтрофильными гранулоцитами (НГ) в условиях патологического процесса (хронический гастрит, абсцессы брюшной полости, острый деструктивный панкреатит - ОДП в фазе развития гнойных осложнений) в эксперименте in vitro. Установлено, что ГМДП способен оказывать как стимулирующее (хронический гастрит), так и супрессирующее (ОДП, абсцессы) влияние на уровень нейтрофильной секреции ИЛ-8 при патологии. При этом ГМДП проявлял, в основном, самостоятельную активность (за исключением абсцессов), стимулируя ИЛ-8-секретирующую способность НГ при хроническом гастрите и супрессируя ее при ОДП. При абсцессах данный пептид модулирует уровень ЛПС-индуцированной продукции ИЛ-8 НГ, снижая ее до уровня спонтанной секреции. Результаты, полученные в данном исследовании, могут явиться перспективной основой для дальнейшего изучения влияния ГМДП на цитокин-секретирующую функцию НГ при патологии с целью возможности использования его в качестве лекарственного препарата для нормализации нейтрофильных дисфункций.

АГАПОВ М.А., ВАРИВОДА А.С., ГОРСКИЙ В.А., ГРЕЧЕНКО В.В., ИНДАРОКОВ В.А., КОВАЛЬЧУК Л.В., ЛЕОНЕНКО И.В., ХОРЕВА М.В. — 2009 г.

Целью данной работы было изучить влияние ингибитора циклооксигеназы (ЦОГ) - лорноксикама на выработку цитокинов, опосредованную лигандами Toll-подобных рецепторов (TLR), мононуклеарными клетками (МНК) периферической крови здоровых доноров in vitro и у больных с острым деструктивным панкреатитом в динамике заболевания. Выработку цитокинов МНК здоровых доноров in vitro стимулировали лигандами TLR: липополисахаридом (ЛПС) и пептидогликаном (ПГ). Лорноксикам достоверно ингибирует выработку как провоспалительных (ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-12, ФНОα), так и противовоспалительного (ИЛ-10) цитокина, ассоциированных с TLR1/2 и TLR4 МНК периферической крови здоровых доноров. У больных с острым деструктивным панкреатитом в сыворотке крови повышен уровень провоспалительных цитокинов (ИЛ-6 и ИЛ-8), концентрация ИЛ-6 и ИЛ-8 выше у больных с тяжелым течением заболевания. Проведение терапии с использованием лорноксикама приводит к достоверному снижению ИЛ-6 и ИЛ-8 к 6 суткам заболевания. У больных в группе сравнения к 6 суткам уровни ИЛ-6 и ИЛ-8 увеличиваются. Лиганды TLR1/2 (ПГ) и TLR4 (ЛПС) обладают выраженным стимулирующим действием in vitro на выработку ФНОα МНК, полученными в 1 сутки от начала заболевания при проведении стандартной базисной терапии. Увеличение индуцированной выработки цитокина свидетельствует о повышенной функциональной активности TLR2 и TLR4 у этих больных. К 6-м суткам стимулирующее влияние лигандов оставалось высоким. В основной группе больных, получающих лечение лорноксикамом, выявили, что стимулирующее влияние ПГ снижается и восстанавливается до значений сравнимых с группой здоровых доноров к 6 суткам. Таким образом, лорноксикам, как ингибитор циклооксигеназы, подавляет также выработку провоспалительных цитокинов МНК периферической крови здоровых доноров и больных с острым панкреатитом.

БАХМЕТЬЕВ Б.А., РАЕВ М.Б., СЛОБОДЧИКОВА С.В., ШМАГЕЛЬ К.В. — 2009 г.

Проведено исследование влияния человеческого трофобластического β1-гликопротеина на стимулированную люминолзависимую хемилюминесценцию лейкоцитов. Трофобластический β1-гликопротеин выделяли из сыворотки крови беременных женщин по оригинальной методике. Его эффект исследовали на лейкоцитах периферической крови здоровых мужчин. Показано выраженное подавляющее действие белка беременности на стимулированную опсонизированным и неопсонизированным зимозаном люминолзависимую хемилюминесценцию лейкоцитов. Эффект белка имел концентрационную зависимость.

БАГРАТАШВИЛИ В.Н., ГЕРАСИМОВ Ю.В., КОНДЮРИН А.В., СВИРИДОВ А.П., ТАМБИЕВ А.Х., ЧАЙЛАХЯН Р.К. — 2009 г.

Исследовали влияние фрагментарного лазерного нагрева на изменение численности мультипотентных иезенхимальны стволовых клеток (ММСК) в костном мозге крыс в зависимости от дозы излучения (длина волны 1560 нм). Облучение костного мозга голени крыс производили через костную ткань с помощью оптического волокна диаметром 0,6 мм контактно в десяти точках отстоящих на расстоянии 1 мм друг от друга. Длина волны лазерного излучения 1560 нм, длительность 0,5 с, мощность варьировали в пределах от 0,1 до 1,2 Вт. Одинаковое число клеток суспензии, приготовленной из костного мозга облученной и контрлатеральной голени эксплантировали в пластиковые флаконы. Культивирование продолжалось в течение 10-12 дней - времени, когда формирование колоний в культурах заканчивается. Подсчет числа колоний, выросших в культурах костного мозга облученных и контрлатеральных голеней, выявил двукратное увеличение численности ММСК костного мозга облученной голени при мощности 0,2 Вт и ее подавление при мощности, превышающей 0,6 Вт. Такое поведение может быть объяснено гормезисным эффектом.

КОЗЛОВ И.Г., НАСИБОВ Р.С., ПАВЛОВА С.И., ЦИЦУАШВИЛИ М.Д., ШКОПОРОВ А.Н. — 2009 г.

Изучены эффекты препарата флавоноидов корня солодки (ФКС) на функции фагоцитов в моделях in vitro и in vivo. В моделях in vitro показано, что ФКС не подавляет поглотительную активность нейтрофилов и моноцитов, выделенных из периферической крови человека, но может снижать в них интенсивность окислительного «взрыва», индуцированного ФМА. ФКС способны уменьшать бактерицидную активность фагоцитов крови человека. В моделях in vivo ФКС не подавлял миграцию нейтрофилов и макрофагов.

БЛИНОВА Е.А., БОРИСОВ В.И., КОЖЕВНИКОВ В.С. — 2009 г.

В данной работе исследовалась экспрессия CD4, CD8, CD25 и CD28 маркеров на Т-лимфоцитах у доноров при поликлональной активации анти-CD3 антителами с добавлением ИЛ-2 в динамике клеточных делений in vitro. Оценку количества совершенных делений, выявляемых витальным красителем CFSE, и экспрессию CD антигенов проводили на проточном цитофлуориметре. В результате проведенных исследований было обнаружено, что на 7-е сутки лимфоциты максимально совершают 5 делений, и в большей степени пролиферируют CD8 + лимфоциты. Уровень апоптоза для CD4 + лимфоцитов совершивших 4-5 делений резко увеличивается, в отличие от CD8 + лимфоцитов. Это приводит к резкому изменению субпопуляционного состава в культуре: снижается количество CD4 + и увеличивается количество CD8 + клеток. После 2 делений происходит снижение количества как CD4 +CD25 +, так и CD8 +CD25 + лимфоцитов и резкое нарастание CD4 +CD28 -, тогда как CD8 +CD28 - изменяется незначительно, в независимости от количества совершенных делений. Полученные данные указывают на то, что субпопуляция CD4 + лимфоцитов менее быстро отвечает на стимуляцию и более быстро «стареет» при культивировании in vitro относительно CD8 + лимфоцитов, что приводит к резкому изменению субпопуляционного состава уже на 7-е сутки. Поэтому использование культивированных лимфоцитов для модулирования иммунных реакций, как in vitro, так и in vivo должно сопровождаться тщательным изучением их особенностей.

ЖЕЛЕЗНИКОВА Г.Ф., РАЗДЬЯКОНОВА И.В., ТИХОМИРОВА О.В. — 2009 г.

Обзор посвящен калицивирусной инфекции, давно известной у животных, но сравнительно недавно открытой и у человека. Калицивирусы человека вызывают вспышки острого гастроэнтерита во всех странах мира, что делает весьма актуальным исследование их иммунобиологии. Описывается история открытия, изменчивость калицивирусов, генетика резистентности и механизмы иммунной защиты хозяина.

СОТНИКОВА Н.Ю. — 2009 г.

Иммунная система слизистых представляет первую линию обороны против колонизации вирусными и бактериальными патогенами. Несмотря на то, что иммунная система слизистых анатомически разделена, все ее зоны функционально связаны, и представляют одну общую систему. В то же время иммунная система слизистых может действовать независимо от системного иммунитета, что делает оценку состояния иммунной системы слизистых необходимым элементом клинической иммунологии. Около половины лимфоцитов находятся в так называемой лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистыми (Mucosa-associated lymphoid tissue – MALT). К наиболее изученным представителям MALT относятся лимфоидная ткань, ассоциированная с кишечником (gut-associated lym- phoid tissue – GALT), лимфоидная ткань, ассоциированная с бронхами (bronchus-associ- ated lymphoid tissue – BALT) и лимфоидная ткань, ассоциированная с носоглоткой (na- sopharynx associated lymphoid tissue – NALT). К менее изученным относятся лимфоидная ткань, ассоциированная с конъюнктивой (conjunctiva-associated lymphoid tissue – CALT), слезным протоком (lacrimal duct associated – LDALT), глоткой (larynx-associated – LALT) и слюнным протоком (salivary duct-associated – DALT). Иммунитет слизистых отличается от системного сильно развитыми механизмами врожденной защиты, существованием уникальных типов клеток, колонизацией слизистых и экзокринных желез клетками, происходящими из тканей слизистых оболочек, выраженной микробной колонизацией, предпочтительной индукцией не воспалительного ответа на неопасные АГ. Иммунные реакции MALT могут в значительной мере регулироваться бактериальной микрофлорой. Пребиотики и пробиотики повышают защиту организма. Пребиотики при попадании в кишечник меняют микроокружение, способствуют росту бифидо- и лактобактерий, то есть пробиотиков и сдвигают иммунный баланс в благоприятную сторону. Пробиотики участвуют в регуляции иммунного ответа хозяина, контроле синтеза провоспалительных и регуляторных цитокинов.

ЗУРОЧКА А.В., КАЗАЧКОВ Е.Л., РЯБОВА Л.В. — 2009 г.

Изучали состояние системы регуляции лейкоцитов у больных бронхиальной астмы в стадии ремиссии при помощи определения уровня спонтанной продукции цитокинов (ИЛ-4, ИЛ-1b, ИЛ-10 и ИФНc) в супернатантах цельной крови и в бронхоальвеолярном лаваже в сравнении с контролем. Одновременно проводили диагностическую фибробронхоскопию для определения характера изменений, распространенности и интенсивности воспаления с морфометрическим и стереологическим исследованием бронхобиоптатов. Результаты исследования показали, что уже на ранней стадии развития бронхиальной астмы формируются элементы хронического воспалительного процесса, которые характеризуются накоплением различных воспалительных клеток, таких как эозинофилы, нейтрофилы, альвеолярные макрофаги и моноциты, на местном уровне. В то же время происходят изменения в стенке бронха с формированием воспалительного процесса 1–2 степени в 100% случаев и раннее формирование морфологических изменений, характерных для выраженных воспалительных процессов, вплоть до формирования процессов ремоделирования. Все это является основой для изменения характера и количества продуцируемых цитокинов. Также выявлено, что характер секреции цитокинов периферической крови идентичен характеру секреции их в легочной ткани.

БУНЕВА В.Н., ВАСИЛЕНКО Н.Л., ЗАКСАС Н.П., НЕВИНСКИЙ Г.А., СИНИЦИНА О.И., ТОЛМАЧЕВА А.С. — 2009 г.

Электрофоретически гомогенные препараты IgG были получены из крови девяти здоровых крыс линии Wistar аффинной хроматографией на Protein A-Sepharose. Показано, что поликлональные IgG гетерогенны по сродству к Protein A-Sepharose. После выделения все препараты IgG частично сохраняют связанные с ними эндогенные ионы металлов, относительное содержание которых зависит от индивидуального препарата и в среднем увеличивается в порядке: Fe ≥ Pb ≥ Zn ≥ Cu ≥ Al ≥ Ca ≥ Ni ≥ Mn > Co ≥ Mg. Показано, что в присутствии (пероксидазная активность) и в отсутствии Н 2О 2 (оксидоредуктазная активность) препараты IgG, содержащие эндогенные металлы, способны с высокой эффективностью окислять 3,3’-диаминобензидин (ДАБ), но полностью неактивны после удаления ионов металлов с помощью ЭДТА. Добавление 0,1 М КСl в большинстве случаев активирует препараты IgG, но в некоторых случаях наблюдается ингибирование реакций пероксидазного и оксидоредуктазного окисления ДАБ. Предполагается, что различие в эффекте КСl может быть связано с каталитической гетерогенностью абзимов, а также с разной эффективностью взаимодействия эндогенных ионов металлов с препаратами IgG и возможностью вытеснения некоторых из них из комплекса с АТ ионами K +.

БЕЛОВА О.В. — 2009 г.

В обзорной статье приводятся данные по иммунологическим изменениям при псориазе. Акцентируется внимание на сдвиге регуляции Т-лимфоцитов в сторону Т-хелперов типа 1 (Th1) и цитотоксических Т-лимфоцитов типа 1 (Тс1). Приводятся данные по нарушению функции клеток: лимфоцитов, естественных киллеров, дендритных клеток, кератиноцитов, эндотелиальных клеток, тучных клеток, эозинофилов, полиморфноядерных лейкоцитов, моноцитов и фибробластов. Анализируется роль цитокинов в патогенезе псориаза: хемокинов, интерлейкинов, интерферонов, фактора некроза опухолей, факторов роста и некоторых других биологически активных молекул. Приводится одна из гипотез по развитию псориаза.

БИКБОВ М.М., МАКСИМОВ И.В., СИБИРЯК С.В., ХАЛИМОВ А.Р. — 2009 г.

Изучено влияние олигосахаридов хитозана со степенью деацетилирования 30-35% и 60-65% на показатели пролиферативной активности Т-лимфобластоидных клеток, функциональной активности моноцитов и митогенез лимфоцитов периферической крови.

АРДЕМАСОВА З.А., ГАРИБ Ф.Ю., ЕРШОВ Ф.И., КАЛИХЕВИЧ В.Н., МИРОНОВА Т.В., ОСПЕЛЬНИКОВА Т.П., РИЗОПУЛУ А.П. — 2009 г.

При одновременном введении мышам синтезированного нами оригинального трипептида саногена и акридонуксусной кислоты (АУК) обнаружен выраженный синергизм в индукции «раннего» и «позднего» эндогенного интерферона, обладающего высокой противовирусной активностью. Показано, что известный дипептидный иммуномодулятор тимоген, состоящий из глутаминовой кислоты и триптофана, индуцирует продукцию интерферонов со значительной противовирусной активностью в системах in vitro и in vivo. Новый низкомолекулярный препарат ТАУК, синтетизированный на основе глутамил-триптофана и акридонуксусной кислоты, является перспективным индуктором интерферона с повышенной противовирусной активностью, что выявлено в экспериментах с мышами и клетками крови людей.

2009